Nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद. तुम्ही मर्यादित CSS समर्थनासह ब्राउझरची आवृत्ती वापरत आहात. सर्वोत्तम अनुभवासाठी, आम्ही शिफारस करतो की तुम्ही अद्ययावत ब्राउझर वापरा (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये कॉम्पॅटिबिलिटी मोड अक्षम करा). याव्यतिरिक्त, सतत समर्थन सुनिश्चित करण्यासाठी, आम्ही ही साइट स्टाईल्स आणि जावास्क्रिप्टशिवाय दाखवतो.
प्रत्येक स्लाईडवर तीन लेख दाखवणारे स्लायडर्स. स्लाईड्समधून पुढे जाण्यासाठी बॅक आणि नेक्स्ट बटणे वापरा, किंवा प्रत्येक स्लाईडवर जाण्यासाठी शेवटी असलेली स्लाईड कंट्रोलर बटणे वापरा.
युनान प्रांतात औषधी वनस्पती पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या लागवडीसाठी कॅडमियम (Cd) प्रदूषण एक धोका आहे. बाह्य Cd ताणाच्या परिस्थितीत, Cd संचयनावर आणि अँटिऑक्सिडंट क्रियेवर चुन्याचा वापर (०.७५०, २२५० आणि ३७५० किलो बीएम-२) आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी (०, ०.१ आणि ०.२ मोल एल-१) यांचा होणारा परिणाम समजून घेण्यासाठी एक क्षेत्रीय प्रयोग आयोजित करण्यात आला होता. निकालांवरून असे दिसून आले की, कळीचा चुना आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडची पर्ण फवारणी Cd ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमध्ये Ca2+ ची पातळी वाढवू शकते आणि Cd2+ विषारीपणा कमी करू शकते. चुना आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या वापरामुळे अँटिऑक्सिडंट एन्झाइम्सची क्रियाशीलता वाढली आणि ऑस्मोरेग्युलेटर्सच्या चयापचयात बदल झाला. CAT ची क्रियाशीलता सर्वात लक्षणीयरीत्या, २.७७ पटीने वाढली. ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या उपचाराने SOD ची सर्वाधिक क्रियाशीलता १.७८ पटीने वाढली. MDA चे प्रमाण ५८.३८% ने कमी झाले. विद्राव्य शर्करा, मुक्त अमिनो आम्ल, प्रोलाइन आणि विद्राव्य प्रथिने यांच्याशी याचा खूप महत्त्वपूर्ण सहसंबंध आहे. चुना आणि ऑक्झॅलिक आम्ल हे कॅल्शियम आयन (Ca2+) वाढवू शकतात, कॅडमियम (Cd) कमी करू शकतात, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमध्ये ताण सहन करण्याची क्षमता सुधारू शकतात आणि एकूण सॅपोनिन्स व फ्लेव्होनॉइड्सचे उत्पादन वाढवू शकतात. कॅडमियमचे प्रमाण सर्वात कमी होते, नियंत्रणापेक्षा ६८.५७% कमी, जे मानक मूल्याशी (Cd≤०.५ मिग्रॅ/किलो, GB/T १९०८६-२००८) जुळणारे होते. SPN चे प्रमाण ७.७३% होते, जे प्रत्येक उपचारातील सर्वोच्च पातळीवर पोहोचले, आणि फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण २१.७४% ने लक्षणीयरीत्या वाढले, ज्यामुळे औषधाचे मानक मूल्य आणि सर्वोत्तम उत्पादन मिळाले.
लागवडीखालील जमिनीतील एक सामान्य प्रदूषक म्हणून कॅडमियम (Cd) सहजपणे स्थलांतरित होते आणि त्यात लक्षणीय जैविक विषारीपणा असतो¹. एल शफी आणि इतरांनी² अहवाल दिला आहे की कॅडमियमच्या विषारीपणामुळे वापरल्या जाणाऱ्या वनस्पतींच्या गुणवत्तेवर आणि उत्पादकतेवर परिणाम होतो. अलिकडच्या वर्षांत, नैऋत्य चीनमधील लागवडीखालील जमिनीच्या मातीत अतिरिक्त कॅडमियमची समस्या खूप गंभीर झाली आहे. युनान प्रांत हे चीनचे जैवविविधतेचे साम्राज्य आहे, जिथे औषधी वनस्पतींच्या प्रजाती देशात प्रथम क्रमांकावर आहेत. तथापि, युनान प्रांतातील समृद्ध खनिज संसाधनांमुळे खाणकाम प्रक्रियेदरम्यान जमिनीत जड धातूंचे प्रदूषण अपरिहार्यपणे होते, ज्यामुळे स्थानिक औषधी वनस्पतींच्या उत्पादनावर परिणाम होतो.
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंग (बर्किल) चेन3 ही अरालियासी प्रजातीतील पॅनॅक्स जिनसेंग नावाची एक अत्यंत मौल्यवान बहुवार्षिक औषधी वनस्पती आहे. पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगचे मूळ रक्ताभिसरण सुधारते, रक्ताची गाठ दूर करते आणि वेदना कमी करते. याचे मुख्य उत्पादन स्थळ युनान प्रांतातील वेनशान परगणा आहे5. पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या लागवड क्षेत्रात 75% पेक्षा जास्त जमिनीवर कॅडमियम (Cd) प्रदूषण आढळले आणि विविध ठिकाणी ते 81-100% पेक्षा जास्त होते6. कॅडमियमच्या विषारी प्रभावामुळे पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या औषधी घटकांचे, विशेषतः सॅपोनिन्स आणि फ्लेव्होनॉइड्सचे उत्पादन मोठ्या प्रमाणात कमी होते. सॅपोनिन्स हे ॲग्लायकोन्सचा एक वर्ग आहे, ज्यामध्ये ट्रायटरपेनॉइड्स किंवा स्पायरोस्टेरेन्स असतात, जे अनेक चिनी औषधी वनस्पतींचे मुख्य सक्रिय घटक आहेत आणि त्यात सॅपोनिन्सचा समावेश असतो. काही सॅपोनिन्समध्ये जीवाणूविरोधी क्रिया, ज्वरनाशक, शामक आणि कर्करोगविरोधी क्रिया यांसारख्या मौल्यवान जैविक क्रिया देखील असतात⁷. फ्लेव्होनॉइड्स सामान्यतः संयुगांच्या अशा मालिकेचा संदर्भ देतात ज्यात फिनोलिक हायड्रॉक्सिल गटांसह दोन बेंझिन रिंग तीन मध्यवर्ती कार्बन अणूंद्वारे जोडलेल्या असतात आणि मुख्य गाभा २-फिनाइलक्रोमॅनोन आहे⁸. हे एक शक्तिशाली अँटीऑक्सिडंट आहे, जे वनस्पतींमधील ऑक्सिजन फ्री रॅडिकल्स प्रभावीपणे काढून टाकू शकते, दाहक जैविक एन्झाइम्सच्या स्रावाला प्रतिबंधित करते, जखम भरण्यास आणि वेदना कमी करण्यास प्रोत्साहन देते आणि कोलेस्ट्रॉलची पातळी कमी करते. हे पॅनाक्स जिनसेंगच्या मुख्य सक्रिय घटकांपैकी एक आहे. पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या उत्पादन क्षेत्रांमध्ये कॅडमियममुळे होणाऱ्या मातीच्या प्रदूषणाची समस्या सोडवणे ही त्याच्या मुख्य औषधी घटकांचे उत्पादन सुनिश्चित करण्यासाठी एक आवश्यक अट आहे.
मातीतील कॅडमियम प्रदूषण जागेवरच स्थिर करण्यासाठी चुना हा एक सामान्य निष्क्रियक (passivator) आहे. तो मातीतील कॅडमियमच्या अधिशोषण आणि निक्षेपणावर परिणाम करतो आणि मातीचा pH वाढवून तसेच मातीची कॅटायन विनिमय क्षमता (CEC), मातीची क्षार संपृक्तता (BS), मातीची रेडॉक्स क्षमता (Eh)3,11 कार्यक्षमता बदलून मातीतील कॅडमियमची जैविक क्रियाशीलता कमी करतो. याव्यतिरिक्त, चुना मोठ्या प्रमाणात Ca2+ पुरवतो, जो Cd2+ सोबत आयनिक विरोध निर्माण करतो, मुळांच्या अधिशोषण स्थळांसाठी स्पर्धा करतो, कॅडमियमला ​​खोडापर्यंत पोहोचण्यापासून रोखतो आणि त्याची जैविक विषारीता कमी असते. कॅडमियमच्या ताणाखाली ५० mmol l-1 कॅल्शियम दिल्याने, तिळाच्या पानांमधील कॅडमियमचे वहन रोखले गेले आणि कॅडमियमचा संचय ८०% ने कमी झाला. भात (ओरिझा सॅटिवा एल.) आणि इतर पिकांवरही यासंबंधी अनेक अभ्यास अहवाल प्रसिद्ध झाले आहेत12,13.
जड धातूंचा संचय नियंत्रित करण्यासाठी पिकांच्या पानांवर फवारणी करणे ही अलिकडच्या वर्षांत जड धातूंना हाताळण्याची एक नवीन पद्धत आहे. याचे तत्त्व मुख्यत्वे वनस्पती पेशींमधील किलेशन प्रतिक्रियेवर अवलंबून आहे, ज्यामुळे जड धातू पेशीभित्तीवर जमा होतात आणि वनस्पतींद्वारे जड धातूंचे शोषण रोखले जाते¹⁴,¹⁵. एक स्थिर डायकार्बोक्सिलिक आम्ल चिलेटिंग एजंट म्हणून, ऑक्झॅलिक आम्ल वनस्पतींमधील जड धातूंच्या आयनांना थेट चिलेट करू शकते, ज्यामुळे विषारीपणा कमी होतो. अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की सोयाबीनमधील ऑक्झॅलिक आम्ल Cd²⁺ ला चिलेट करू शकते आणि ट्रायकोमच्या अग्र पेशींद्वारे Cd-युक्त स्फटिक मुक्त करू शकते, ज्यामुळे शरीरातील Cd²⁺ ची पातळी कमी होते¹⁶. ऑक्झॅलिक आम्ल जमिनीचा pH नियंत्रित करू शकते, सुपरऑक्साइड डिसम्युटेस (SOD), पेरॉक्सिडेस (POD) आणि कॅटलेज (CAT) यांची क्रियाशीलता वाढवू शकते, आणि विद्राव्य साखर, विद्राव्य प्रथिने, मुक्त अमिनो आम्ल आणि प्रोलाइन यांच्या अंतःप्रवेशाचे नियमन करू शकते. चयापचय नियंत्रक¹⁷,¹⁸. ऑक्झॅलेट वनस्पतींमध्ये आम्लधर्मी पदार्थ आणि अतिरिक्त Ca2+ हे जर्म प्रथिनांच्या क्रियेमुळे कॅल्शियम ऑक्झॅलेट अवक्षेप तयार करतात. वनस्पतींमधील Ca2+ च्या प्रमाणाचे नियमन केल्याने वनस्पतींमधील विरघळलेले ऑक्झॅलिक आम्ल आणि Ca2+ प्रभावीपणे नियंत्रित करता येते आणि ऑक्झॅलिक आम्ल व Ca2+ चा अतिरिक्त संचय टाळता येतो¹⁹,²⁰.
पुनर्स्थापनेच्या परिणामावर परिणाम करणाऱ्या प्रमुख घटकांपैकी एक म्हणजे वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण. हे सिद्ध झाले आहे की चुन्याचा वापर ७५० ते ६००० किलो·तास·मीटर−२ इतका असतो. ५.०-५.५ पीएच असलेल्या आम्लधर्मी जमिनींसाठी, ३०००-६००० किलो·तास·मीटर-२ या मात्रेत चुना वापरण्याचा परिणाम ७५० किलो·तास·मीटर-२ या मात्रेपेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त होता²¹. तथापि, चुन्याचा अतिवापर केल्यास जमिनीवर काही नकारात्मक परिणाम होतात, जसे की जमिनीच्या पीएचमध्ये मोठे बदल आणि जमिनीची घट्टता²². म्हणून, आम्ही CaO उपचाराचे स्तर ०, ७५०, २२५० आणि ३७५० किलो·तास·मीटर−२ असे निश्चित केले. जेव्हा अ‍ॅरेबिडोप्सिसवर ऑक्झॅलिक ॲसिड वापरले गेले, तेव्हा १० एमएम एल-१ वर Ca²⁺ लक्षणीयरीत्या कमी झाल्याचे आढळले आणि Ca²⁺ सिग्नलिंगवर प्रभाव टाकणारे CRT जनुकीय कुटुंब तीव्र प्रतिसाद देत होते²⁰. काही पूर्वीच्या अभ्यासांच्या संचयामुळे आम्हाला या प्रयोगाची व्याप्ती निश्चित करता आली आणि Ca2+ व Cd2+ वर बाह्य पूरकांच्या आंतरक्रियेचा अभ्यास सुरू ठेवता आला23,24,25. त्यामुळे, या अभ्यासाचा उद्देश कॅडमियम-दूषित जमिनीत पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या कॅडमियम सामग्रीवर आणि ताण सहनशीलतेवर स्थानिक चुन्याचा वापर आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या पर्ण फवारणीच्या परिणामांच्या नियामक यंत्रणेचा तपास करणे, तसेच पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या औषधी गुणवत्तेची हमी देण्याचे सर्वोत्तम मार्ग आणि उपाय अधिक शोधणे हा आहे. हे कॅडमियम-दूषित जमिनीत औषधी वनस्पतींच्या लागवडीच्या विस्ताराला मार्गदर्शन करण्यासाठी आणि औषधांसाठी बाजाराची मागणी पूर्ण करण्यासाठी उच्च-गुणवत्तेचे, शाश्वत उत्पादन प्रदान करण्यासाठी मौल्यवान माहिती प्रदान करते.
युनान प्रांतातील वेनशान परगण्यातील किउबेई काउंटीमधील लानिझाई (24°11′N, 104°3′E, उंची 1446 मी) येथे, वेनशान नोटोजिनसेंग या स्थानिक वाणाचा नमुना म्हणून वापर करून एक क्षेत्रीय प्रयोग आयोजित करण्यात आला. येथील सरासरी वार्षिक तापमान 17°C आणि सरासरी वार्षिक पर्जन्यमान 1250 मिमी आहे. अभ्यास केलेल्या मातीची पार्श्वभूमी मूल्ये: एकूण नायट्रोजन (TN) 0.57 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, एकूण फॉस्फरस (TP) 1.64 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, एकूण कॅडमियम (TC) 16.31 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, सापेक्ष आर्द्रता (RH) 31.86 ग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, अल्कधर्मी जलीय नायट्रोजन (N) 88.82 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, प्रभावी फॉस्फरस (P) 18.55 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, उपलब्ध पोटॅशियम (K) 100.37 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम, एकूण कॅडमियम (Cd) 0.3 मिलिग्रॅम प्रति किलोग्रॅम आणि pH 5.4.
१० डिसेंबर २०१७ रोजी, प्रत्येक प्लॉटमधील ०-१० सेंमी वरच्या मातीत ६ मिग्रॅ/किलो Cd2+ (CdCl2 2.5H2O) आणि चुना (०.७५०, २२५० आणि ३७५० किलो प्रति तास प्रति चौरस मीटर) मिसळून वापरण्यात आले. प्रत्येक उपचाराची ३ वेळा पुनरावृत्ती करण्यात आली. प्रायोगिक प्लॉट यादृच्छिकपणे निवडले होते, प्रत्येक प्लॉटचे क्षेत्रफळ ३ चौरस मीटर होते. एक वर्षाच्या पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या रोपांची मशागत केल्यानंतर १५ दिवसांनी जमिनीत पुनर्लागवड करण्यात आली. सावलीच्या जाळ्या वापरताना, सावलीच्या आच्छादनाखाली पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगला मिळणारी प्रकाशाची तीव्रता सामान्य नैसर्गिक प्रकाशाच्या तीव्रतेच्या सुमारे १८% असते. स्थानिक पारंपरिक लागवड पद्धतींनुसार लागवड केली जाते. २०१९ मध्ये पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या परिपक्वतेच्या टप्प्यावर, सोडियम ऑक्झॅलेट म्हणून ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी केली जाईल. ऑक्झॅलिक ॲसिडची सांद्रता अनुक्रमे ०, ०.१ आणि ०.२ मोल प्रति लिटर होती, आणि कचऱ्याच्या गाळलेल्या द्रावणाच्या सरासरी पीएचचे अनुकरण करण्यासाठी NaOH वापरून पीएच ५.१६ वर समायोजित करण्यात आला. आठवड्यातून एकदा सकाळी ८ वाजता पानांच्या वरच्या आणि खालच्या पृष्ठभागांवर फवारणी करा. ४ वेळा फवारणी केल्यानंतर, ५ व्या आठवड्यात ३ वर्षे जुन्या पॅनाक्स नोटोजिनसेंग वनस्पतींची काढणी करण्यात आली.
नोव्हेंबर २०१९ मध्ये, शेतातून ऑक्झॅलिक ऍसिडने प्रक्रिया केलेली तीन वर्षांची पॅनाक्स नोटोजिनसेंगची रोपे गोळा करण्यात आली. शारीरिक चयापचय आणि एन्झाइमॅटिक क्रियाकलापांची चाचणी करण्यासाठी तीन वर्षांच्या पॅनाक्स नोटोजिनसेंग रोपांचे काही नमुने फ्रीझर ट्यूबमध्ये ठेवण्यात आले, द्रव नायट्रोजनमध्ये त्वरित गोठवण्यात आले आणि नंतर -८०°C तापमानावर रेफ्रिजरेटरमध्ये स्थानांतरित करण्यात आले. परिपक्व अवस्थेतील मुळांच्या नमुन्यांमध्ये कॅडमियम (Cd) आणि सक्रिय घटकाचे प्रमाण निश्चित करणे आवश्यक आहे. नळाच्या पाण्याने धुतल्यानंतर, १०५°C तापमानावर ३० मिनिटे वाळवा, मिश्रणाला ७५°C तापमानावर ठेवा आणि नमुने खलबत्त्यात वाटून ठेवा.
एर्लेनमेयर फ्लास्कमध्ये ०.२ ग्रॅम वाळलेल्या वनस्पतींचे नमुने तोलून घ्या, त्यात ८ मिली HNO3 आणि २ मिली HClO4 घालून रात्रभर बूच लावा. दुसऱ्या दिवशी, वक्र तोंडाचे नरसाळे त्रिकोणी फ्लास्कमध्ये ठेवून, पांढरा धूर येईपर्यंत आणि विघटनाचे द्रावण स्वच्छ होईपर्यंत विद्युत-औष्णिक विघटन प्रक्रिया सुरू ठेवा. खोलीच्या तापमानापर्यंत थंड झाल्यावर, मिश्रण १० मिलीच्या व्हॉल्युमेट्रिक फ्लास्कमध्ये स्थानांतरित करण्यात आले. कॅडमियमचे प्रमाण ॲटोमिक ॲबसॉर्प्शन स्पेक्ट्रोमीटरवर (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) निश्चित करण्यात आले. (GB/T 23739-2009).
०.२ ग्रॅम वाळलेल्या वनस्पतींचे नमुने ५० मिलीच्या प्लास्टिक बाटलीत तोलून घ्या, त्यात १० मिली १ मोल/लिटर एचसीएल (HCl) घाला, बाटली बंद करून १५ तास हलवा आणि गाळा. पिपेट वापरून, योग्य विरळतेसाठी आवश्यक तेवढा गाळलेला द्रव काढा आणि Sr2+ चे प्रमाण १ ग्रॅम/लिटरवर आणण्यासाठी त्यात SrCl2 द्रावण घाला. कॅल्शियमचे (Ca) प्रमाण ॲटोमिक ॲबसॉर्प्शन स्पेक्ट्रोमीटर (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) वापरून निश्चित करण्यात आले.
मॅलोनडायल्डिहाइड (MDA), सुपरऑक्साइड डिसम्युटेस (SOD), पेरॉक्सिडेस (POD), आणि कॅटलेस (CAT) संदर्भ किट पद्धत (DNM-9602, बीजिंग पुलांग न्यू टेक्नॉलॉजी कं, लि., उत्पादन नोंदणी क्रमांक), संबंधित मापन किट क्रमांक वापरा: जिंगयाओडियानजी (क्वॉसी) वर्ड २०१३ क्र. २४००१४७).
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंग नमुन्याचे ०.०५ ग्रॅम वजन करून घ्या आणि ट्यूबच्या बाजूने अँथ्रोन-सल्फ्यूरिक ॲसिड रिॲजंट टाका. द्रव पूर्णपणे मिसळण्यासाठी ट्यूब २-३ सेकंद हलवा. ट्यूब १५ मिनिटांसाठी टेस्ट ट्यूब रॅकवर ठेवा. विद्राव्य शर्करांचे प्रमाण ६२० एनएम तरंगलांबीवर यूव्ही-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) वापरून निश्चित करण्यात आले.
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या ताज्या नमुन्याचे ०.५ ग्रॅम वजन करा, ५ मिली डिस्टिल्ड वॉटरमध्ये एकजीव होईपर्यंत दळा आणि १० मिनिटांसाठी १०,००० ग्रॅमवर ​​सेंट्रीफ्यूज करा. वरचा द्रव एका निश्चित आकारमानापर्यंत पातळ करा. कुमासी ब्रिलियंट ब्लू पद्धत वापरण्यात आली. विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण स्पेक्ट्रमच्या अतिनील आणि दृश्यमान भागांमध्ये स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) वापरून ५९५ एनएम तरंगलांबीवर निश्चित करण्यात आले आणि बोवाइन सीरम अल्ब्युमिनच्या मानक वक्रावरून त्याची गणना करण्यात आली.
०.५ ग्रॅम ताजा नमुना तोलून घ्या, दळण्यासाठी आणि एकजीव करण्यासाठी त्यात ५ मिली १०% ॲसेटिक ॲसिड घाला, गाळा आणि स्थिर आकारमानापर्यंत विरल करा. निन्हिड्रीन द्रावण वापरून रंगनिर्मिती पद्धत. मुक्त अमिनो ॲसिडचे प्रमाण ५७० एनएम तरंगलांबीवर अल्ट्राव्हायोलेट-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) द्वारे निर्धारित केले गेले आणि मानक ल्युसिन वक्रावरून त्याची गणना केली गेली.
ताज्या नमुन्याचे ०.५ ग्रॅम वजन करा, त्यात सल्फोसॅलिसिलिक ॲसिडच्या ३% द्रावणाचे ५ मिली टाका, वॉटर बाथमध्ये गरम करा आणि १० मिनिटे हलवा. थंड झाल्यावर, द्रावण गाळून स्थिर आकारमानापर्यंत पातळ केले गेले. ॲसिड निन्हिड्रीन क्रोमोजेनिक पद्धत वापरली गेली. प्रोलाइनचे प्रमाण ५२० एनएम तरंगलांबीवर यूव्ही-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) द्वारे निर्धारित केले गेले आणि प्रोलाइन मानक वक्रावरून त्याची गणना केली गेली.
पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायनाच्या फार्माकोपिया (२०१५ आवृत्ती) नुसार, हाय परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (HPLC) द्वारे सॅपोनिन्सचे प्रमाण निश्चित करण्यात आले. HPLC चे मूलभूत तत्त्व म्हणजे मोबाइल फेज म्हणून उच्च-दाबाचा द्रव वापरणे आणि अतिसूक्ष्म कणांसाठी स्टेशनरी फेज कॉलमवर अत्यंत कार्यक्षम विलगीकरण तंत्रज्ञान लागू करणे. यासाठी लागणारी कौशल्ये खालीलप्रमाणे आहेत:
HPLC परिस्थिती आणि प्रणाली योग्यता चाचणी (तक्ता १): खालील तक्त्यानुसार ग्रेडियंट इल्युशन केले गेले, ज्यामध्ये फिलर म्हणून ऑक्टाडेसिलसिलेनसह बांधलेले सिलिका जेल, मोबाइल फेज A म्हणून ॲसिटोनाइट्रिल, मोबाइल फेज B म्हणून पाणी वापरले गेले आणि डिटेक्शन वेव्हलेंथ २०३ nm होती. पॅनाक्स नोटोजिनसेंग सॅपोनिन्सच्या R1 पीकवरून गणना केलेल्या सैद्धांतिक कपांची संख्या किमान ४००० असावी.
संदर्भ द्रावणाची तयारी: जिनोसेनोसाइड्स Rg1, जिनोसेनोसाइड्स Rb1 आणि नोटोजिनोसाइड्स R1 यांचे अचूक वजन करा, त्यात मिथेनॉल घालून प्रति मिली 0.4 मिलीग्राम जिनोसेनोसाइड Rg1, 0.4 मिलीग्राम जिनोसेनोसाइड Rb1 आणि 0.1 मिलीग्राम नोटोजिनोसाइड R1 यांचे मिश्र द्रावण मिळवा.
चाचणी द्रावण तयार करणे: ०.६ ग्रॅम सॅनक्सिन पावडर तोलून घ्या आणि त्यात ५० मिली मेथॅनॉल घाला. मिश्रणाचे वजन (W1) करून ते रात्रभर तसेच ठेवले. त्यानंतर हे मिश्र द्रावण ८०° से. तापमानाच्या वॉटर बाथमध्ये २ तास हलके उकळले. थंड झाल्यावर, मिश्र द्रावणाचे वजन करा आणि त्यातून मिळालेले मेथॅनॉल W1 च्या पहिल्या वजनात मिसळा. नंतर चांगले हलवून गाळा. गाळलेला द्रव निर्धारणासाठी बाजूला ठेवण्यात आला.
सॅपोनीनचे प्रमाण 10 µl मानक द्रावण आणि 10 µl गाळलेल्या द्रावणाने अचूकपणे शोषले गेले आणि HPLC (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.)24 मध्ये इंजेक्ट केले गेले.
मानक वक्र: Rg1, Rb1, R1 मिश्र मानक द्रावणाचे निर्धारण, क्रोमॅटोग्राफीच्या अटी वरीलप्रमाणेच आहेत. y-अक्षावर मोजलेले पीक क्षेत्रफळ आणि क्ष-अक्षावर मानक द्रावणातील सॅपोनीनची सांद्रता घेऊन मानक वक्र काढा. सॅपोनीनची सांद्रता मोजण्यासाठी नमुन्याचे मोजलेले पीक क्षेत्रफळ मानक वक्रामध्ये टाका.
पी. नोटोजेनसिंग्जचा ०.१ ग्रॅम नमुना तोलून घ्या आणि त्यात ७०% CH3OH द्रावणाचे ५० मिली घाला. २ तास सोनिकेट करा, नंतर ४००० आरपीएमवर १० मिनिटे सेंट्रीफ्यूज करा. सुपरनॅटंटचा १ मिली घ्या आणि तो १२ पट विरल करा. फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण २४९ एनएम तरंगलांबीवर अल्ट्राव्हायोलेट-व्हिजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शांघाय युआनक्सी इन्स्ट्रुमेंट कं., लि., चीन) द्वारे निर्धारित केले गेले. क्वेर्सेटिन हा एक मानक मुबलक पदार्थ आहे⁸.
एक्सेल २०१० सॉफ्टवेअर वापरून डेटाची मांडणी करण्यात आली. एसपीएसएस स्टॅटिस्टिक्स २० सॉफ्टवेअर वापरून डेटाच्या विचलनाचे विश्लेषण करण्यात आले. चित्र ओरिजिन प्रो ९.१ द्वारे काढण्यात आले. गणना केलेल्या सांख्यिकीमध्ये मध्यमान ± प्रमाण विचलन यांचा समावेश आहे. सांख्यिकीय महत्त्वाची विधाने P<0.05 वर आधारित आहेत.
त्याच तीव्रतेच्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची पर्ण फवारणी केल्यास, चुन्याचा वापर वाढल्याने पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅल्शियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या वाढले (तक्ता २). चुन्याचा वापर न करण्याच्या तुलनेत, ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न करता ३७५० किलो पीपीएम चुन्यामुळे कॅल्शियमचे प्रमाण २१२% ने वाढले. चुन्याच्या वापराचा दर तोच असताना, फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडची तीव्रता वाढल्याने कॅल्शियमचे प्रमाण किंचित वाढले.
मुळांमधील कॅडमियमचे (Cd) प्रमाण ०.२२ ते ०.७० मिग्रॅ/किलो इतके होते. ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता समान असताना, चुन्याचा वापर वाढल्याने २२५० किलो प्रति हेक्टर कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. नियंत्रणाच्या तुलनेत, जेव्हा मुळांवर २२५० किलो प्रति ग्रॅम चुना आणि ०.१ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केली, तेव्हा कॅडमियमचे प्रमाण ६८.५७% ने कमी झाले. चुन्याशिवाय आणि ७५० किलो प्रति हेक्टर चुना वापरल्यावर, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. २२५० किलो प्रति ग्रॅम चुना आणि ३७५० किलो प्रति ग्रॅम चुना वापरल्याने, ऑक्झॅलिक ॲसिडची तीव्रता वाढल्याने मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वाढले. याव्यतिरिक्त, 2D विश्लेषणातून असे दिसून आले की पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळातील कॅल्शियम (Ca) च्या प्रमाणावर चुन्याचा (F = 82.84**), कॅडमियम (Cd) च्या प्रमाणावर चुन्याचा (F = 74.99**) आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडचा (F = 74.99**) लक्षणीय परिणाम झाला. (F = 7.72*).
चुन्याच्या वापराचा दर आणि ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढवल्याने, MDA चे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. चुन्याने प्रक्रिया केलेल्या आणि ३७५० किलो ग्रॅम/मी² चुन्याने प्रक्रिया केलेल्या पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील MDA च्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ७५० किलो प्रति हेक्टर आणि २२५० किलो प्रति हेक्टर चुन्याच्या वापराच्या दरांवर, फवारणी केलेल्या ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिडमधील MDA चे प्रमाण, फवारणी न केलेल्या ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या तुलनेत अनुक्रमे ५८.३८% आणि ४०.२१% कमी होते. जेव्हा ७५० किलो प्रति हेक्टर चुना आणि ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिड मिसळले गेले, तेव्हा MDA चे प्रमाण (७.५७ नॅनोमोल प्रति ग्रॅम) सर्वात कमी होते (आकृती १).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील मॅलॉन्डियलडिहाइडच्या प्रमाणावर ऑक्सॅलिक ऍसिडची फवारणी केल्याचा परिणाम [J]. P<0.05). खालीलप्रमाणेच.
३७५० किलो प्रति हेक्टर प्रति चौरस मीटर चुन्याचा वापर वगळता, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांच्या एसओडी (SOD) क्रियेमध्ये कोणताही लक्षणीय फरक दिसून आला नाही. ०, ७५० आणि २२५० किलो प्रति हेक्टर प्रति चौरस मीटर चुन्याचा वापर केल्यावर, ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर एसओडीची क्रिया, ऑक्झॅलिक ॲसिडचा वापर न करण्याच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या जास्त होती, जी अनुक्रमे १७७.८९%, ६१.६२% आणि ४५.०८% ने वाढली. मुळांमधील एसओडीची क्रिया (५९८.१८ युनिट्स प्रति ग्रॅम) चुन्याशिवाय उपचार केल्यावर आणि ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर सर्वाधिक होती. त्याच तीव्रतेवर ऑक्झॅलिक ॲसिडशिवाय किंवा ०.१ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर, चुन्याच्या वापराचे प्रमाण वाढल्याने एसओडीची क्रिया वाढली. ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर एसओडीची क्रिया लक्षणीयरीत्या कमी झाली (आकृती २).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमध्ये सुपरऑक्साइड डिसम्युटेस, पेरॉक्सिडेस आणि कॅटलेसच्या क्रियेवर ऑक्सॅलिक ऍसिडची फवारणी केल्याचा परिणाम [J].
मुळांमधील SOD क्रियाशीलतेप्रमाणेच, चुना न वापरता आणि 0.2 mol L-1 ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर मुळांमधील POD क्रियाशीलता (63.33 µmol g-1) सर्वाधिक होती, जी नियंत्रणापेक्षा (25.50 µmol g-1) 148.35% जास्त होती. ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणीची तीव्रता आणि 3750 kg hm −2 चुन्याच्या उपचाराने POD क्रियाशीलता प्रथम वाढली आणि नंतर कमी झाली. 0.1 mol l-1 ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या उपचाराच्या तुलनेत, 0.2 mol l-1 ऑक्झॅलिक ॲसिडने उपचार केल्यावर POD क्रियाशीलता 36.31% ने कमी झाली (आकृती 2).
०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी आणि २२५० किलो/हेक्टर किंवा ३७५० किलो/हेक्टर चुना वापरणे वगळता, CAT क्रियाशीलता नियंत्रणापेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त होती. ऑक्झॅलिक ॲसिड न वापरलेल्या उपचाराच्या तुलनेत, ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड आणि ०.२२५० किलो/हेक्टर/मीटर किंवा ३७५० किलो/हेक्टर/मीटर चुना वापरलेल्या उपचारांमधील CAT क्रियाशीलता अनुक्रमे २७६.०८%, २७६.६९% आणि ३३.०५% ने वाढली. ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडने उपचार केलेल्या मुळांची CAT क्रियाशीलता (८०३.५२ मायक्रोमोल/ग्रॅम) सर्वाधिक होती. ३७५० किलो/हेक्टर/मीटर चुना आणि ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या उपचारात CAT क्रियाशीलता (१७२.८८ मायक्रोमोल/ग्रॅम) सर्वात कमी होती (आकृती २).
द्विचलीय विश्लेषणातून असे दिसून आले की, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगची CAT क्रियाशीलता आणि MDA यांचा ऑक्झॅलिक ॲसिड किंवा चुन्याच्या फवारणीच्या प्रमाणाशी आणि दोन्ही उपचारांशी लक्षणीय सहसंबंध होता (तक्ता ३). मुळांमधील SOD क्रियाशीलतेचा चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड उपचार किंवा ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणीच्या तीव्रतेशी उच्च सहसंबंध होता. मुळांमधील POD क्रियाशीलतेचा वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणाशी किंवा चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या एकाच वेळी केलेल्या वापराशी लक्षणीय सहसंबंध होता.
चुन्याच्या वापराचे प्रमाण आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने कंद पिकांमधील विद्राव्य साखरेचे प्रमाण कमी झाले. चुन्याचा वापर न करता आणि ७५० किलो·तास·मीटर−२ या दराने चुन्याचा वापर करून केलेल्या पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील विद्राव्य साखरेच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. २२५० किलो प्रति हेक्टर-२ चुना वापरल्यावर, ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडने प्रक्रिया केलेल्या परिस्थितीत विद्राव्य साखरेचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ॲसिडशिवाय केलेल्या फवारणीच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या जास्त होते, ज्यात २२.८१% वाढ झाली. ३७५० किलो·तास·मीटर-२ या प्रमाणात चुना वापरल्यावर, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने विद्राव्य साखरेचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणी केलेल्या परिस्थितीत विद्राव्य साखरेचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ॲसिडशिवाय केलेल्या प्रक्रियेच्या तुलनेत ३८.७७% कमी होते. याव्यतिरिक्त, 0.2 mol l-1 ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या फवारणी उपचारात विद्राव्य साखरेचे प्रमाण सर्वात कमी 205.80 mg g-1 होते (आकृती 3).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील एकूण विद्राव्य साखर आणि विद्राव्य प्रथिनांच्या प्रमाणावर ऑक्झॅलिक ऍसिडची पानांवर फवारणी केल्याचा परिणाम [J].
चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या वापराचा दर वाढल्याने मुळांमधील विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण कमी झाले. चुन्याच्या अनुपस्थितीत, ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या उपचारात विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण नियंत्रणापेक्षा १६.२०% ने लक्षणीयरीत्या कमी होते. ७५० किलो प्रति हेक्टर चुना वापरल्यावर, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील विद्राव्य प्रथिनांच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक दिसून आला नाही. २२५० किलो प्रति तास प्रति चौरस मीटर या चुन्याच्या वापराच्या दराने, ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या उपचारात विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ॲसिड न वापरलेल्या फवारणीच्या उपचारापेक्षा (३५.११%) लक्षणीयरीत्या जास्त होते. जेव्हा ३७५० किलो प्रति तास प्रति चौरस मीटर या दराने चुना वापरला गेला, तेव्हा ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले आणि ०.२ मोल प्रति लिटर या दराने उपचार केल्यावर विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण (२६९.८४ मायक्रोग्रॅम प्रति ग्रॅम) सर्वात कमी होते. १. ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी (आकृती ३).
चुन्याच्या अनुपस्थितीत पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील मुक्त अमिनो आम्लांच्या प्रमाणामध्ये कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ऑक्झॅलिक आम्लाच्या फवारणीची तीव्रता आणि ७५० किलो प्रति हेक्टर चुन्याचा वापर वाढवल्यावर, मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वाढले. ऑक्झॅलिक आम्लाचा वापर न केलेल्या उपचाराच्या तुलनेत, २२५० किलो प्रति हेक्टर चुना आणि ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक आम्लाचा वापर केल्याने मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण ३३.५८% ने लक्षणीयरीत्या वाढले. ऑक्झॅलिक आम्लाच्या फवारणीची तीव्रता आणि ३७५० किलो प्रति हेक्टर चुन्याचा वापर केल्याने, मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक आम्लाच्या फवारणीच्या उपचारात मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक आम्लाचा वापर न केलेल्या उपचाराच्या तुलनेत ४९.७६% कमी होते. ऑक्झॅलिक आम्लाचा वापर न करता उपचार केल्यावर मुक्त अमिनो आम्लांचे प्रमाण सर्वाधिक होते आणि ते २.०९ मिग्रॅ/ग्रॅम इतके होते. 0.2 mol l-1 ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी केल्यावर मुक्त अमिनो ऍसिडचे प्रमाण (1.05 mg g-1) सर्वात कमी होते (आकृती 4).
कॅडमियमच्या ताणाच्या परिस्थितीत पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील मुक्त अमिनो आम्ल आणि प्रोलाइनच्या सामग्रीवर ऑक्सॅलिक आम्लाची पानांवर फवारणी केल्याचा परिणाम [J].
चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या वापराचे प्रमाण वाढल्याने मुळांमधील प्रोलाइनचे प्रमाण कमी झाले. चुन्याच्या अनुपस्थितीत पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या प्रोलाइनच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता आणि चुन्याच्या वापराचे प्रमाण ७५०, २२५० किलो प्रति हेक्टर-२ असे वाढवल्यावर, प्रोलाइनचे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वाढले. ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणीच्या उपचारातील प्रोलाइनचे प्रमाण, ०.१ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिड फवारणीच्या उपचारातील प्रोलाइनच्या प्रमाणापेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त होते, ज्यात अनुक्रमे १९.५२% आणि ४४.३३% वाढ झाली. ३७५० किलो प्रति हेक्टर चुना वापरल्यावर, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने प्रोलाइनचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी झाले. ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर प्रोलाइनचे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ॲसिडशिवाय केलेल्या फवारणीच्या तुलनेत ५४.६८% कमी होते. 0.2 mol/l ऑक्झॅलिक ऍसिडने उपचार केल्यावर प्रोलाइनचे प्रमाण सर्वात कमी म्हणजे 11.37 μg/g होते (आकृती 4).
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगमध्ये एकूण सॅपोनिन्सचे प्रमाण Rg1>Rb1>R1 असे होते. ऑक्झॅलिक ऍसिड स्प्रेची वाढती सांद्रता आणि चुना नसताना तीन सॅपोनिन्सच्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही (तक्ता ४).
०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर R1 चे प्रमाण, ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न करता ७५० किंवा ३७५० किलो·तास·मीटर-२ चुना वापरण्याच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या कमी होते. ० किंवा ०.१ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या सांद्रतेमध्ये, चुन्याच्या वापराचा दर वाढल्याने R1 च्या प्रमाणात कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. ०.२ मोल/लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या सांद्रतेवर, ३७५० किलो·तास·मीटर-२ चुन्याचा R1 चा प्रमाण, चुन्याशिवायच्या ४३.८४% प्रमाणापेक्षा लक्षणीयरीत्या कमी होता (तक्ता ४).
ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता आणि 750 kg·h·m−2 या चुन्याच्या वापराच्या दरानुसार Rg1 चे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. 2250 किंवा 3750 kg h m-2 या चुन्याच्या वापराच्या दरावर, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता वाढल्याने Rg1 चे प्रमाण कमी झाले. ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता समान असताना, चुन्याच्या वापराच्या दरात वाढ झाल्याने Rg1 चे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. नियंत्रणाच्या तुलनेत, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या तीन फवारणीच्या तीव्रता आणि 750 kg h m-2 वगळता, Rg1 चे प्रमाण नियंत्रणापेक्षा जास्त होते, तर इतर उपचारांच्या मुळांमधील Rg1 चे प्रमाण नियंत्रणापेक्षा कमी होते. 750 kg gm-2 चुना आणि 0.1 mol l-1 ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यावर Rg1 चे प्रमाण सर्वाधिक होते, जे नियंत्रणापेक्षा 11.54% जास्त होते (तक्ता 4).
ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता आणि २२५० किलो प्रति हेक्टर या दराने चुना वापरल्याने Rb1 चे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. ०.१ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केल्यानंतर, Rb1 चे प्रमाण ३.४६% या कमाल पातळीवर पोहोचले, जे ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी न करण्यापेक्षा ७४.७५% जास्त आहे. चुन्याच्या इतर उपचारांमध्ये, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीच्या वेगवेगळ्या तीव्रतेमध्ये कोणताही लक्षणीय फरक आढळला नाही. जेव्हा ०.१ आणि ०.२ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ॲसिडची फवारणी केली, तेव्हा Rb1 चे प्रमाण प्रथम कमी झाले आणि नंतर वापरलेल्या चुन्याचे प्रमाण वाढल्याने ते आणखी कमी झाले (तक्ता ४).
फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या समान सांद्रतेवर, चुन्याच्या वापराचा दर वाढल्याने फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. चुना न वापरल्यास किंवा ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या विविध सांद्रतेसह ३७५० किलो प्रति हेक्टर चुना फवारल्यास फ्लेव्होनॉइडच्या प्रमाणात लक्षणीय फरक आढळला. जेव्हा ७५० आणि २२५० किलो प्रति हेक्टर प्रति चौरस मीटर या दराने चुना वापरला गेला, तेव्हा ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या फवारणीची सांद्रता वाढल्याने फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण प्रथम वाढले आणि नंतर कमी झाले. जेव्हा ७५० किलो प्रति हेक्टर या दराने वापर करून ०.१ मोल प्रति लिटर ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी केली गेली, तेव्हा फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण सर्वाधिक होते आणि ते ४.३८ मिलिग्रॅम प्रति ग्रॅम इतके होते, जे ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी न करता त्याच दराने वापरलेल्या चुन्यापेक्षा १८.३८% जास्त आहे. ऑक्झॅलिक ऍसिड 0.1 mol l-1 ची फवारणी केल्यावर, ऑक्झॅलिक ऍसिडची फवारणी न करता केलेल्या उपचाराच्या आणि 2250 kg hm-2 चुन्याच्या उपचाराच्या तुलनेत फ्लेव्होनॉइड्सचे प्रमाण 21.74% ने वाढले (आकृती 5).
कॅडमियमच्या ताणाखाली पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील फ्लेव्होनॉइड सामग्रीवर ऑक्झॅलेटच्या पर्ण फवारणीचा परिणाम [जे].
द्विचलीय विश्लेषणातून असे दिसून आले की, पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमधील विद्राव्य साखरेचे प्रमाण हे वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणाशी आणि फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या तीव्रतेशी लक्षणीयरीत्या संबंधित होते. कंद पिकांमधील विद्राव्य प्रथिनांचे प्रमाण हे चुना, चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड या दोन्हींच्या वापराच्या दराशी लक्षणीयरीत्या संबंधित होते. मुळांमधील मुक्त अमिनो ॲसिड आणि प्रोलाइनचे प्रमाण हे चुन्याचा वापर दर, ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या फवारणीची तीव्रता, चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड यांच्याशी लक्षणीयरीत्या संबंधित होते (तक्ता ५).
पॅनॅक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील R1 चे प्रमाण हे ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या फवारणीच्या तीव्रतेशी, वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणाशी आणि चुना व ऑक्झॅलिक ऍसिड यांच्या मिश्रणाशी लक्षणीयरीत्या संबंधित होते. फ्लेव्होनॉइडचे प्रमाण हे फवारलेल्या ऑक्झॅलिक ऍसिडच्या तीव्रतेशी आणि वापरलेल्या चुन्याच्या प्रमाणाशी लक्षणीयरीत्या संबंधित होते.
मातीतील कॅडमियम (Cd) स्थिर करून वनस्पतींमधील Cd कमी करण्यासाठी अनेक सुधारक वापरले गेले आहेत, जसे की चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिड30. पिकांमधील कॅडमियमचे प्रमाण कमी करण्यासाठी चुन्याचा मातीमध्ये पूरक म्हणून मोठ्या प्रमाणावर वापर केला जातो31. लिआंग आणि इतरांनी32 अहवाल दिला आहे की जड धातूंनी दूषित झालेली माती पुनर्संचयित करण्यासाठी ऑक्झॅलिक ॲसिडचा देखील वापर केला जाऊ शकतो. दूषित मातीवर ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या विविध सांद्रता लागू केल्यानंतर, मातीतील सेंद्रिय पदार्थ वाढले, कॅटायन विनिमय क्षमता कमी झाली आणि pH मूल्य वाढले33. ऑक्झॅलिक ॲसिड मातीतील धातूंच्या आयनांशी देखील प्रतिक्रिया करू शकते. Cd च्या ताणाखाली, नियंत्रणाच्या तुलनेत पॅनाक्स नोटोजिनसेंगमध्ये Cd चे प्रमाण लक्षणीयरीत्या वाढले. तथापि, जेव्हा चुन्याचा वापर केला गेला, तेव्हा ते लक्षणीयरीत्या कमी झाले. या अभ्यासात, ७५० किलो प्रति हेक्टर चुना वापरल्यावर, मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण राष्ट्रीय मानकापर्यंत पोहोचले (कॅडमियम मर्यादा: Cd≤०.५ मिग्रॅ/किलो, AQSIQ, GB/T १९०८६-२००८३४), आणि २२५० किलो प्रति हेक्टर चुना वापरल्यावर त्याचा परिणाम सर्वोत्तम दिसून आला. चुन्याच्या वापरामुळे जमिनीत Ca²⁺ आणि Cd²⁺ यांच्यातील स्पर्धेची अनेक ठिकाणे निर्माण झाली, आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या मिश्रणामुळे पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण कमी होऊ शकले. तथापि, चुना आणि ऑक्झॅलिक ॲसिडच्या एकत्रित वापरामुळे पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील कॅडमियमचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या कमी होऊन ते राष्ट्रीय मानकापर्यंत पोहोचले. मातीतील Ca2+ वस्तुमान प्रवाहादरम्यान मुळांच्या पृष्ठभागावर शोषले जाते आणि कॅल्शियम चॅनेल (Ca2+-चॅनेल), कॅल्शियम पंप (Ca2+-AT-Pase) आणि Ca2+/H+ अँटीपोर्टर्सद्वारे मुळांच्या पेशींमध्ये घेतले जाऊ शकते, आणि नंतर क्षैतिजरित्या मुळांच्या झायलममध्ये वाहून नेले जाते. मुळांमधील Ca चे प्रमाण Cd च्या प्रमाणाशी लक्षणीयरीत्या नकारात्मक सहसंबंधित होते (P<0.05). Ca चे प्रमाण वाढल्याने Cd चे प्रमाण कमी झाले, जे Ca आणि Cd यांच्यातील विरोधाबद्दलच्या मताशी सुसंगत आहे. विचलन विश्लेषणाने असे दर्शविले की चुन्याच्या प्रमाणाचा पॅनाक्स नोटोजिनसेंगच्या मुळांमधील Ca च्या प्रमाणावर लक्षणीय प्रभाव पडला. पोंग्राक आणि इतरांनी 35 अहवाल दिला की Cd कॅल्शियम ऑक्झॅलेट स्फटिकांमधील ऑक्झॅलेटला बांधले जाते आणि Ca शी स्पर्धा करते. तथापि, ऑक्झॅलेटद्वारे Ca चे नियमन लक्षणीय नव्हते. यावरून असे दिसून आले की ऑक्झॅलिक आम्ल आणि Ca2+ द्वारे तयार झालेल्या कॅल्शियम ऑक्झॅलेटचे अवक्षेपण हे एक साधे अवक्षेपण नव्हते, आणि सह-अवक्षेपण प्रक्रिया विविध चयापचय मार्गांद्वारे नियंत्रित केली जाऊ शकते.