Nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद. तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझरच्या आवृत्तीमध्ये CSS साठी मर्यादित समर्थन आहे. सर्वोत्तम परिणामांसाठी, आम्ही तुमच्या ब्राउझरची नवीन आवृत्ती वापरण्याची (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमधील कंपॅटिबिलिटी मोड बंद करण्याची) शिफारस करतो. दरम्यान, सतत समर्थन सुनिश्चित करण्यासाठी, आम्ही ही साइट स्टायलिंग किंवा जावास्क्रिप्टशिवाय दाखवत आहोत.
युनानमध्ये औषधी वनस्पती पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या लागवडीच्या सुरक्षिततेसाठी कॅडमियम (Cd) प्रदूषण हा एक संभाव्य धोका आहे. बाह्य Cd ताणाखाली, चुन्याचा वापर (०, ७५०, २२५० आणि ३७५० किलो/तास/मी²) आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडची पर्ण फवारणी (०, ०.१ आणि ०.२ मोल/लिटर) यांचा Cd संचय आणि पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या प्रणालीगत व औषधी घटकांवर होणारा परिणाम समजून घेण्यासाठी क्षेत्रीय प्रयोग करण्यात आले. निकालांवरून असे दिसून आले की, Cd ताणाखाली, चुना आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडची पर्ण फवारणी पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमधील Ca²⁺ चे प्रमाण वाढवू शकते आणि Cd²⁺ ची विषारीता कमी करू शकते. चुना आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या वापरामुळे अँटिऑक्सिडंट एन्झाइम्सची क्रियाशीलता वाढली आणि ऑस्मोटिक रेग्युलेटर्सच्या चयापचयात बदल झाला. सर्वात लक्षणीय बाब म्हणजे CAT क्रियाशीलतेमध्ये २.७७ पटींची वाढ झाली. ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या प्रभावाखाली, SOD ची क्रियाशीलता १.७८ पटींनी वाढली. MDA चे प्रमाण ५८.३८% ने कमी झाले. विद्राव्य साखर, मुक्त अमिनो ॲसिड, प्रोलाइन आणि विद्राव्य प्रथिने यांच्याशी याचा खूप महत्त्वपूर्ण सहसंबंध आहे. चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमधील कॅल्शियम आयन (Ca2+) चे प्रमाण वाढवू शकतात, कॅडमियम (Cd) चे प्रमाण कमी करू शकतात, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगची ताण सहन करण्याची क्षमता सुधारू शकतात आणि एकूण सॅपोनिन्स व फ्लेव्होनॉइड्सचे उत्पादन वाढवू शकतात. कॅडमियमचे प्रमाण सर्वात कमी आहे, नियंत्रणापेक्षा ६८.५७% कमी, आणि ते मानक मूल्याशी जुळते (Cd≤०.५ मिग्रॅ/किलो, GB/T १९०८६-२००८). SPN चे प्रमाण ७.७३% होते, जे सर्व उपचारांमध्ये सर्वोच्च पातळीवर पोहोचले, आणि फ्लेव्होनॉइडचे प्रमाण २१.७४% ने लक्षणीयरीत्या वाढले, ज्यामुळे मानक वैद्यकीय मूल्ये आणि इष्टतम उत्पादन प्राप्त झाले.
कॅडमियम (Cd) हे लागवडीखालील जमिनीतील एक सामान्य प्रदूषक आहे, ते सहजपणे स्थलांतरित होते आणि त्यात लक्षणीय जैविक विषारीपणा असतो. एल-शाफेई आणि इतरांनी अहवाल दिला आहे की कॅडमियमच्या विषारीपणामुळे वापरल्या जाणाऱ्या वनस्पतींच्या गुणवत्तेवर आणि उत्पादकतेवर परिणाम होतो. अलिकडच्या वर्षांत नैऋत्य चीनमधील लागवडीखालील जमिनीत कॅडमियमची अतिरिक्त पातळी गंभीर झाली आहे. युनान प्रांत हे चीनचे जैवविविधतेचे साम्राज्य आहे, जिथे औषधी वनस्पतींच्या प्रजाती देशात प्रथम क्रमांकावर आहेत. तथापि, युनान प्रांत खनिज संसाधनांनी समृद्ध आहे आणि खाणकाम प्रक्रियेमुळे जमिनीत जड धातूंचे प्रदूषण अपरिहार्यपणे होते, ज्यामुळे स्थानिक औषधी वनस्पतींच्या उत्पादनावर परिणाम होतो.
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंग (बर्किल) चेन3) ही अरालियासी कुळातील पॅनॅक्स प्रजातीमधील एक अत्यंत मौल्यवान बहुवार्षिक औषधी वनस्पती आहे. पॅनॅक्स नोटोजिनसेंग रक्ताभिसरण सुधारते, रक्ताची स्थिरता दूर करते आणि वेदना कमी करते. याचे मुख्य उत्पादन क्षेत्र युनान प्रांतातील वेनशान प्रांत आहे5. स्थानिक पॅनॅक्स नोटोजिनसेंग लागवड क्षेत्रातील 75% पेक्षा जास्त माती कॅडमियमने दूषित आहे, ज्याचे प्रमाण वेगवेगळ्या भागांमध्ये 81% ते 100% पेक्षा जास्त आहे6. कॅडमियमच्या विषारी प्रभावामुळे पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या औषधी घटकांचे, विशेषतः सॅपोनिन्स आणि फ्लेव्होनॉइड्सचे उत्पादन लक्षणीयरीत्या कमी होते. सॅपोनिन्स हे एक प्रकारचे ग्लायकोसिडिक संयुग आहेत, ज्यांचे ॲग्लायकोन्स ट्रायटरपेनॉइड्स किंवा स्पिरोस्टेन्स असतात. ते अनेक पारंपारिक चीनी औषधांमधील मुख्य सक्रिय घटक आहेत आणि त्यात सॅपोनिन्स असतात. काही सॅपोनिन्समध्ये जीवाणूविरोधी क्रिया किंवा ताप कमी करणारे, शामक आणि कर्करोगविरोधी प्रभावांसारख्या मौल्यवान जैविक क्रिया देखील असतात7. फ्लेव्होनॉइड्स म्हणजे सामान्यतः अशा संयुगांची एक श्रेणी, ज्यामध्ये फिनोलिक हायड्रॉक्सिल गटांसह दोन बेंझिन रिंग तीन मध्यवर्ती कार्बन अणूंद्वारे जोडलेल्या असतात. याचा मुख्य गाभा २-फिनाइलक्रोमॅनोन ८ आहे. हे एक शक्तिशाली अँटिऑक्सिडंट आहे जे वनस्पतींमधील ऑक्सिजन फ्री रॅडिकल्स प्रभावीपणे नष्ट करू शकते. हे दाहक जैविक एन्झाइम्सच्या प्रवेशास प्रतिबंध करू शकते, जखम भरण्यास आणि वेदना कमी करण्यास प्रोत्साहन देते, तसेच कोलेस्ट्रॉलची पातळी कमी करते. हे पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुख्य सक्रिय घटकांपैकी एक आहे. पॅनाक्स जिनसेंग उत्पादन क्षेत्रातील मातीमधील कॅडमियम प्रदूषणाच्या समस्येवर तातडीने उपाययोजना करणे आणि त्याच्या आवश्यक औषधी घटकांचे उत्पादन सुनिश्चित करणे ही एक अत्यावश्यक गरज आहे.
कॅडमियम प्रदूषणापासून मातीचे स्थिर शुद्धीकरण करण्यासाठी चुना हा मोठ्या प्रमाणावर वापरल्या जाणाऱ्या निष्क्रियकांपैकी एक आहे¹⁰. तो मातीतील pH मूल्य वाढवून आणि मातीची कॅटायन एक्सचेंज कपॅसिटी (CEC), मातीची सॉल्ट सॅचुरेशन (BS) आणि मातीची रेडॉक्स पोटेन्शियल (Eh)³,¹¹ बदलून मातीतील कॅडमियमची जैवउपलब्धता कमी करतो, ज्यामुळे मातीतील कॅडमियमच्या अधिशोषण आणि संचयनावर परिणाम होतो. याव्यतिरिक्त, चुना मोठ्या प्रमाणात Ca²⁺ पुरवतो, Cd²⁺ सोबत आयनिक विरोध निर्माण करतो, मुळांमधील अधिशोषण स्थळांसाठी स्पर्धा करतो, कॅडमियमला ​​मातीत जाण्यापासून रोखतो आणि त्याची जैविक विषारीता कमी असते. जेव्हा कॅडमियमच्या ताणाखाली ५० mmol L⁻¹ कॅल्शियम मिसळले गेले, तेव्हा तिळाच्या पानांमधील कॅडमियमचे वहन थांबले आणि कॅडमियमचा संचय ८०% ने कमी झाला. भात (ओरिझा सॅटिवा एल.) आणि इतर पिकांमध्येही असेच अनेक अभ्यास नोंदवले गेले आहेत¹²,¹³.
अलिकडच्या वर्षांत जड धातूंच्या संचयनावर नियंत्रण ठेवण्यासाठी पिकांवर पर्ण फवारणी करणे ही एक नवीन पद्धत आहे. याचे तत्त्व मुख्यत्वे वनस्पती पेशींमधील किलेशन प्रतिक्रियेवर अवलंबून असते, ज्यामुळे जड धातू पेशीभित्तीवर जमा होतात आणि वनस्पतींद्वारे जड धातूंचे शोषण रोखले जाते¹⁴,¹⁵. एक स्थिर डायऍसिड चिलेटिंग एजंट म्हणून, ऑक्झॅलिक ऍसिड वनस्पतींमधील जड धातूंच्या आयनांना थेट चिलेट करू शकते, ज्यामुळे विषारीपणा कमी होतो. संशोधनातून असे दिसून आले आहे की सोयाबीनमधील ऑक्झॅलिक ऍसिड Cd²⁺ ला चिलेट करू शकते आणि वरच्या ट्रायकोम पेशींद्वारे Cd-युक्त स्फटिक बाहेर सोडू शकते, ज्यामुळे शरीरातील Cd²⁺ ची पातळी कमी होते¹⁶. ऑक्झॅलिक ऍसिड मातीचा pH नियंत्रित करू शकते, सुपरऑक्साइड डिसम्युटेस (SOD), पेरॉक्सिडेस (POD) आणि कॅटलेज (CAT) यांची क्रियाशीलता वाढवू शकते, आणि विद्राव्य साखर, विद्राव्य प्रथिने, मुक्त अमिनो ऍसिड आणि प्रोलाइन यांच्या प्रवेशाचे नियमन करू शकते. चयापचय नियामक¹⁷,¹⁸. वनस्पतीमधील आम्ल आणि अतिरिक्त Ca2+ हे न्यूक्लिएटिंग प्रथिनांच्या क्रियेमुळे कॅल्शियम ऑक्झॅलेटचा अवक्षेप तयार करतात. वनस्पतींमधील Ca2+ चे प्रमाण नियंत्रित केल्याने वनस्पतींमधील विरघळलेल्या ऑक्झॅलिक आम्ल आणि Ca2+ चे नियमन प्रभावीपणे साधता येते आणि ऑक्झॅलिक आम्ल आणि Ca2+ चा अतिरिक्त संचय टाळता येतो¹⁹,²⁰.
वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण हे दुरुस्तीच्या परिणामावर प्रभाव टाकणाऱ्या प्रमुख घटकांपैकी एक आहे. असे आढळून आले की चुन्याची मात्रा ७५० ते ६००० किलो/मी² इतकी होती. ५.०~५.५ पीएच असलेल्या आम्लधर्मी जमिनीसाठी, ३०००~६००० किलो/तास/मी² या मात्रेत चुना वापरण्याचा परिणाम ७५० किलो/तास/मी² या मात्रेपेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त असतो²¹. तथापि, चुन्याचा अतिवापर केल्यास जमिनीवर काही नकारात्मक परिणाम होतात, जसे की जमिनीच्या पीएचमध्ये लक्षणीय बदल आणि जमिनीची घट्टता²². म्हणून, आम्ही CaO उपचाराचे स्तर ०, ७५०, २२५० आणि ३७५० किलो/तास/मी² असे निश्चित केले. जेव्हा अ‍ॅरेबिडोप्सिस थॅलियानावर ऑक्झॅलिक ॲसिड वापरले गेले, तेव्हा असे आढळून आले की १० मिलिमोल/लिटर या सांद्रतेवर Ca²⁺ लक्षणीयरीत्या कमी झाले आणि Ca²⁺ सिग्नलिंगवर परिणाम करणाऱ्या CRT जनुक कुटुंबाने तीव्र प्रतिसाद दिला²⁰. काही पूर्वीच्या अभ्यासांच्या संचयामुळे आम्हाला या चाचणीची एकाग्रता निश्चित करता आली आणि Ca2+ आणि Cd2+23,24,25 वर बाह्य पूरकांच्या आंतरक्रियेच्या परिणामाचा अधिक अभ्यास करता आला. म्हणून, या अभ्यासाचा उद्देश कॅडमियम-दूषित मातीमध्ये पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या कॅडमियम सामग्री आणि ताण सहनशीलतेवर बाह्य चुना आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या पानांवरील फवारणीच्या नियामक यंत्रणेचा शोध घेणे आणि औषधी गुणवत्ता व परिणामकारकता अधिक चांगल्या प्रकारे सुनिश्चित करण्याचे मार्ग शोधणे हा आहे. ते कॅडमियम-दूषित मातीमध्ये औषधी वनस्पतींच्या लागवडीचा विस्तार करण्यासाठी आणि औषध बाजाराला आवश्यक असलेले उच्च-गुणवत्तेचे, शाश्वत उत्पादन साध्य करण्यासाठी मौल्यवान मार्गदर्शन प्रदान करतात.
स्थानिक जिनसेंग वाण 'वेनशान पॅनाक्स नोटोजिनसेंग' हे साहित्य म्हणून वापरून, युनान प्रांतातील वेनशान परगण्यातील किउबेई काउंटीमधील लानिझाई येथे (24°11′N, 104°3′E, उंची 1446 मी) एक क्षेत्रीय प्रयोग आयोजित करण्यात आला. येथील सरासरी वार्षिक तापमान 17°C आणि सरासरी वार्षिक पर्जन्यमान 1250 मिमी आहे. अभ्यास केलेल्या मातीची पार्श्वभूमी मूल्ये पुढीलप्रमाणे होती: एकूण नायट्रोजन (TN) 0.57 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, एकूण फॉस्फरस (TP) 1.64 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, एकूण कॅडमियम (TC) 16.31 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, सेंद्रिय पदार्थ (OM) 31.86 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, अल्कली हायड्रोलाइज्ड नायट्रोजन (N) 88.82 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, मुक्त फॉस्फरस 18.55 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, मुक्त पोटॅशियम 100.37 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, एकूण कॅडमियम 0.3 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, pH 5.4.
१० डिसेंबर, २०१७ रोजी, ६ मिग्रॅ/किलो Cd2+ (CdCl2·2.5H2O) आणि चुन्याचे मिश्रण (०, ७५०, २२५० आणि ३७५० किलो/तास/मी²) प्रत्येक प्लॉटच्या ०~१० सेंमी थरात जमिनीच्या पृष्ठभागावर टाकण्यात आले. प्रत्येक उपचाराची ३ वेळा पुनरावृत्ती करण्यात आली. चाचणी प्लॉट यादृच्छिकपणे निवडले असून, प्रत्येक प्लॉटचे क्षेत्रफळ ३ मी² आहे. मशागतीनंतर १५ दिवसांनी एक वर्षाच्या पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या रोपांची पुनर्लागवड करण्यात आली. सूर्यप्रकाशापासून संरक्षण करणारी जाळी वापरताना, जाळीच्या आत पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगला मिळणारी प्रकाशाची तीव्रता सामान्य नैसर्गिक प्रकाशाच्या तीव्रतेच्या सुमारे १८% असते. स्थानिक पारंपरिक लागवड पद्धतींनुसार लागवड केली जाते. २०१९ मध्ये पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या पक्व होण्याच्या अवस्थेपूर्वी, सोडियम ऑक्झॅलेटच्या स्वरूपात ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी करण्यात आली. ऑक्झॅलिक ॲसिडची सांद्रता अनुक्रमे ०, ०.१ आणि ०.२ मोल प्रति लिटर होती, आणि पालापाचोळ्याच्या निचऱ्याच्या द्रावणाच्या सरासरी पीएचचे अनुकरण करण्यासाठी पीएच ५.१६ वर समायोजित करण्याकरिता NaOH चा वापर करण्यात आला. आठवड्यातून एकदा सकाळी ८:०० वाजता पानांच्या वरच्या आणि खालच्या पृष्ठभागांवर फवारणी करा. पाचव्या आठवड्यात ४ वेळा फवारणी केल्यानंतर, ३-वर्षीय पॅनाक्स नोटोजिनसेंग वनस्पतींची काढणी करण्यात आली.
नोव्हेंबर २०१९ मध्ये, शेतातून तीन वर्षांची पॅनाक्स नोटोजिनसेंगची रोपे गोळा करून त्यांच्यावर ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी करण्यात आली. शारीरिक चयापचय आणि एन्झाइम क्रियाशीलतेचे मोजमाप करण्यासाठी आवश्यक असलेले तीन वर्षांच्या पॅनाक्स नोटोजिनसेंग रोपांचे काही नमुने गोठवण्यासाठी नळ्यांमध्ये ठेवण्यात आले, द्रव नायट्रोजनने त्वरित गोठवण्यात आले आणि नंतर -८०°C तापमानावर रेफ्रिजरेटरमध्ये स्थानांतरित करण्यात आले. परिपक्व अवस्थेत कॅडमियम (Cd) आणि सक्रिय घटकांच्या प्रमाणाचे मोजमाप करण्यासाठी मुळांचे काही नमुने नळाच्या पाण्याने धुऊन, १०५°C तापमानावर ३० मिनिटांसाठी वाळवून, ७५°C तापमानावर स्थिर वजनापर्यंत आणून, साठवणुकीसाठी खलबत्त्यात वाटण्यात आले.
०.२ ग्रॅम सुक्या वनस्पतीचा नमुना तोलून घ्या, तो एका एर्लेनमेयर फ्लास्कमध्ये ठेवा, त्यात ८ मिली HNO3 आणि २ मिली HClO4 घालून रात्रभर झाकून ठेवा. दुसऱ्या दिवशी, पांढरा धूर येईपर्यंत आणि पाचक रस स्वच्छ वाहेपर्यंत इलेक्ट्रोथर्मल डायजेशनसाठी एर्लेनमेयर फ्लास्कमध्ये ठेवलेल्या वक्र नरसाळ्याचा वापर करा. खोलीच्या तापमानापर्यंत थंड झाल्यावर, मिश्रण १० मिलीच्या व्हॉल्युमेट्रिक फ्लास्कमध्ये स्थानांतरित करण्यात आले. कॅडमियमचे प्रमाण ॲटोमिक ॲबसॉर्प्शन स्पेक्ट्रोमीटर (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) वापरून निश्चित करण्यात आले. (GB/T 23739-2009).
०.२ ग्रॅम सुक्या वनस्पतीचा नमुना तोलून घ्या, तो ५० मिलीच्या प्लास्टिक बाटलीत ठेवा, त्यात १० मिलीमध्ये १ मोल/लिटर एचसीएल (HCl) मिसळा, बाटलीचे झाकण लावा आणि १५ तास चांगले हलवून गाळा. पिपेट वापरून आवश्यक तेवढे गाळलेले द्रावण घ्या, ते आवश्यकतेनुसार विरल करा आणि Sr2+ चे प्रमाण १ ग्रॅम/लिटरवर आणण्यासाठी त्यात SrCl2 द्रावण मिसळा. कॅल्शियमचे (Ca) प्रमाण ॲटोमिक ॲबसॉर्प्शन स्पेक्ट्रोमीटर (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) वापरून मोजण्यात आले.
मॅलोनडायल्डिहाइड (MDA), सुपरऑक्साइड डिसम्युटेस (SOD), पेरॉक्सिडेस (POD) आणि कॅटॅलेस (CAT) संदर्भ किट पद्धत (DNM-9602, बीजिंग प्रोंग न्यू टेक्नॉलॉजी कं, लि., उत्पादन नोंदणी), संबंधित मापन किट वापरा. ​​क्र.: बीजिंग फार्माकोपिया (अचूक) २०१३ क्र. २४००१४७).
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंग नमुन्याचे वजन सुमारे ०.०५ ग्रॅम घ्या आणि ट्यूबच्या बाजूने अँथ्रोन-सल्फ्यूरिक ॲसिड रिॲजंट टाका. द्रव पूर्णपणे मिसळण्यासाठी ट्यूब २-३ सेकंद हलवा. रंग विकसित होण्यासाठी १५ मिनिटे ट्यूब रॅकवर ठेवा. विद्राव्य साखरेचे प्रमाण ६२० एनएम तरंगलांबीवर अल्ट्राव्हायोलेट-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) द्वारे निश्चित करण्यात आले.
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या ताज्या नमुन्याचे ०.५ ग्रॅम वजन करा, ५ मिली डिस्टिल्ड वॉटरमध्ये एकजीव होईपर्यंत दळा आणि नंतर १० मिनिटांसाठी १०,००० ग्रॅमवर ​​सेंट्रीफ्यूज करा. वरचा द्रव एका निश्चित आकारमानापर्यंत पातळ करण्यात आला. कुमासी ब्रिलियंट ब्लू पद्धतीचा वापर करण्यात आला. विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण ५९५ एनएम तरंगलांबीवर अल्ट्राव्हायोलेट-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) वापरून मोजण्यात आले आणि बोवाइन सीरम अल्ब्युमिनच्या मानक वक्राच्या आधारावर त्याची गणना करण्यात आली.
०.५ ग्रॅम ताजा नमुना तोलून घ्या, त्यात ५ मिली १०% ॲसेटिक ॲसिड घाला, एकजीव होईपर्यंत दळा, गाळा आणि स्थिर आकारमानापर्यंत पातळ करा. रंग विकास पद्धत निन्हिड्रीन द्रावणासह वापरली गेली. मुक्त अमिनो ॲसिडचे प्रमाण ५७० एनएमवर यूव्ही-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) द्वारे निर्धारित केले गेले आणि ल्युसिन मानक वक्र२८ च्या आधारावर त्याची गणना केली गेली.
ताज्या नमुन्याचे ०.५ ग्रॅम वजन करा, त्यात सल्फोसॅलिसिलिक ॲसिडच्या ३% द्रावणाचे ५ मिली घाला, वॉटर बाथमध्ये गरम करा आणि १० मिनिटे हलवा. थंड झाल्यावर, द्रावण गाळून त्याचे आकारमान स्थिर करण्यात आले. ॲसिड निन्हिड्रीनसह रंगमापन पद्धत वापरण्यात आली. प्रोलाइनचे प्रमाण ५२० एनएम तरंगलांबीवर अल्ट्राव्हायोलेट-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) द्वारे निर्धारित केले गेले आणि प्रोलाइन मानक वक्र२९ च्या आधारावर त्याची गणना केली गेली.
पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायनाच्या फार्माकोपिया (२०१५ आवृत्ती) च्या संदर्भाने हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफीद्वारे सॅपोनीनचे प्रमाण निश्चित करण्यात आले. हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफीचे मूलभूत तत्त्व म्हणजे उच्च-दाबाचा द्रव मोबाइल फेज म्हणून वापरणे आणि हाय-परफॉर्मन्स कॉलम क्रोमॅटोग्राफीचे अतिसूक्ष्म कण विलगीकरण तंत्रज्ञान स्टेशनरी फेजवर लागू करणे. याची कार्यपद्धती खालीलप्रमाणे आहे:
HPLC अटी आणि प्रणाली योग्यता चाचणी (तक्ता १): फिलर म्हणून ऑक्टाडेसिलसिलेन बाउंड सिलिका जेल, मोबाइल फेज A म्हणून ॲसिटोनायट्राइल आणि मोबाइल फेज B म्हणून पाणी वापरा. ​​खालील तक्त्यात दर्शविल्याप्रमाणे ग्रेडियंट इल्युशन करा. डिटेक्शन वेव्हलेंथ २०३ nm आहे. पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या एकूण सॅपोनिन्सच्या R1 पीकनुसार, थिओरेटिकल प्लेट्सची संख्या किमान ४००० असावी.
मानक द्रावणाची तयारी: जिनसेनोसाइड Rg1, जिनसेनोसाइड Rb1 आणि नोटोजिनसेनोसाइड R1 यांचे अचूक वजन करा आणि 1 मिली द्रावणामध्ये 0.4 मिलीग्राम जिनसेनोसाइड Rg1, 0.4 मिलीग्राम जिनसेनोसाइड Rb1 आणि 0.1 मिलीग्राम नोटोजिनसेनोसाइड R1 असलेले मिश्रण तयार करण्यासाठी मिथेनॉल घाला.
चाचणी द्रावणाची तयारी: ०.६ ग्रॅम पॅनाक्स जिनसेंग पावडर तोलून घ्या आणि त्यात ५० मिली मेथॅनॉल घाला. तयार झालेल्या मिश्र द्रावणाचे (W1) वजन करून ते रात्रभर तसेच ठेवा. त्यानंतर हे मिश्र द्रावण वॉटर बाथमध्ये ८०°C तापमानावर २ तास हळुवारपणे उकळवा. थंड झाल्यावर, मिश्र द्रावणाचे वजन करा आणि तयार केलेले मेथॅनॉल पहिल्या वजनात (W1) घाला. नंतर चांगले हलवून गाळा. विश्लेषणासाठी गाळलेला द्रव (फिल्टर) बाजूला ठेवा.
सॅपोनीन 24 चे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी, मानक द्रावणाचे 10 μL आणि गाळलेल्या द्रावणाचे 10 μL अचूकपणे गोळा करा आणि ते उच्च कार्यक्षमता द्रव क्रोमॅटोग्राफ (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.) मध्ये टाका.
मानक वक्र: Rg1, Rb1 आणि R1 च्या मिश्र मानक द्रावणाचे मापन. क्रोमॅटोग्राफीच्या अटी वर नमूद केल्याप्रमाणेच आहेत. y-अक्षावर मोजलेले पीक क्षेत्रफळ आणि x-अक्षावर मानक द्रावणातील सॅपोनीनची सांद्रता आलेखित करून मानक वक्र काढा. नमुन्याचे मोजलेले पीक क्षेत्रफळ मानक वक्रामध्ये ठेवून सॅपोनीनची सांद्रता काढता येते.
०.१ ग्रॅम पी. नोटोजेनसिंग्ज नमुना तोलून घ्या आणि त्यात ५० मिली ७०% CH3OH द्रावण टाका. २ तासांसाठी अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण करण्यात आले, त्यानंतर ४००० आरपीएमवर १० मिनिटांसाठी सेंट्रीफ्युगेशन करण्यात आले. १ मिली सुपरनॅटंट घेऊन ते १२ पट विरल करा. फ्लेव्होनॉइडचे प्रमाण २४९ एनएम तरंगलांबीवर अल्ट्राव्हायोलेट-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) वापरून निश्चित करण्यात आले. क्वेर्सेटिन हा मानक सामान्य पदार्थांपैकी एक आहे⁸.
एक्सेल २०१० सॉफ्टवेअर वापरून डेटाची मांडणी करण्यात आली. डेटाचे विचलन विश्लेषण करण्यासाठी एसपीएसएस २० (SPSS 20) सांख्यिकीय सॉफ्टवेअरचा वापर करण्यात आला. ओरिजिन प्रो ९.१ (Origin Pro 9.1) वापरून चित्रे काढण्यात आली. गणना केलेल्या सांख्यिकीय मूल्यांमध्ये मध्यमान ± प्रमाण विचलन (mean ± SD) समाविष्ट आहे. सांख्यिकीय महत्त्वपूर्णतेची विधाने P < 0.05 वर आधारित आहेत.
पानांवर फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या त्याच सांद्रतेवर, वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण वाढल्याने पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅल्शियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या वाढले (तक्ता २). चुन्याच्या अनुपस्थितीच्या तुलनेत, ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न करता ३७५० किलो/तास/मी² चुना वापरल्यावर कॅल्शियमचे प्रमाण २१२% ने वाढले. वापरलेल्या चुन्याच्या समान प्रमाणासाठी, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची सांद्रता वाढल्याने कॅल्शियमचे प्रमाण किंचित वाढले.
मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण ०.२२ ते ०.७० मिग्रॅ/किलो असते. ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता समान असताना, चुन्याचे प्रमाण वाढल्यास २२५० किलो/तास या प्रमाणात कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी होते. नियंत्रणाच्या तुलनेत, २२५० किलो/हेक्टर चुना आणि ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण ६८.५७% ने कमी झाले. जेव्हा चुन्याशिवाय आणि ७५० किलो/तास चुना वापरला गेला, तेव्हा ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. जेव्हा २२५० किलो/मी² चुना आणि ३७५० किलो/मी² चुना वापरला गेला, तेव्हा ऑक्झॅलिक ॲसिडची तीव्रता वाढल्याने मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वाढले. याव्यतिरिक्त, द्विविध विश्लेषणामध्ये असे दिसून आले की चुन्याचा पॅनाक्स नोटोजिनसेंग मुळांमधील Ca सामग्रीवर (F = 82.84**) लक्षणीय परिणाम झाला, चुन्याचा पॅनाक्स नोटोजिनसेंग मुळांमधील Cd सामग्रीवर (F = 74.99**) आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडवर (F=7.72*) लक्षणीय परिणाम झाला.
जसजशी चुन्याची मात्रा आणि फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची तीव्रता वाढली, तसतसे MDA चे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. चुना न घालता आणि ३७५० किलो/मी² चुना घालून केलेल्या प्रयोगात पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील MDA च्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ७५० किलो/तास/मी² आणि २२५० किलो/तास/मी² या फवारणी दरांवर, ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न केलेल्या प्रयोगाच्या तुलनेत, ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणी प्रयोगातील चुन्याचे प्रमाण अनुक्रमे ५८.३८% आणि ४०.२१% ने कमी झाले. ७५० किलो प्रति हेक्टर चुना आणि ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर सर्वात कमी MDA प्रमाण (७.५७ नॅनोमोल प्रति ग्रॅम) आढळून आले (आकृती १).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील मॅलॉन्डियलडिहाइडच्या प्रमाणावर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या पर्ण फवारणीचा परिणाम. टीप: आकृतीमधील सूची फवारणीच्या वेळी ऑक्झॅलिक ॲसिडची सांद्रता (mol L-1) दर्शवते, वेगवेगळी लहान अक्षरे समान चुना वापराच्या उपचारांमधील लक्षणीय फरक दर्शवतात. संख्या (P < 0.05). खाली समान.
३७५० किलो/तास चुना वापरल्याशिवाय, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील एसओडी (SOD) क्रियाशीलतेमध्ये कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. जेव्हा ०, ७५० आणि २२५० किलो/तास/मी² चुना वापरला गेला, तेव्हा ०.२ मोल/लिटर सांद्रतेच्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी करून उपचार केल्यावर एसओडी क्रियाशीलता, ऑक्झॅलिक ॲसिडचा वापर न करण्याच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या जास्त होती, जी अनुक्रमे १७७.८९%, ६१.६२% आणि ४५.०८% ने वाढली. मुळांमधील एसओडी क्रियाशीलता (५९८.१८ यू ग्रॅम⁻¹) चुना न वापरता आणि ०.२ मोल/लिटर सांद्रतेच्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी करून उपचार केल्यावर सर्वाधिक होती. जेव्हा ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी त्याच सांद्रतेवर किंवा ०.१ मोल/लिटर सांद्रतेवर केली गेली, तेव्हा वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण वाढल्याने एसओडी क्रियाशीलता वाढली. ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर, एसओडी क्रियाशीलता लक्षणीयरीत्या कमी झाली (आकृती २).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील सुपरऑक्साइड डिसम्युटेस, पेरॉक्सिडेस आणि कॅटॅलेसच्या क्रियेवर पानांवर ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी केल्याचा परिणाम
मुळांमधील SOD क्रियाशीलतेप्रमाणेच, चुन्याशिवाय उपचार केलेल्या आणि 0.2 mol L-1 ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी केलेल्या मुळांमधील POD क्रियाशीलता सर्वाधिक (63.33 µmol g-1) होती, जी नियंत्रणापेक्षा (25.50 µmol g-1) 148.35% जास्त आहे. ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीची तीव्रता आणि 3750 kg/m2 चुन्याच्या उपचारात वाढ झाल्याने, POD क्रियाशीलता प्रथम वाढली आणि नंतर कमी झाली. 0.1 mol L-1 ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या उपचाराच्या तुलनेत, 0.2 mol L-1 ऑक्झॅलिक ऍसिडने उपचार केल्यावर POD क्रियाशीलता 36.31% ने कमी झाली (आकृती 2).
०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी आणि २२५० किलोग्रॅम/तास/चौरस मीटर किंवा ३७५० किलोग्रॅम/तास/चौरस मीटर चुना टाकणे वगळता, CAT क्रियाशीलता नियंत्रणापेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त होती. जेव्हा ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केली आणि ०.२२५० किलोग्रॅम/चौरस मीटर किंवा ३७५० किलोग्रॅम/तास/चौरस मीटर चुना टाकला, तेव्हा ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न केलेल्या उपचाराच्या तुलनेत CAT क्रियाशीलतेत अनुक्रमे २७६.०८%, २७६.६९% आणि ३३.०५% वाढ झाली. मुळांमधील CAT क्रियाशीलता (८०३.५२ मायक्रोमोल/ग्रॅम) चुना न टाकलेल्या उपचारात आणि ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड टाकलेल्या उपचारात सर्वाधिक होती. ३७५० किलोग्रॅम/तास/चौरस मीटर चुना आणि ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड टाकलेल्या उपचारात CAT क्रियाशीलता सर्वात कमी (१७२.८८ मायक्रोमोल/ग्रॅम) होती (आकृती २).
द्विचलीय विश्लेषणातून असे दिसून आले की, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील CAT क्रियाशीलता आणि MDA क्रियाशीलता यांचा फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिड किंवा चुन्याच्या प्रमाणाशी आणि दोन्ही उपचारांशी लक्षणीय संबंध होता (तक्ता ३). मुळांमधील SOD क्रियाशीलता ही चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड उपचार किंवा ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणीच्या तीव्रतेशी लक्षणीयरीत्या संबंधित होती. मुळांमधील POD क्रियाशीलता ही वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणावर किंवा चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड उपचारांवर लक्षणीयरीत्या अवलंबून होती.
चुन्याच्या वापराचे प्रमाण आणि ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीची तीव्रता वाढल्याने मुळांमधील विद्राव्य साखरेचे प्रमाण कमी झाले. चुन्याचा वापर न करता आणि ७५० किलो/तास/चौरस मीटर चुना वापरल्यावर पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील विद्राव्य साखरेच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. जेव्हा २२५० किलो/चौरस मीटर चुना वापरला गेला, तेव्हा ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिडने उपचार केल्यावर विद्राव्य साखरेचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी न करता केलेल्या उपचारांपेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त होते, ज्यात २२.८१% वाढ झाली. जेव्हा ३७५० किलो/तास/चौरस मीटर चुना वापरला गेला, तेव्हा फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ऍसिडची तीव्रता वाढल्याने विद्राव्य साखरेचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी न करण्याच्या तुलनेत, ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिडने उपचार केल्यावर विद्राव्य साखरेचे प्रमाण ३८.७७% ने कमी झाले. याव्यतिरिक्त, 0.2 mol·L-1 ऑक्झॅलिक ऍसिड स्प्रे ट्रीटमेंटमध्ये विद्राव्य साखरेचे प्रमाण सर्वात कमी होते, जे 205.80 mg·g-1 होते (आकृती 3).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील विद्राव्य एकूण शर्करा आणि विद्राव्य प्रथिनांच्या प्रमाणावर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या पर्ण फवारणीचा होणारा परिणाम
चुन्याचा वापर आणि ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीचे प्रमाण वाढल्याने मुळांमधील विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण कमी झाले. चुना न वापरता, ०.२ मोल/लिटर या तीव्रतेच्या ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीने उपचार केल्यावर, नियंत्रणाच्या तुलनेत विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण १६.२०% ने लक्षणीयरीत्या कमी झाले. जेव्हा ७५० किलो/तास चुना वापरला गेला, तेव्हा पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील विद्राव्य प्रथिनांच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. २२५० किलो/तास/मीटर या प्रमाणात चुना वापरण्याच्या परिस्थितीत, ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणी केलेल्या उपचारातील विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणी न केलेल्या उपचारापेक्षा (३५.११%) लक्षणीयरीत्या जास्त होते. जेव्हा ३७५० किलो·तास/मीटर² चुना वापरला गेला, तेव्हा ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीची तीव्रता वाढल्याने विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले, आणि जेव्हा ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीची तीव्रता ०.२ मोल·लिटर होती, तेव्हा विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण सर्वात कमी (२६९.८४ मायक्रोग्रॅम·ग्रॅम⁻¹) होते. उपचार (आकृती ३).
चुन्याचा वापर न करता पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळातील मुक्त अमिनो आम्लांच्या प्रमाणामध्ये कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ऑक्सॅलिक आम्लाच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने आणि ७५० किलो/तास/चौरस मीटर चुन्याचा वापर केल्याने, मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वाढले. ऑक्सॅलिक आम्लाची फवारणी न केलेल्या उपचाराच्या तुलनेत, २२५० किलो प्रति हेक्टर-२ चुना आणि ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्सॅलिक आम्लाची फवारणी केल्यावर मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण ३३.५८% ने लक्षणीयरीत्या वाढले. ऑक्सॅलिक आम्लाच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने आणि ३७५० किलो/चौरस मीटर चुन्याचा वापर केल्याने मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. ऑक्सॅलिक आम्लाची फवारणी न केलेल्या उपचाराच्या तुलनेत, ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्सॅलिक आम्लाच्या फवारणीच्या उपचारातील मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण ४९.७६% ने कमी झाले. ऑक्सॅलिक आम्लाची फवारणी न करता केलेल्या उपचारात मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण सर्वाधिक होते आणि ते २.०९ मिलिग्रॅम प्रति ग्रॅम होते. 0.2 mol/L ऑक्सॅलिक ऍसिड स्प्रे ट्रीटमेंटमध्ये सर्वात कमी मुक्त अमिनो ऍसिडचे प्रमाण (1.05 mg/g) होते (आकृती 4).
कॅडमियमच्या ताणतणावाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील मुक्त अमिनो आम्ल आणि प्रोलाइनच्या प्रमाणावर पानांवर ऑक्झॅलिक आम्लाची फवारणी केल्याचा परिणाम
वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या फवारणीचे प्रमाण वाढल्याने मुळांमधील प्रोलाइनचे प्रमाण कमी झाले. जेव्हा चुना वापरला गेला नाही, तेव्हा पॅनाक्स जिनसेंगच्या मुळांमधील प्रोलाइनच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. जशी ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या फवारणीची तीव्रता आणि ७५० किंवा २२५० किलो/मी² चुन्याचा वापर वाढला, तसे प्रोलाइनचे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वाढले. ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणी केलेल्या नमुन्यातील प्रोलाइनचे प्रमाण, ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणी केलेल्या नमुन्यापेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त होते, ज्यात अनुक्रमे १९.५२% आणि ४४.३३% वाढ झाली. जेव्हा ३७५० किलो/मी² चुना वापरण्यात आला, तेव्हा फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ऍसिडची तीव्रता वाढल्याने प्रोलाइनचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी केल्यानंतर, ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी न करण्याच्या तुलनेत प्रोलाइनचे प्रमाण ५४.६८% ने कमी झाले. सर्वात कमी प्रोलाइनचे प्रमाण 0.2 mol/l ऑक्झॅलिक ऍसिडने उपचार केल्यावर होते आणि ते 11.37 μg/g होते (आकृती 4).
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगमध्ये एकूण सॅपोनीनचे प्रमाण Rg1>Rb1>R1 असे आहे. ऑक्झॅलिक ऍसिड फवारणीची वाढती तीव्रता आणि चुना न वापरता केलेल्या फवारणीच्या तीव्रतेनुसार तीन सॅपोनीनच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही (तक्ता ४).
०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतरचे R1 प्रमाण, ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न करता आणि ७५० किंवा ३७५० किलो/मी² चुन्याचा डोस वापरण्याच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या कमी होते. ० किंवा ०.१ मोल/लिटरच्या फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या सांद्रतेवर, घातलेल्या चुन्याचे प्रमाण वाढवल्याने R1 प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या सांद्रतेवर, ३७५० किलो/तास/मी² चुन्यामधील R1 प्रमाण, चुना न घालता मिळालेल्या ४३.८४% प्रमाणापेक्षा लक्षणीयरीत्या कमी होते (तक्ता ४).
जसजशी ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढली आणि 750 kg/m2 चुना मिसळला गेला, तसतसे Rg1 चे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. 2250 आणि 3750 kg/h या चुन्याच्या वापराच्या दरांवर, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने Rg1 चे प्रमाण कमी झाले. फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या समान तीव्रतेवर, चुन्याचे प्रमाण वाढल्यास, Rg1 चे प्रमाण प्रथम वाढते आणि नंतर कमी होते. नियंत्रणाच्या तुलनेत, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या तीन तीव्रता आणि 750 kg/m2 चुन्याच्या उपचारांमधील Rg1 चे प्रमाण वगळता, जे नियंत्रणापेक्षा जास्त होते, इतर उपचारांमधील पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील Rg1 चे प्रमाण नियंत्रणापेक्षा कमी होते. 750 kg/h/m2 चुना आणि 0.1 mol/l ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर Rg1 चे प्रमाण सर्वाधिक होते, जे नियंत्रणापेक्षा 11.54% जास्त होते (तक्ता 4).
२२५० किलो/तास या प्रवाह दराने ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता आणि वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण वाढल्याने, Rb1 चे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर, Rb1 चे प्रमाण ३.४६% या कमाल मूल्यावर पोहोचले, जे ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न करण्याच्या तुलनेत ७४.७५% जास्त होते. चुन्याच्या इतर उपचारांसाठी, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या वेगवेगळ्या तीव्रतेमध्ये कोणतेही लक्षणीय फरक आढळले नाहीत. ०.१ आणि ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर, चुन्याचे प्रमाण वाढल्याने, Rb1 चे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर कमी झाले (तक्ता ४).
ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या त्याच सांद्रतेमध्ये, जसजशी चुन्याची मात्रा वाढत गेली, तसतसे फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. चुन्याशिवाय आणि ३७५० किलो/मी² चुन्यासह ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या वेगवेगळ्या सांद्रतेची फवारणी केल्यावर फ्लेव्होनॉइड्सच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ७५० आणि २२५० किलो/मी² चुना मिसळल्यावर, जसजशी फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची सांद्रता वाढत गेली, तसतसे फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. ७५० किलो/मी² चुना वापरून आणि ०.१ मोल/लिटर सांद्रतेच्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर, फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण सर्वाधिक – ४.३८ मिग्रॅ/ग्रॅम होते, जे तितकाच चुना वापरून केलेल्या फवारणीपेक्षा १८.३८% जास्त होते, आणि त्यावेळी ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी करण्याची गरज नव्हती. 0.1 mol L-1 ऑक्सॅलिक ऍसिड स्प्रेने उपचार केल्यावर फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण ऑक्सॅलिक ऍसिडशिवाय केलेल्या उपचाराच्या आणि 2250 kg/m2 डोसमध्ये चुना वापरून केलेल्या उपचाराच्या तुलनेत 21.74% ने वाढले (आकृती 5).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळातील फ्लेव्होनॉइड्सच्या प्रमाणावर पानांवर ऑक्झॅलेटची फवारणी केल्याचा परिणाम
द्विचलीय विश्लेषणातून असे दिसून आले की, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील विद्राव्य साखरेचे प्रमाण हे वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणावर आणि फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या तीव्रतेवर लक्षणीयरीत्या अवलंबून होते. मुळांमधील विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण हे चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या मात्रेशी लक्षणीयरीत्या सहसंबंधित होते. मुळांमधील मुक्त अमिनो ॲसिड आणि प्रोलाइनचे प्रमाण हे वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण, फवारणी केलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची तीव्रता, चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड यांच्याशी लक्षणीयरीत्या सहसंबंधित होते (तक्ता ५).
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील R1 चे प्रमाण हे फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या तीव्रतेवर, वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणावर आणि चुना व ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या मिश्रणावर लक्षणीयरीत्या अवलंबून होते. फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण हे ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या तीव्रतेवर आणि घातलेल्या चुन्याच्या प्रमाणावर लक्षणीयरीत्या अवलंबून होते.
मातीमध्ये कॅडमियमचे स्थिरीकरण करून वनस्पतींमधील कॅडमियमची पातळी कमी करण्यासाठी अनेक सुधारक वापरले गेले आहेत, जसे की चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड30. पिकांमधील कॅडमियमची पातळी कमी करण्यासाठी चुन्याचा माती सुधारक म्हणून मोठ्या प्रमाणावर वापर केला जातो31. लिआंग आणि इतरांनी32 अहवाल दिला आहे की जड धातूंनी दूषित झालेली माती सुधारण्यासाठी ऑक्झॅलिक ॲसिडचा देखील वापर केला जाऊ शकतो. दूषित मातीत ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या विविध सांद्रता टाकल्यानंतर, मातीतील सेंद्रिय पदार्थांचे प्रमाण वाढले, कॅटायन विनिमय क्षमता कमी झाली आणि pH वाढला33. ऑक्झॅलिक ॲसिड मातीतील धातूंच्या आयनांशी देखील अभिक्रिया करू शकते. कॅडमियमच्या ताणाच्या परिस्थितीत, नियंत्रणाच्या तुलनेत पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमध्ये कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या वाढले. तथापि, जर चुन्याचा वापर केला, तर ते लक्षणीयरीत्या कमी होते. या अभ्यासात जेव्हा ७५० किलो/तास/मी² चुना वापरण्यात आला, तेव्हा मुळांमधील कॅडमियमचे (Cd) प्रमाण राष्ट्रीय मानकापर्यंत पोहोचले (कॅडमियम मर्यादा Cd≤०.५ मिग्रॅ/किलो, AQSIQ, GB/T १९०८६-२००८३४), आणि त्याचा परिणाम चांगला होता. २२५० किलो/मी² चुना टाकल्याने सर्वोत्तम परिणाम साधला जातो. चुना टाकल्याने मातीतील Ca²⁺ आणि Cd²⁺ साठी मोठ्या प्रमाणात स्पर्धा स्थळे निर्माण होतात, आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड टाकल्याने पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण कमी होते. चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड मिसळल्यानंतर, पॅनाक्स जिनसेंगच्या मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले आणि ते राष्ट्रीय मानकापर्यंत पोहोचले. मातीतील Ca²⁺ वस्तुमान प्रवाह प्रक्रियेद्वारे मुळांच्या पृष्ठभागावर शोषले जाते आणि कॅल्शियम वाहिन्या (Ca²⁺ वाहिन्या), कॅल्शियम पंप (Ca²⁺-AT-Pase) आणि Ca²⁺/H+ अँटीपोर्टर्सद्वारे मुळांच्या पेशींमध्ये शोषले जाऊ शकते, आणि नंतर आडव्या दिशेने मुळांपर्यंत पोहोचवले जाते. झायलम२३. मुळांमधील कॅल्शियम (Ca) आणि कॅडमियम (Cd) च्या प्रमाणामध्ये लक्षणीय नकारात्मक सहसंबंध आढळला (P < 0.05). कॅल्शियमचे प्रमाण वाढल्याने कॅडमियमचे प्रमाण कमी झाले, जे कॅल्शियम आणि कॅडमियममधील विरोधाच्या कल्पनेशी सुसंगत आहे. ANOVA ने दाखवले की चुन्याच्या प्रमाणाचा पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळातील कॅल्शियमच्या प्रमाणावर लक्षणीय परिणाम झाला. पोंग्रॅक आणि सहकाऱ्यांनी ३५ अहवाल दिला आहे की, कॅल्शियम ऑक्झॅलेटच्या स्फटिकांमध्ये कॅडमियम ऑक्झॅलेटला बांधला जातो आणि कॅल्शियमशी स्पर्धा करतो. तथापि, ऑक्झॅलिक ॲसिडचा कॅल्शियमवरील नियामक परिणाम नगण्य होता. यावरून असे दिसून येते की, ऑक्झॅलिक ॲसिड आणि Ca2+ पासून कॅल्शियम ऑक्झॅलेटचे अवक्षेपण हे साधे अवक्षेपण नाही, आणि ही सह-अवक्षेपण प्रक्रिया अनेक चयापचय मार्गांद्वारे नियंत्रित केली जाऊ शकते.
कॅडमियमच्या ताणामुळे वनस्पतींमध्ये मोठ्या प्रमाणात प्रतिक्रियाशील ऑक्सिजन प्रजाती (ROS) तयार होतात, ज्यामुळे पेशी पडद्यांच्या संरचनेला नुकसान पोहोचते³⁶. ROS ची पातळी आणि वनस्पतींच्या प्लाझ्मा पडद्याच्या नुकसानीची तीव्रता तपासण्यासाठी मॅलॉन्डियलडिहाइड (MDA) सामग्रीचा सूचक म्हणून वापर केला जाऊ शकतो³⁷. अँटीऑक्सिडंट प्रणाली ही प्रतिक्रियाशील ऑक्सिजन प्रजातींना नष्ट करण्यासाठी एक महत्त्वाची संरक्षक यंत्रणा आहे³⁸. अँटीऑक्सिडंट एन्झाइम्सची (POD, SOD, आणि CAT सह) क्रियाशीलता सामान्यतः कॅडमियमच्या ताणामुळे बदलते. निकालांवरून असे दिसून आले की MDA सामग्रीचा Cd एकाग्रतेशी सकारात्मक संबंध होता, जे दर्शवते की वाढत्या Cd एकाग्रतेसह वनस्पती पडद्याच्या लिपिड पेरोक्सिडेशनची व्याप्ती वाढते³⁷. हे ओयांग आणि इतरांच्या अभ्यासाच्या निकालांशी सुसंगत आहे³⁹. हा अभ्यास दर्शवितो की MDA सामग्रीवर चुना, ऑक्झॅलिक ऍसिड आणि चुना व ऑक्झॅलिक ऍसिड यांचा लक्षणीय प्रभाव पडतो. ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीनंतर, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमधील MDA चे प्रमाण कमी झाले, यावरून असे दिसून येते की ऑक्झॅलिक ॲसिडमुळे पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमधील कॅडमियमची (Cd) जैवउपलब्धता आणि ROS ची पातळी कमी होऊ शकते. अँटिऑक्सिडंट एन्झाइम प्रणालीमध्येच वनस्पतीचे विषहरण कार्य घडते. SOD वनस्पती पेशींमधील O2- काढून टाकते आणि बिनविषारी O2 व कमी-विषारी H2O2 तयार करते. POD आणि CAT वनस्पतींच्या उतींमधून H2O2 काढून टाकतात आणि H2O2 चे H2O मध्ये विघटन करण्यास उत्प्रेरक म्हणून काम करतात. iTRAQ प्रोटीओम विश्लेषणावर आधारित, असे आढळून आले की Cd40 च्या ताणाखाली चुन्याचा वापर केल्यानंतर SOD आणि PAL च्या प्रथिन अभिव्यक्तीची पातळी कमी झाली आणि POD ची अभिव्यक्ती पातळी वाढली. पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळातील CAT, SOD आणि POD यांच्या क्रियाशीलतेवर ऑक्झॅलिक ॲसिड आणि चुन्याच्या मात्रेचा लक्षणीय परिणाम झाला. ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीमुळे SOD आणि CAT ची क्रियाशीलता लक्षणीयरीत्या वाढली, परंतु POD क्रियाशीलतेवरील नियामक परिणाम स्पष्ट नव्हता. यावरून असे दिसून येते की, ऑक्झॅलिक ॲसिड कॅडमियमच्या ताणाखाली ROS चे विघटन गतिमान करते आणि मुख्यत्वे CAT च्या क्रियाशीलतेचे नियमन करून H2O2 चे निर्मूलन पूर्ण करते, जे स्यूडोस्पर्मम सिबिरिकम कोसच्या अँटिऑक्सिडंट एन्झाइम्सवरील गुओ आणि इतरांच्या ४१ संशोधन निष्कर्षांसारखेच आहे. अँटिऑक्सिडंट प्रणालीच्या एन्झाइम्सच्या क्रियाशीलतेवर आणि मॅलॉन्डियलडिहाइडच्या प्रमाणावर ७५० किलो/तास/मी² चुना टाकण्याचा परिणाम ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या परिणामासारखाच आहे. निष्कर्षांवरून असे दिसून आले की, ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणीमुळे पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमध्ये SOD आणि CAT ची क्रियाशीलता अधिक प्रभावीपणे वाढवता येते आणि पॅनाक्स नोटोजिनसेंगची ताण-प्रतिकारशक्ती वाढवता येते. 0.2 mol L-1 ऑक्झॅलिक ऍसिड आणि 3750 kg hm-2 चुना यांच्या उपचाराने SOD आणि POD ची क्रियाशीलता कमी झाली, हे दर्शवते की ऑक्झॅलिक ऍसिड आणि Ca2+ च्या उच्च सांद्रतेची जास्त फवारणी वनस्पतींवर ताण निर्माण करू शकते, जे लूओ आणि इतरांच्या अभ्यासाशी सुसंगत आहे. वेट 42.