nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद. तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझरच्या आवृत्तीमध्ये CSS साठी मर्यादित समर्थन आहे. सर्वोत्तम अनुभवासाठी, आम्ही ब्राउझरची नवीनतम आवृत्ती वापरण्याची (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमधील कंपॅटिबिलिटी मोड बंद करण्याची) शिफारस करतो. याव्यतिरिक्त, सतत समर्थन सुनिश्चित करण्यासाठी, या साइटमध्ये स्टाईल्स किंवा जावास्क्रिप्ट समाविष्ट केली जाणार नाही.
मेलामाइन हा एक मान्यताप्राप्त अन्न प्रदूषक आहे, जो काही विशिष्ट अन्न प्रकारांमध्ये अपघाताने आणि हेतुपुरस्सर दोन्ही प्रकारे आढळू शकतो. या अभ्यासाचा उद्देश शिशु फॉर्म्युला आणि दुधाच्या पावडरमधील मेलामाइनचे शोधन आणि परिमापन तपासणे हा होता. इराणच्या विविध प्रदेशांतील, शिशु फॉर्म्युला आणि दुधाच्या पावडरसह, व्यावसायिकरित्या उपलब्ध असलेल्या एकूण ४० अन्न नमुन्यांचे विश्लेषण करण्यात आले. नमुन्यांमधील मेलामाइनचे अंदाजे प्रमाण हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी-अल्ट्राव्हायोलेट (HPLC-UV) प्रणालीचा वापर करून निश्चित करण्यात आले. ०.१–१.२ μg mL−1 या श्रेणीतील मेलामाइनच्या शोधनासाठी एक कॅलिब्रेशन वक्र (R2 = ०.९९२५) तयार करण्यात आला. परिमापन आणि शोधनाची मर्यादा अनुक्रमे १ μg mL−1 आणि ३ μg mL−1 होती. शिशु फॉर्म्युला आणि दुधाच्या पावडरमध्ये मेलामाइनची चाचणी करण्यात आली आणि निकालांवरून असे दिसून आले की शिशु फॉर्म्युला आणि दुधाच्या पावडरच्या नमुन्यांमध्ये मेलामाइनची पातळी अनुक्रमे 0.001–0.095 mg kg−1 आणि 0.001–0.004 mg kg−1 होती. ही मूल्ये युरोपियन युनियनच्या कायद्यानुसार आणि कोडेक्स अ‍ॅलिमेंटेरियसनुसार आहेत. हे लक्षात घेणे महत्त्वाचे आहे की कमी मेलामाइन असलेल्या या दुग्धजन्य पदार्थांच्या सेवनाने ग्राहकांच्या आरोग्याला कोणताही मोठा धोका निर्माण होत नाही. धोक्याच्या मूल्यांकनाच्या निकालांवरूनही याला दुजोरा मिळतो.
मेलामाइन हे सायनामाइडपासून मिळवलेले, C3H6N6 या आण्विक सूत्राचे एक सेंद्रिय संयुग आहे. त्याची पाण्यात विद्राव्यता खूप कमी आहे आणि त्यात अंदाजे ६६% नायट्रोजन असतो. मेलामाइन हे एक मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाणारे औद्योगिक संयुग असून, प्लास्टिक, खते आणि अन्न प्रक्रिया उपकरणे (अन्न पॅकेजिंग आणि स्वयंपाकघरातील भांडी यांसह) यांच्या उत्पादनात त्याचा मोठ्या प्रमाणावर कायदेशीर वापर होतो¹,². मेलामाइनचा उपयोग रोगांच्या उपचारांसाठी औषध वाहक म्हणूनही केला जातो. मेलामाइनमधील नायट्रोजनच्या उच्च प्रमाणामुळे या संयुगाचा गैरवापर होऊ शकतो आणि अन्न घटकांना प्रथिनांच्या रेणूंचे गुणधर्म प्राप्त होऊ शकतात³,⁴. त्यामुळे, दुग्धजन्य पदार्थांसह अन्न उत्पादनांमध्ये मेलामाइन मिसळल्याने नायट्रोजनचे प्रमाण वाढते. अशाप्रकारे, दुधातील प्रथिनांचे प्रमाण प्रत्यक्षात असलेल्या प्रमाणापेक्षा जास्त असल्याचा चुकीचा निष्कर्ष काढला गेला.
मेलामाइनचा प्रत्येक ग्रॅम मिसळल्याने अन्नातील प्रथिनांचे प्रमाण ०.४% ने वाढते. तथापि, मेलामाइन पाण्यात अत्यंत विद्राव्य आहे आणि त्यामुळे अधिक गंभीर हानी होऊ शकते. दुधासारख्या द्रव पदार्थांमध्ये १.३ ग्रॅम मेलामाइन मिसळल्यास दुधातील प्रथिनांचे प्रमाण ३०% ने वाढू शकते⁵,⁶. प्रथिनांचे प्रमाण वाढवण्यासाठी प्राण्यांच्या आणि अगदी मानवी अन्नामध्येही मेलामाइन मिसळले जात असले⁷, तरी कोडेक्स अलिमेंटेरियस कमिशन (CAC) आणि राष्ट्रीय प्राधिकरणांनी मेलामाइनला अन्न पदार्थ म्हणून मान्यता दिलेली नाही आणि गिळल्यास, श्वासावाटे आत घेतल्यास किंवा त्वचेद्वारे शोषले गेल्यास ते धोकादायक असल्याचे नमूद केले आहे. २०१२ मध्ये, जागतिक आरोग्य संघटनेच्या (WHO) इंटरनॅशनल एजन्सी फॉर रिसर्च ऑन कॅन्सरने मेलामाइनला वर्ग २ब (Class 2B) कर्करोगजनक म्हणून सूचीबद्ध केले, कारण ते मानवी आरोग्यासाठी हानिकारक असू शकते⁸. मेलामाइनच्या दीर्घकाळ संपर्कात राहिल्याने कर्करोग किंवा मूत्रपिंडाचे नुकसान होऊ शकते². अन्नातील मेलामाइन सायन्युरिक ऍसिडसोबत संयोग साधून पाण्यात न विरघळणारे पिवळे स्फटिक तयार करू शकते, ज्यामुळे मूत्रपिंड आणि मूत्राशयाच्या ऊतींचे नुकसान, तसेच मूत्रमार्गाचा कर्करोग आणि वजन घट होऊ शकते9,10. यामुळे तीव्र अन्न विषबाधा होऊ शकते आणि उच्च सांद्रतेमध्ये, विशेषतः अर्भक आणि लहान मुलांमध्ये, मृत्यू देखील होऊ शकतो.11 जागतिक आरोग्य संघटनेने (WHO) सीएसी (CAC) मार्गदर्शक तत्त्वांवर आधारित, मानवांसाठी मेलामाइनचे सहनशील दैनिक सेवन (TDI) दररोज 0.2 मिग्रॅ/किलो शारीरिक वजन इतके निश्चित केले आहे.12 अमेरिकेच्या अन्न आणि औषध प्रशासनाने (US FDA) अर्भक फॉर्म्युलामध्ये मेलामाइनसाठी कमाल अवशिष्ट पातळी 1 मिग्रॅ/किलो आणि इतर खाद्यपदार्थांमध्ये 2.5 मिग्रॅ/किलो इतकी निश्चित केली आहे.2,7 सप्टेंबर 2008 मध्ये, असे वृत्त आले की अनेक देशांतर्गत अर्भक फॉर्म्युला उत्पादकांनी त्यांच्या उत्पादनांमधील प्रथिनांचे प्रमाण वाढवण्यासाठी दुधाच्या पावडरमध्ये मेलामाइन मिसळले होते, ज्यामुळे दुधाच्या पावडरची विषबाधा झाली आणि देशभरात मेलामाइन विषबाधेची घटना घडली, ज्यात 294,000 पेक्षा जास्त मुले आजारी पडली आणि 50,000 पेक्षा जास्त लोकांना रुग्णालयात दाखल करावे लागले.13
शहरी जीवनातील अडचणी, आई किंवा बाळाचा आजार यांसारख्या विविध कारणांमुळे स्तनपान करणे नेहमीच शक्य होत नाही, ज्यामुळे बाळांना पाजण्यासाठी शिशु फॉर्म्युलाचा वापर केला जातो. परिणामी, रचनेमध्ये आईच्या दुधाच्या शक्य तितके जवळचे असलेले शिशु फॉर्म्युला तयार करण्यासाठी कारखाने स्थापन केले गेले आहेत¹⁴. बाजारात विकला जाणारा शिशु फॉर्म्युला सामान्यतः गाईच्या दुधापासून बनवला जातो आणि त्यात सामान्यतः चरबी, प्रथिने, कर्बोदके, जीवनसत्त्वे, खनिजे आणि इतर संयुगांचे विशेष मिश्रण असते. आईच्या दुधाच्या जवळ जाण्यासाठी, फॉर्म्युलामधील प्रथिने आणि चरबीचे प्रमाण बदलते आणि दुधाच्या प्रकारानुसार, जीवनसत्त्वे आणि लोहासारख्या खनिजांसारख्या संयुगांनी ते अधिक पौष्टिक बनवले जाते¹⁵. बाळे हा एक संवेदनशील गट असल्याने आणि विषबाधेचा धोका असल्याने, दुधाच्या पावडरच्या सेवनाची सुरक्षितता आरोग्यासाठी अत्यंत महत्त्वाची आहे. चीनमधील बाळांमध्ये मेलामाइन विषबाधेच्या प्रकरणानंतर, जगभरातील देशांनी या समस्येकडे बारकाईने लक्ष दिले आहे आणि या क्षेत्रातील संवेदनशीलता देखील वाढली आहे. त्यामुळे, बाळांच्या आरोग्याचे रक्षण करण्यासाठी शिशु फॉर्म्युला उत्पादनावरील नियंत्रण अधिक मजबूत करणे विशेष महत्त्वाचे आहे. अन्नामध्ये मेलामाइन शोधण्यासाठी विविध पद्धती आहेत, ज्यात हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (HPLC), इलेक्ट्रोफोरेसिस, संवेदी पद्धत, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री आणि अँटीजेन-अँटीबॉडी एन्झाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट अ‍ॅसे16 यांचा समावेश आहे. 2007 मध्ये, यूएस फूड अँड ड्रग ॲडमिनिस्ट्रेशन (FDA) ने अन्नातील मेलामाइन आणि सायन्युरिक ॲसिडचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी एक HPLC पद्धत विकसित करून प्रकाशित केली, जी मेलामाइनचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी सर्वात प्रभावी पद्धत आहे17.
नवीन इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी तंत्राचा वापर करून मोजलेल्या शिशु फॉर्म्युलामधील मेलामाइनची सांद्रता ०.३३ ते ०.९६ मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम (mg kg-1) इतकी होती.¹⁸ श्रीलंकेतील एका अभ्यासात संपूर्ण दुधाच्या पावडरमधील मेलामाइनची पातळी ०.३९ ते ०.८४ mg kg-1 इतकी असल्याचे आढळले. याव्यतिरिक्त, आयात केलेल्या शिशु फॉर्म्युलाच्या नमुन्यांमध्ये मेलामाइनची सर्वाधिक पातळी अनुक्रमे ०.९६ आणि ०.९४ mg/kg आढळली. ही पातळी नियामक मर्यादेपेक्षा (१ mg/kg) कमी आहे, परंतु ग्राहकांच्या सुरक्षिततेसाठी देखरेख कार्यक्रमाची आवश्यकता आहे.¹⁹
अनेक अभ्यासांमध्ये इराणी बालकांच्या दुधाच्या फॉर्म्युलामधील मेलामाइनच्या प्रमाणाची तपासणी करण्यात आली आहे. सुमारे ६५% नमुन्यांमध्ये मेलामाइन आढळले, ज्याचे सरासरी प्रमाण ०.७३ मिग्रॅ/किलो आणि कमाल प्रमाण ३.६३ मिग्रॅ/किलो होते. आणखी एका अभ्यासानुसार, बालकांच्या दुधाच्या फॉर्म्युलामधील मेलामाइनचे प्रमाण ०.३५ ते ३.४० मायक्रोग्रॅम/किलो दरम्यान होते, ज्याचे सरासरी प्रमाण १.३८ मायक्रोग्रॅम/किलो होते. एकूणच, इराणी बालकांच्या दुधाच्या फॉर्म्युलामधील मेलामाइनची उपस्थिती आणि प्रमाण विविध अभ्यासांमध्ये तपासले गेले आहे, आणि काही नमुन्यांमध्ये नियामक प्राधिकरणांनी निर्धारित केलेल्या कमाल मर्यादेपेक्षा (२.५ मिग्रॅ/किलो/फीड) जास्त मेलामाइन आढळले आहे.
अन्न उद्योगात दूध पावडरचा होणारा प्रचंड प्रत्यक्ष आणि अप्रत्यक्ष वापर, तसेच मुलांच्या पोषणात शिशु फॉर्म्युलाचे असलेले विशेष महत्त्व लक्षात घेता, दूध पावडर आणि शिशु फॉर्म्युलामधील मेलामाइन शोधण्याच्या पद्धतीची वैधता तपासणे, हा या अभ्यासाचा उद्देश होता. वास्तविक पाहता, या अभ्यासाचे पहिले उद्दिष्ट हाय परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (HPLC) आणि अल्ट्राव्हायोलेट (UV) डिटेक्शनचा वापर करून शिशु फॉर्म्युला आणि दूध पावडरमधील मेलामाइन भेसळ शोधण्यासाठी एक जलद, सोपी आणि अचूक परिमाणात्मक पद्धत विकसित करणे हे होते; दुसरे म्हणजे, इराणी बाजारपेठेत विकल्या जाणाऱ्या शिशु फॉर्म्युला आणि दूध पावडरमधील मेलामाइनचे प्रमाण निश्चित करणे, हे या अभ्यासाचे उद्दिष्ट होते.
मेलामाइन विश्लेषणासाठी वापरली जाणारी उपकरणे अन्न उत्पादनाच्या ठिकाणानुसार बदलतात. दूध आणि शिशु फॉर्म्युलामधील मेलामाइनचे अवशेष मोजण्यासाठी एक संवेदनशील आणि विश्वसनीय HPLC-UV विश्लेषण पद्धत वापरली गेली. दुग्धजन्य पदार्थांमध्ये विविध प्रथिने आणि चरबी असतात, ज्यामुळे मेलामाइनच्या मापनात अडथळा येऊ शकतो. म्हणून, सन आणि सहकाऱ्यांनी नमूद केल्याप्रमाणे, उपकरणाद्वारे विश्लेषण करण्यापूर्वी एक योग्य आणि प्रभावी शुद्धीकरण धोरण आवश्यक आहे. या अभ्यासात, आम्ही डिस्पोजेबल सिरिंज फिल्टर्स वापरले. या अभ्यासात, आम्ही शिशु फॉर्म्युला आणि दुधाच्या पावडरमधील मेलामाइन वेगळे करण्यासाठी C18 कॉलम वापरला. आकृती १ मध्ये मेलामाइन शोधण्यासाठीचा क्रोमॅटोग्राम दर्शविला आहे. याव्यतिरिक्त, ०.१–१.२ मिग्रॅ/किलो मेलामाइन असलेल्या नमुन्यांची रिकव्हरी ९५% ते १०९% पर्यंत होती, रिग्रेशन समीकरण y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925) होते, आणि सापेक्ष मानक विचलन (RSD) मूल्ये ०.८ ते २% पर्यंत होती. उपलब्ध माहितीवरून असे दिसून येते की, अभ्यासलेल्या सांद्रता श्रेणीमध्ये ही पद्धत विश्वसनीय आहे (तक्ता १). मेलामाइनची उपकरणीय शोध मर्यादा (LOD) आणि परिमाणीकरण मर्यादा (LOQ) अनुक्रमे १ μg mL−1 आणि ३ μg mL−1 होती. याव्यतिरिक्त, मेलामाइनच्या UV स्पेक्ट्रममध्ये २४२ nm वर एक शोषण बँड दिसून आला. ही शोध पद्धत संवेदनशील, विश्वसनीय आणि अचूक आहे. मेलामाइनची पातळी नियमितपणे निश्चित करण्यासाठी ही पद्धत वापरली जाऊ शकते.
अनेक लेखकांनी असेच निष्कर्ष प्रकाशित केले आहेत. दुग्धजन्य पदार्थांमधील मेलामाइनच्या विश्लेषणासाठी एक उच्च-कार्यक्षमता द्रव क्रोमॅटोग्राफी-फोटोडायोड अॅरे (HPLC) पद्धत विकसित करण्यात आली. २४० nm वर, मोजमापाची किमान मर्यादा दूध पावडरसाठी ३४० μg kg−1 आणि शिशु फॉर्म्युलासाठी २८० μg kg−1 होती. फिलाझी आणि सहकाऱ्यांनी (२०१२) अहवाल दिला की HPLC द्वारे शिशु फॉर्म्युलामध्ये मेलामाइन आढळले नाही. तथापि, ८% दूध पावडरच्या नमुन्यांमध्ये ०.५०५–०.८६ mg/kg या पातळीवर मेलामाइन आढळले. टिटलमिएट आणि सहकाऱ्यांनी२३ असाच एक अभ्यास केला आणि उच्च-कार्यक्षमता द्रव क्रोमॅटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री/MS (HPLC-MS/MS) द्वारे शिशु फॉर्म्युलामधील (नमुना क्रमांक: ७२) मेलामाइनचे प्रमाण अंदाजे ०.०४३१–०.३४६ mg kg−1 असल्याचे निश्चित केले. व्यंकटसामी आणि सहकाऱ्यांनी केलेल्या एका अभ्यासात... (२०१०) मध्ये, शिशु फॉर्म्युला आणि दुधामधील मेलामाइनचे प्रमाण मोजण्यासाठी हरित रसायनशास्त्र पद्धत (ॲसिटोनायट्राइलशिवाय) आणि रिव्हर्स्ड-फेज हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (RP-HPLC) वापरण्यात आली. नमुन्याच्या सांद्रतेची श्रेणी १.० ते ८० ग्रॅम/मिली होती आणि प्रतिसाद रेषीय होता (r > ०.९९९). या पद्धतीमध्ये ५-४० ग्रॅम/मिली सांद्रता श्रेणीमध्ये ९७.२-१०१.२ इतकी रिकव्हरी दिसून आली आणि पुनरुत्पादकता १.०% सापेक्ष मानक विचलनापेक्षा कमी होती. शिवाय, निरीक्षित LOD आणि LOQ अनुक्रमे ०.१ ग्रॅम/मिली आणि ०.२ ग्रॅम/मिली १२४ होते. लटर आणि इतर (२०११) यांनी HPLC-UV वापरून गाईचे दूध आणि दुधावर आधारित शिशु फॉर्म्युलामधील मेलामाइन दूषण निश्चित केले. मेलामाइनची सांद्रता < ०.२ ते २.५२ मिग्रॅ/किलो या दरम्यान होती. HPLC-UV पद्धतीची रेखीय गतिशील श्रेणी (linear dynamic range) गाईच्या दुधासाठी 0.05 ते 2.5 mg kg−1, <15% प्रथिन वस्तुमान अंश असलेल्या शिशु फॉर्म्युलासाठी 0.13 ते 6.25 mg kg−1 आणि 15% प्रथिन वस्तुमान अंश असलेल्या शिशु फॉर्म्युलासाठी 0.25 ते 12.5 mg kg−1 होती. LOD (आणि LOQ) चे निकाल गाईच्या दुधासाठी 0.03 mg kg−1 (0.09 mg kg−1), <15% प्रथिन असलेल्या शिशु फॉर्म्युलासाठी 0.06 mg kg−1 (0.18 mg kg−1) आणि 15% प्रथिन असलेल्या शिशु फॉर्म्युलासाठी 0.12 mg kg−1 (0.36 mg kg−1) होते, ज्यामध्ये LOD आणि LOQ साठी सिग्नल-टू-नॉइज गुणोत्तर (signal-to-noise ratio) अनुक्रमे 3 आणि 1025 होते. Diebes et al. (२०१२) यांनी HPLC/DMD वापरून शिशु फॉर्म्युला आणि दूध पावडरच्या नमुन्यांमधील मेलामाइनच्या पातळीचा अभ्यास केला. शिशु फॉर्म्युलामध्ये, सर्वात कमी आणि सर्वात जास्त पातळी अनुक्रमे ९.४९ मिग्रॅ/किलो आणि २५८ मिग्रॅ/किलो होती. शोध मर्यादा (LOD) ०.०५ मिग्रॅ/किलो होती.
जावेद आणि इतरांनी अहवाल दिला की फूरियर ट्रान्सफॉर्म इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (FT-MIR) द्वारे बालकांच्या फॉर्म्युलामध्ये मेलामाइनचे अवशेष 0.002–2 mg kg−1 च्या श्रेणीत होते (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1). रेझाई आणि इतरांनी²⁷ मेलामाइनचा अंदाज घेण्यासाठी HPLC-DDA (λ = 220 nm) पद्धत प्रस्तावित केली आणि दुधाच्या पावडरसाठी 0.08 μg mL−1 चा LOQ प्राप्त केला, जो या अभ्यासात मिळालेल्या पातळीपेक्षा कमी होता. सन आणि इतरांनी सॉलिड फेज एक्सट्रॅक्शन (SPE) द्वारे द्रव दुधात मेलामाइन शोधण्यासाठी RP-HPLC-DAD विकसित केले. त्यांना अनुक्रमे 18 आणि 60 μg kg−128 चा LOD आणि LOQ मिळाला, जो सध्याच्या अभ्यासापेक्षा अधिक संवेदनशील आहे. मोंटेसानो आणि इतरांनी... प्रोटीन सप्लिमेंट्समधील मेलामाइनचे प्रमाण मोजण्यासाठी HPLC-DMD पद्धतीची प्रभावीता 0.05–3 mg/kg च्या मापन मर्यादेसह पुष्टी केली, जी या अभ्यासात वापरलेल्या पद्धतीपेक्षा कमी संवेदनशील होती29.
निःसंशयपणे, विश्लेषणात्मक प्रयोगशाळा विविध नमुन्यांमधील प्रदूषकांचे निरीक्षण करून पर्यावरणाचे संरक्षण करण्यात महत्त्वाची भूमिका बजावतात. तथापि, विश्लेषणादरम्यान मोठ्या संख्येने अभिकर्मक आणि द्रावकांच्या वापरामुळे धोकादायक अवशेषांची निर्मिती होऊ शकते. म्हणून, ऑपरेटर आणि पर्यावरणावरील विश्लेषणात्मक प्रक्रियांचे प्रतिकूल परिणाम कमी करण्यासाठी किंवा नाहीसे करण्यासाठी २००० साली हरित विश्लेषणात्मक रसायनशास्त्र (GAC) विकसित केले गेले²⁶. मेलामाइन ओळखण्यासाठी क्रोमॅटोग्राफी, इलेक्ट्रोफोरेसिस, केशिका इलेक्ट्रोफोरेसिस आणि एन्झाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट एसे (ELISA) यांसारख्या पारंपारिक मेलामाइन शोध पद्धती वापरल्या गेल्या आहेत. तथापि, असंख्य शोध पद्धतींपैकी, इलेक्ट्रोकेमिकल सेन्सर्सनी त्यांच्या उत्कृष्ट संवेदनशीलता, निवडक्षमता, जलद विश्लेषण वेळ आणि वापरकर्ता-अनुकूल वैशिष्ट्यांमुळे खूप लक्ष वेधले आहे³⁰,³¹. हरित नॅनोटेक्नॉलॉजी नॅनोमटेरियल्सचे संश्लेषण करण्यासाठी जैविक मार्गांचा वापर करते, ज्यामुळे धोकादायक कचऱ्याची निर्मिती आणि ऊर्जेचा वापर कमी होऊ शकतो, आणि त्याद्वारे शाश्वत पद्धतींच्या अंमलबजावणीला प्रोत्साहन मिळते. उदाहरणार्थ, पर्यावरणपूरक पदार्थांपासून बनवलेले नॅनोकंपोझिट्स, मेलामाइन32,33,34 सारखे पदार्थ शोधण्यासाठी बायोसेन्सर्समध्ये वापरले जाऊ शकतात.
अभ्यासात असे दिसून आले आहे की पारंपरिक निष्कर्षण पद्धतींच्या तुलनेत सॉलिड-फेज मायक्रोएक्स्ट्रॅक्शन (SPME) त्याच्या उच्च ऊर्जा कार्यक्षमता आणि टिकाऊपणामुळे प्रभावीपणे वापरले जाते. SPME ची पर्यावरणपूरकता आणि ऊर्जा कार्यक्षमता यांमुळे ते विश्लेषणात्मक रसायनशास्त्रातील पारंपरिक निष्कर्षण पद्धतींसाठी एक उत्कृष्ट पर्याय ठरते आणि नमुना तयार करण्यासाठी अधिक टिकाऊ आणि कार्यक्षम पद्धत प्रदान करते35.
२०१३ मध्ये, वू आणि त्यांच्या सहकाऱ्यांनी एक अत्यंत संवेदनशील आणि निवडक सरफेस प्लाझमोन रेझोनन्स (मिनी-एसपीआर) बायोसेन्सर विकसित केला, जो इम्युनोअसे वापरून बालकांच्या फॉर्म्युलामधील मेलामाइन जलदगतीने शोधण्यासाठी मेलामाइन आणि अँटी-मेलामाइन अँटीबॉडीजमधील जोडणीचा उपयोग करतो. इम्युनोअसे (मेलामाइन-संयुग्मित बोवाइन सीरम अल्ब्युमिन वापरून) सह एकत्रित केलेला हा एसपीआर बायोसेन्सर एक वापरण्यास-सोपा आणि कमी खर्चाचा तंत्रज्ञान आहे, ज्याची शोध मर्यादा केवळ ०.०२ μg mL-136 आहे.
नासिरी आणि अब्बासियन यांनी व्यावसायिक नमुन्यांमध्ये मेलामाइन शोधण्यासाठी ग्राफीन ऑक्साइड-कायटोसॅन कंपोझिट्स (GOCS) सह उच्च-क्षमता असलेल्या पोर्टेबल सेन्सरचा वापर केला37. या पद्धतीमध्ये अत्यंत उच्च निवडक्षमता, अचूकता आणि प्रतिसाद दिसून आला. GOCS सेन्सरने उल्लेखनीय संवेदनशीलता (239.1 μM−1), 0.01 ते 200 μM ची रेषीय श्रेणी, 1.73 × 104 चा आत्मीयता स्थिरांक आणि 10 nM पर्यंतची LOD प्रदर्शित केली. शिवाय, 2024 मध्ये चंद्रशेखर आणि त्यांच्या सहकाऱ्यांनी केलेल्या अभ्यासात एक पर्यावरणपूरक आणि किफायतशीर दृष्टिकोन अवलंबला. त्यांनी पर्यावरणपूरक पद्धतीने झिंक ऑक्साइड नॅनोपार्टिकल्स (ZnO-NPs) संश्लेषित करण्यासाठी पपईच्या सालीचा अर्क रिड्यूसिंग एजंट म्हणून वापरला. त्यानंतर, बालकांच्या फॉर्म्युलामधील मेलामाइनचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी एक अद्वितीय मायक्रो-रमन स्पेक्ट्रोस्कोपी तंत्र विकसित केले गेले. शेतीतील कचऱ्यापासून मिळवलेल्या ZnO-NPs ने मेलामाइन38 चे निरीक्षण आणि शोध घेण्यासाठी एक मौल्यवान निदान साधन आणि एक विश्वसनीय, कमी किमतीचे तंत्रज्ञान म्हणून क्षमता दर्शविली आहे.
अलीझादेह आणि सहकाऱ्यांनी (२०२४) दुधाच्या पावडरमधील मेलामाइन निश्चित करण्यासाठी एका अत्यंत संवेदनशील मेटल-ऑरगॅनिक फ्रेमवर्क (MOF) फ्लुरोसेन्स प्लॅटफॉर्मचा वापर केला. ३σ/S वापरून निश्चित केलेली सेन्सरची लिनियर रेंज आणि लोअर डिटेक्शन लिमिट अनुक्रमे ४० ते ३९६.४५ nM (२५ μg kg−1 ते ०.२५ mg kg−1 च्या समतुल्य) आणि ४० nM (२५ μg kg−1 च्या समतुल्य) होती. ही रेंज शिशु फॉर्म्युला (१ mg kg−1) आणि इतर अन्न/खाद्य नमुन्यांमध्ये (२.५ mg kg−1) मेलामाइन ओळखण्यासाठी निर्धारित केलेल्या कमाल अवशिष्ट पातळी (MRLs) पेक्षा खूपच कमी आहे. फ्लुरोसेन्स सेन्सरने (टर्बियम (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) दुधाच्या पावडरमधील मेलामाइन शोधण्यात HPLC39 पेक्षा जास्त अचूकता आणि अधिक नेमकी मापन क्षमता दर्शविली. हरित रसायनशास्त्रातील बायोसेन्सर्स आणि नॅनोकम्पोझिट्स केवळ शोध क्षमताच वाढवत नाहीत, तर शाश्वत विकासाच्या तत्त्वांनुसार पर्यावरणीय धोके देखील कमी करतात.
मेलामाइनच्या निर्धारणासाठी विविध पद्धतींमध्ये हरित रसायनशास्त्राची तत्त्वे लागू केली गेली आहेत. एक पद्धत म्हणजे, शिशु फॉर्म्युला आणि गरम पाणी यांसारख्या नमुन्यांमधून मेलामाइन ४० च्या कार्यक्षम निष्कर्षणासाठी, सायट्रिक ॲसिडने क्रॉस-लिंक केलेल्या नैसर्गिक ध्रुवीय पॉलिमर β-सायक्लोडेक्स्ट्रिनचा वापर करून हरित विखुरलेल्या घन-अवस्था सूक्ष्म-निष्कर्षण पद्धतीचा विकास करणे. दुसरी पद्धत दुधाच्या नमुन्यांमध्ये मेलामाइनच्या निर्धारणासाठी मॅनिच अभिक्रियेचा वापर करते. ही पद्धत स्वस्त, पर्यावरणपूरक आणि अत्यंत अचूक असून तिची रेषीय श्रेणी ०.१–२.५ पीपीएम आहे आणि शोध मर्यादा कमी आहे ४१. याव्यतिरिक्त, द्रव दूध आणि शिशु फॉर्म्युलामधील मेलामाइनच्या परिमाणात्मक निर्धारणासाठी, फूरियर ट्रान्सफॉर्म इन्फ्रारेड ट्रान्समिशन स्पेक्ट्रोस्कोपीचा वापर करून एक किफायतशीर आणि पर्यावरणपूरक पद्धत विकसित केली गेली, ज्यात उच्च अचूकता आणि अनुक्रमे १ पीपीएम व ३.५ पीपीएमच्या शोध मर्यादा आहेत ४२. या पद्धती मेलामाइनच्या निर्धारणासाठी कार्यक्षम आणि शाश्वत पद्धतींच्या विकासाकरिता हरित रसायनशास्त्राच्या तत्त्वांचा वापर दर्शवतात.
अनेक अभ्यासांनी मेलामाइन शोधण्यासाठी नाविन्यपूर्ण पद्धती प्रस्तावित केल्या आहेत, जसे की सॉलिड-फेज एक्सट्रॅक्शन आणि हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (HPLC)४३ चा वापर, तसेच वेगवान हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (HPLC), ज्यासाठी जटिल पूर्व-उपचार किंवा आयन-पेअर अभिकर्मकांची आवश्यकता नसते, ज्यामुळे रासायनिक कचऱ्याचे प्रमाण कमी होते४४. या पद्धती केवळ दुग्धजन्य पदार्थांमधील मेलामाइनच्या निर्धारणासाठी अचूक परिणाम देत नाहीत, तर त्या हरित रसायनशास्त्राच्या तत्त्वांचे पालन देखील करतात, ज्यामुळे धोकादायक रसायनांचा वापर कमी होतो आणि विश्लेषणात्मक प्रक्रियेचा एकूण पर्यावरणीय परिणाम कमी होतो.
वेगवेगळ्या ब्रँडच्या चाळीस नमुन्यांची तीन वेळा चाचणी करण्यात आली आणि त्याचे निकाल तक्ता २ मध्ये सादर केले आहेत. शिशु फॉर्म्युला आणि दूध पावडरच्या नमुन्यांमधील मेलामाइनची पातळी अनुक्रमे ०.००१ ते ०.००४ मिग्रॅ/किलो आणि ०.००१ ते ०.०९५ मिग्रॅ/किलो या दरम्यान होती. शिशु फॉर्म्युलाच्या तीन वयोगटांमध्ये कोणतेही लक्षणीय बदल दिसून आले नाहीत. याव्यतिरिक्त, ८०% दूध पावडरमध्ये मेलामाइन आढळले, परंतु ६५% शिशु फॉर्म्युला मेलामाइनने दूषित होते.
औद्योगिक दूध पावडरमधील मेलामाइनचे प्रमाण बालकांच्या फॉर्म्युल्यापेक्षा जास्त होते आणि हा फरक लक्षणीय होता (p<0.05) (आकृती 2).
मिळालेले निकाल FDA ने निर्धारित केलेल्या मर्यादेपेक्षा कमी होते (१ आणि २.५ मिग्रॅ/किलो पेक्षा कमी). याव्यतिरिक्त, हे निकाल CAC (२०१०) आणि EU४५,४६ ने निर्धारित केलेल्या मर्यादेनुसार आहेत, म्हणजेच शिशु फॉर्म्युलासाठी कमाल अनुज्ञेय मर्यादा १ मिग्रॅ/किलो आणि दुग्धजन्य पदार्थांसाठी २.५ मिग्रॅ/किलो आहे.
घनाती आणि सहकाऱ्यांनी केलेल्या २०२३ च्या अभ्यासानुसार४७, इराणमधील विविध प्रकारच्या पॅकबंद दुधातील मेलामाइनचे प्रमाण ५०.७ ते ७९० μg kg−1 इतके होते. त्यांचे निष्कर्ष FDA च्या परवानगीयोग्य मर्यादेपेक्षा कमी होते. आमचे निष्कर्ष शोडर आणि सहकाऱ्यांनी केलेल्या अभ्यासापेक्षा४८ आणि रिमा आणि सहकाऱ्यांनी केलेल्या अभ्यासापेक्षा४९ कमी आहेत. शोडर आणि सहकाऱ्यांनी (२०१०) केलेल्या अभ्यासात असे आढळले की ELISA द्वारे निर्धारित केलेल्या मिल्क पावडरमधील (n=४९) मेलामाइनची पातळी ०.५ ते ५.५ mg/kg इतकी होती. रिमा आणि सहकाऱ्यांनी फ्लुरोसेन्स स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रीद्वारे मिल्क पावडरमधील मेलामाइनच्या अवशेषांचे विश्लेषण केले आणि त्यांना आढळले की मिल्क पावडरमधील मेलामाइनचे प्रमाण ०.७२–५.७६ mg/kg होते. २०११ मध्ये कॅनडामध्ये लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (LC/MS) वापरून बालकांच्या फॉर्म्युलामधील (n=९४) मेलामाइनच्या पातळीवर लक्ष ठेवण्यासाठी एक अभ्यास करण्यात आला. मेलामाइनची सांद्रता स्वीकार्य मर्यादेपेक्षा कमी असल्याचे आढळले (प्राथमिक मानक: ०.५ mg kg−1). आढळून आलेली मेलामाइनची बनावट पातळी ही प्रथिनांचे प्रमाण वाढवण्यासाठी वापरलेली एक युक्ती असण्याची शक्यता कमी आहे. तथापि, खतांचा वापर, कंटेनरमधील सामग्रीची जागा बदलणे किंवा तत्सम घटकांमुळे याचे स्पष्टीकरण देता येत नाही. शिवाय, कॅनडामध्ये आयात केलेल्या दूध पावडरमधील मेलामाइनचा स्रोत उघड केला गेला नाही50.
हसनी आणि त्यांच्या सहकाऱ्यांनी २०१३ मध्ये इराणी बाजारातील मिल्क पावडर आणि द्रव दुधामधील मेलामाइनचे प्रमाण मोजले आणि त्यांना समान निष्कर्ष आढळले. निकालांवरून असे दिसून आले की, मिल्क पावडर आणि द्रव दुधाच्या एका ब्रँडचा अपवाद वगळता, इतर सर्व नमुने मेलामाइनने दूषित होते. मिल्क पावडरमध्ये याचे प्रमाण १.५० ते ३०.३२ μg g−1 आणि दुधामध्ये ०.११ ते १.४८ μg ml−1 इतके होते. विशेष म्हणजे, कोणत्याही नमुन्यात सायन्युरिक ॲसिड आढळले नाही, ज्यामुळे ग्राहकांना मेलामाइन विषबाधेची शक्यता कमी होते. ५१ पूर्वीच्या अभ्यासांमध्ये मिल्क पावडर असलेल्या चॉकलेट उत्पादनांमधील मेलामाइनच्या प्रमाणाचे मूल्यांकन केले गेले आहे. सुमारे ९४% आयात केलेल्या नमुन्यांमध्ये आणि ७७% इराणी नमुन्यांमध्ये मेलामाइन आढळले. आयात केलेल्या नमुन्यांमध्ये मेलामाइनचे प्रमाण ०.०३२ ते २.६९२ mg/kg इतके होते, तर इराणी नमुन्यांमध्ये ते ०.०१३ ते २.६०० mg/kg इतके होते. एकूण, 85% नमुन्यांमध्ये मेलामाइन आढळले, परंतु फक्त एका विशिष्ट ब्रँडमध्ये ते अनुज्ञेय मर्यादेपेक्षा जास्त होते.44 टिटलेमियर आणि इतरांनी दुधाच्या पावडरमध्ये 0.00528 ते 0.0122 mg/kg पर्यंत मेलामाइनची पातळी नोंदवली.
तक्ता ३ मध्ये तीन वयोगटांसाठीच्या जोखीम मूल्यांकनाच्या निकालांचा सारांश दिला आहे. सर्व वयोगटांमध्ये जोखीम १ पेक्षा कमी होती. त्यामुळे, बालकांच्या फॉर्म्युल्यामधील मेलामाइनमुळे कर्करोग-व्यतिरिक्त आरोग्यास कोणताही धोका नाही.
दुग्धजन्य पदार्थांमधील कमी प्रमाणात भेसळ ही तयारीदरम्यान झालेल्या अनवधानाने झालेल्या भेसळीमुळे असू शकते, तर उच्च प्रमाणात भेसळ ही हेतुपुरस्सर केलेल्या भेसळीमुळे असू शकते. शिवाय, कमी मेलामाइन पातळी असलेले दुग्धजन्य पदार्थ सेवन केल्याने मानवी आरोग्याला होणारा एकूण धोका कमी मानला जातो. यावरून असा निष्कर्ष काढता येतो की, मेलामाइनची इतकी कमी पातळी असलेल्या उत्पादनांचे सेवन केल्याने ग्राहकांच्या आरोग्याला कोणताही धोका निर्माण होत नाही52.
दुग्ध उद्योगात अन्न सुरक्षा व्यवस्थापनाचे महत्त्व, विशेषतः सार्वजनिक आरोग्याच्या संरक्षणाच्या दृष्टीने, लक्षात घेता, मिल्क पावडर आणि शिशु फॉर्म्युलामधील मेलामाइनची पातळी आणि अवशेषांचे मूल्यांकन व तुलना करण्यासाठी एक पद्धत विकसित करणे आणि प्रमाणित करणे अत्यंत महत्त्वाचे आहे. शिशु फॉर्म्युला आणि मिल्क पावडरमधील मेलामाइनचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी एक सोपी आणि अचूक HPLC-UV स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक पद्धत विकसित करण्यात आली. या पद्धतीची विश्वसनीयता आणि अचूकता सुनिश्चित करण्यासाठी ती प्रमाणित करण्यात आली. या पद्धतीची शोध आणि परिमाणीकरण मर्यादा शिशु फॉर्म्युला आणि मिल्क पावडरमधील मेलामाइनची पातळी मोजण्यासाठी पुरेशी संवेदनशील असल्याचे दिसून आले. आमच्या माहितीनुसार, बहुतेक इराणी नमुन्यांमध्ये मेलामाइन आढळले. आढळलेल्या मेलामाइनच्या सर्व पातळ्या CAC ने निर्धारित केलेल्या कमाल अनुज्ञेय मर्यादेपेक्षा कमी होत्या, जे दर्शवते की या प्रकारच्या दुग्धजन्य पदार्थांच्या सेवनाने मानवी आरोग्यास कोणताही धोका नाही.
वापरलेली सर्व रासायनिक अभिकर्मके विश्लेषणात्मक दर्जाची होती: मेलामाइन (2,4,6-ट्रायमिनो-1,3,5-ट्रायझिन) 99% शुद्ध (सिग्मा-अल्ड्रिच, सेंट लुईस, एमओ); एचपीएलसी-दर्जाचे ॲसिटोनायट्राइल (मर्क, डार्मस्टॅड, जर्मनी); अतिशुद्ध पाणी (मिलिपोर, मॉर्फाइम, फ्रान्स). डिस्पोजेबल सिरिंज फिल्टर्स (क्रोमाफिल एक्स्ट्रा पीव्हीडीएफ-45/25, छिद्राचा आकार 0.45 μm, पडद्याचा व्यास 25 मिमी) (मॅचेरी-नागेल, ड्यूरेन, जर्मनी).
नमुने तयार करण्यासाठी अल्ट्रासोनिक बाथ (एल्मा, जर्मनी), सेंट्रीफ्यूज (बेकमन कोल्टर, क्रेफेल्ड, जर्मनी) आणि एचपीएलसी (क्नॉवर, जर्मनी) यांचा वापर करण्यात आला.
यूव्ही डिटेक्टरने सुसज्ज असलेला एक हाय परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफ (KNAUER, जर्मनी) वापरण्यात आला. एचपीएलसी विश्लेषणाची परिस्थिती खालीलप्रमाणे होती: ओडीएस-३ सी१८ ॲनालिटिकल कॉलम (४.६ मिमी × २५० मिमी, कणांचा आकार ५ μm) (MZ, जर्मनी) ने सुसज्ज असलेली एक यूएचपीएलसी अल्टिमेट प्रणाली वापरण्यात आली. एचपीएलसी इल्युएंट (मोबाइल फेज) हे टीएफए/मिथेनॉल मिश्रण (४५०:५० मिली) होते, ज्याचा प्रवाह दर १ मिली प्रति मिनिट होता. डिटेक्शन वेव्हलेंथ २४२ एनएम होती. इंजेक्शन व्हॉल्यूम १०० μL होता, कॉलमचे तापमान २० °C होते. औषधाचा रिटेन्शन टाइम जास्त (१५ मिनिटे) असल्यामुळे, पुढील इंजेक्शन २५ मिनिटांनंतर दिले पाहिजे. मेलामाइन स्टँडर्ड्सच्या रिटेन्शन टाइम आणि यूव्ही स्पेक्ट्रम पीकची तुलना करून मेलामाइनची ओळख पटवण्यात आली.
मेलामाइनचे एक मानक द्रावण (१० μg/mL) पाणी वापरून तयार केले आणि प्रकाशापासून दूर रेफ्रिजरेटरमध्ये (४ °C) साठवले. स्टॉक द्रावण मोबाइल फेजने विरल करून वर्किंग स्टँडर्ड द्रावणे तयार केली. प्रत्येक मानक द्रावण HPLC मध्ये ७ वेळा इंजेक्ट केले गेले. निर्धारित पीक एरिया आणि निर्धारित कॉन्सन्ट्रेशनच्या रिग्रेशन ॲनालिसिसद्वारे कॅलिब्रेशन समीकरण १० ची गणना केली गेली.
इराणमधील स्थानिक सुपरमार्केट आणि फार्मसीमधून वेगवेगळ्या वयोगटातील (०-६ महिने, ६-१२ महिने, आणि >१२ महिने) बालकांना पाजण्यासाठी व्यावसायिकरित्या उपलब्ध असलेली गाईच्या दुधाची पावडर (२० नमुने) आणि गाईच्या दुधावर आधारित विविध ब्रँडच्या शिशु फॉर्म्युलाचे नमुने (२० नमुने) खरेदी करण्यात आले आणि विश्लेषणापर्यंत ते रेफ्रिजरेटेड तापमानावर (४°C) साठवून ठेवण्यात आले. त्यानंतर, १ ± ०.०१ ग्रॅम एकजीव केलेली दुधाची पावडर तोलण्यात आली आणि ॲसिटोनायट्राइल:पाणी (५०:५०, v/v; ५ मिली) मध्ये मिसळण्यात आली. हे मिश्रण १ मिनिट ढवळण्यात आले, नंतर अल्ट्रासोनिक बाथमध्ये ३० मिनिटे सोनिकेट करण्यात आले आणि शेवटी १ मिनिट हलवण्यात आले. त्यानंतर हे मिश्रण खोलीच्या तापमानावर १० मिनिटांसाठी ९००० × g वर सेंट्रीफ्यूज करण्यात आले आणि सुपरनॅटंट ०.४५ μm सिरिंज फिल्टर वापरून २ मिलीच्या ऑटोसेम्पलर व्हायलमध्ये गाळण्यात आले. नंतर गाळलेला द्रव (250 μl) पाण्यासोबत (750 μl) मिसळून HPLC प्रणालीवर इंजेक्ट करण्यात आला10,42.
पद्धतीची वैधता तपासण्यासाठी, आम्ही इष्टतम परिस्थितीत रिकव्हरी, अचूकता, डिटेक्शनची मर्यादा (LOD), क्वांटिफिकेशनची मर्यादा (LOQ) आणि प्रिसीजन निश्चित केले. LOD ची व्याख्या अशी केली गेली की, नमुन्यातील ज्या घटकाच्या पीकची उंची बेसलाइन नॉइज लेव्हलच्या तिप्पट असते. याउलट, नमुन्यातील ज्या घटकाच्या पीकची उंची सिग्नल-टू-नॉइज रेशोच्या १० पट असते, त्याला LOQ म्हणून परिभाषित केले गेले.
सात डेटा पॉइंट्स असलेल्या कॅलिब्रेशन कर्व्हचा वापर करून डिव्हाइसचा प्रतिसाद निश्चित करण्यात आला. मेलामाइनचे वेगवेगळे प्रमाण (०, ०.२, ०.३, ०.५, ०.८, १ आणि १.२) वापरण्यात आले. मेलामाइन गणना प्रक्रियेची रेषीयता निश्चित करण्यात आली. याव्यतिरिक्त, ब्लँक सॅम्पल्समध्ये मेलामाइनचे अनेक वेगवेगळे स्तर टाकण्यात आले. शिशु फॉर्म्युला आणि दुधाच्या पावडरच्या सॅम्पल्समध्ये ०.१–१.२ μg mL−1 या प्रमाणात स्टँडर्ड मेलामाइन सोल्युशन सतत इंजेक्ट करून कॅलिब्रेशन कर्व्ह तयार करण्यात आला आणि त्याचा R2 = ०.९९२५ होता. प्रक्रियेच्या रिपीटॅबिलिटी आणि रिप्रोड्युसिबिलिटीद्वारे अचूकतेचे मूल्यांकन करण्यात आले आणि ते पहिल्या व त्यानंतरच्या तीन दिवसांत (तीन प्रतींमध्ये) सॅम्पल्स इंजेक्ट करून साध्य करण्यात आले. टाकलेल्या मेलामाइनच्या तीन वेगवेगळ्या कॉन्सन्ट्रेशन्ससाठी RSD % ची गणना करून पद्धतीच्या रिपीटॅबिलिटीचे मूल्यांकन करण्यात आले. प्रिसीजन निश्चित करण्यासाठी रिकव्हरी स्टडीज करण्यात आले. शिशु फॉर्म्युला आणि कोरड्या दुधाच्या नमुन्यांमध्ये मेलामाइनच्या एकाग्रतेच्या तीन स्तरांवर (0.1, 1.2, 2) निष्कर्षण पद्धतीद्वारे पुनर्प्राप्तीचे प्रमाण मोजले गेले9,11,15.
अंदाजित दैनिक सेवन (EDI) खालील सूत्र वापरून निर्धारित केले गेले: EDI = Ci × Cc/BW.
येथे Ci म्हणजे सरासरी मेलामाइनचे प्रमाण, Cc म्हणजे दुधाचा वापर आणि BW म्हणजे मुलांचे सरासरी वजन.
डेटाचे विश्लेषण SPSS 24 वापरून केले गेले. सामान्यतेची चाचणी कोल्मोगोरोव्ह-स्मिरनोव्ह चाचणी वापरून केली गेली; सर्व डेटा नॉनपॅरामीट्रिक चाचण्या होत्या (p = 0). त्यामुळे, गटांमधील महत्त्वपूर्ण फरक निश्चित करण्यासाठी क्रुस्कल-वॉलिस चाचणी आणि मॅन-व्हिटनी चाचणी वापरण्यात आल्या.
इंगेलफिंगर, ज्युनिअर. मेलामाइन आणि जागतिक अन्न प्रदूषणावरील त्याचा परिणाम. न्यू इंग्लंड जर्नल ऑफ मेडिसिन 359(26), 2745–2748 (2008).
लिंच, आर.ए., आणि इतर. मुलांच्या भांड्यांमध्ये मेलामाइन स्थलांतरावर pH चा परिणाम. इंटरनॅशनल जर्नल ऑफ फूड कॉन्टॅमिनेशन, 2, 1–8 (2015).
बॅरेट, एम.पी. आणि गिल्बर्ट, आय.एच. ट्रायपॅनोसोमच्या आतील भागात विषारी संयुगे लक्ष्य करणे. प्रोग्रेस इन पॅरासिटोलॉजी 63, 125–183 (2006).
निर्माण, एमएफ, आणि इतर. औषध वितरण वाहक म्हणून मेलामाइन डेंड्रिमर्सचे इन विट्रो आणि इन व्हिवो मूल्यांकन. इंटरनॅशनल जर्नल ऑफ फार्मसी, 281(1–2), 129–132(2004).
जागतिक आरोग्य संघटना. मेलामाइन आणि सायन्युरिक ऍसिडच्या विषारी पैलूंचा आढावा घेण्यासाठी तज्ञ बैठका 1-4 (2008).
हाउ, ए.के.-सी., क्वान, टी.एच. आणि ली, पीके-टी. मेलामाइन विषबाधा आणि मूत्रपिंड. जर्नल ऑफ द अमेरिकन सोसायटी ऑफ नेफ्रोलॉजी 20(2), 245–250 (2009).
ओझटर्क, एस. आणि डेमिर, एन. उच्च कार्यक्षमता द्रव क्रोमॅटोग्राफी (HPLC) द्वारे दुग्धजन्य पदार्थांमध्ये मेलामाइन ओळखण्यासाठी एका नवीन IMAC शोषकाचा विकास. जर्नल ऑफ फूड सिंथेसिस अँड ॲनालिसिस 100, 103931 (2021).
चान्सुवर्ण, व्ही., पॅनिक, एस. आणि इमिम, ए. मॅनिच ग्रीन रिअॅक्शनवर आधारित द्रव दुधातील मेलामाइनचे साधे स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक निर्धारण. स्पेक्ट्रोकेम. अॅक्टा पार्ट ए मोल. बायोमोल. स्पेक्ट्रोस्क. 113, 154–158 (2013).
देबेस, एम. आणि एल-हबीब, आर. एचपीएलसी/डायोड अॅरे क्रोमॅटोग्राफीद्वारे शिशु सूत्र, दूध पावडर आणि पंगासियस नमुन्यांमध्ये मेलामाइनचे निर्धारण. जर्नल ऑफ एन्व्हायर्नमेंटल अॅनालिटिकल टॉक्सिकोलॉजी, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
स्किनर, केजी, थॉमस, जेडी, आणि ऑस्टरलोह, जेडी मेलामाइन विषबाधा. जर्नल ऑफ मेडिकल टॉक्सिकोलॉजी, 6, 50–55 (2010).
जागतिक आरोग्य संघटना (WHO), मेलामाइन आणि सायन्युरिक ऍसिडचे विषशास्त्र आणि आरोग्य पैलू: हेल्थ कॅनडाच्या सहकार्याने आयोजित WHO/FAO सहयोगी तज्ञ बैठकीचा अहवाल, ओटावा, कॅनडा, 1-4 डिसेंबर 2008 (2009).
कोरमा, एसए, आणि इतर. नवीन कार्यात्मक संरचनात्मक लिपिड असलेल्या शिशु फॉर्म्युला पावडर आणि व्यावसायिक शिशु फॉर्म्युला यांच्या लिपिड रचना आणि गुणवत्तेचा तुलनात्मक अभ्यास. युरोपियन फूड रिसर्च अँड टेक्नॉलॉजी 246, 2569–2586 (2020).
अल-वसीफ, एम. आणि हाशेम, एच. पाम तेलाचा वापर करून शिशु फॉर्म्युलाचे पौष्टिक मूल्य, गुणवत्ता गुणधर्म आणि शेल्फ लाइफ वाढवणे. मिडल ईस्ट जर्नल ऑफ ॲग्रीकल्चरल रिसर्च 6, 274–281 (2017).
यिन, डब्ल्यू., व इतर. मेलामाइन विरुद्ध मोनोक्लोनल अँटीबॉडीजचे उत्पादन आणि कच्च्या दुधात, कोरड्या दुधात आणि प्राण्यांच्या खाद्यात मेलामाइन शोधण्यासाठी अप्रत्यक्ष स्पर्धात्मक ELISA पद्धतीचा विकास. जर्नल ऑफ ॲग्रीकल्चरल अँड फूड केमिस्ट्री 58(14), 8152–8157 (2010).