तुमच्या ब्राउझरमध्ये सध्या जावास्क्रिप्ट अक्षम आहे. जावास्क्रिप्ट अक्षम केल्यावर या वेबसाइटची काही वैशिष्ट्ये कार्य करणार नाहीत.
तुमच्या विशिष्ट तपशीलांसह आणि आवडीच्या विशिष्ट औषधांसह नोंदणी करा आणि आम्ही तुम्ही प्रदान केलेली माहिती आमच्या विस्तृत डेटाबेसमधील लेखांशी जुळवू आणि तुम्हाला त्वरित एक पीडीएफ प्रत ईमेल करू.
बॅन-लॅन-जेन ग्रॅन्युल उंदरांमध्ये डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस कमी करतात आतड्यांतील मायक्रोबायोटा मॉड्युलेट करून आणि आतड्यांतील SCFA डेरिव्हेटिव्ह-GLP-1 उत्पादन पुनर्संचयित करून.
जिओ पेंग,१-३,*ली शी,४,*झेंग लिन,३,५ डुआन लिफांग,१ गाओ झेंग्झियान,२,५ दिहू,१ ली जी,६ ली झियाओफेंग,६ शेन झियांगचुन,५ जिओ हैताओ२१पेकिंग युनिव्हर्सिटी शेन्झेन हॉस्पिटल डिपार्टमेंट ऑफ फार्मसी, शेन्झेन, पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायना; २शेन्झेन युनिव्हर्सिटी हेल्थ सायन्स सेंटर स्कूल ऑफ फार्मसी, शेन्झेन, पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायना; ३गुइझो मेडिकल युनिव्हर्सिटी इंजिनिअरिंग टेक्नॉलॉजी रिसर्च सेंटर ऑफ एथनिक मेडिसिन अँड ट्रॅडिशनल चायनीज मेडिसिन डेव्हलपमेंट अँड अॅप्लिकेशन मिनिस्ट्री ऑफ एज्युकेशन, गुइझो प्रांतीय की लॅबोरेटरी ऑफ फार्मसी, गुइझो मेडिकल युनिव्हर्सिटी, गुइझाओ, पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायना; ४ गॅस्ट्रोएन्टेरोलॉजी विभाग, पेकिंग युनिव्हर्सिटी शेन्झेन हॉस्पिटल, शेन्झेन, पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायना; ५ फार्मसी स्कूल ऑफ, गुइझो मेडिकल युनिव्हर्सिटी, स्टेट की लॅबोरेटरी ऑफ मेडिसिनल प्लांट फंक्शन अँड अॅप्लिकेशन, गुइझाओ; ६ प्रयोगशाळा औषध विभाग, पेकिंग युनिव्हर्सिटी शेन्झेन हॉस्पिटल, शेन्झेन, चीन [email protected] शेन झियांगचुन, स्कूल ऑफ फार्मसी, गुइझो मेडिकल युनिव्हर्सिटी, गुइझो, पीपल्स रिपब्लिक ऑफ चायना, ५५०००४, ईमेल [email protected] उद्देश: GLP-१-आधारित थेरपी हा दाहक आतड्यांसंबंधी रोगासाठी एक नवीन उपचार पर्याय आहे.बॅन-लॅन-जेन (BLG) ग्रॅन्यूल हे एक ज्ञात अँटीव्हायरल TCM फॉर्म्युलेशन आहे जे विविध दाहक परिस्थितींच्या उपचारांमध्ये संभाव्य दाहक-विरोधी क्रियाकलाप प्रदर्शित करते.तथापि, कोलायटिसवर त्याचा दाहक-विरोधी प्रभाव आणि त्याची कृतीची यंत्रणा अद्याप अस्पष्ट आहे.पद्धती: उंदरांमध्ये डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट (DSS)-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस स्थापित करणे.BLG च्या संरक्षणात्मक प्रभावाचे मूल्यांकन करण्यासाठी रोग क्रियाकलाप निर्देशांक, दुखापतीचे हिस्टोलॉजिकल मार्कर आणि प्रोइंफ्लेमेटरी सायटोकाइन पातळी केली गेली.आतड्याच्या मायक्रोबायोटा आणि आतड्यांवरील BLG चे परिणाम सीरम GLP-1 पातळी आणि कोलोनिक Gcg, GPR41 आणि GRP43 अभिव्यक्ती, आतड्याच्या मायक्रोबायोटा रचना, मल द्वारे दर्शविले गेले. SCFAs ची पातळी आणि प्राथमिक उंदरांच्या कोलोनिक एपिथेलियल पेशींमधून GLP-1 चे प्रकाशन SCFA-व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादन. परिणाम: BLG उपचारांमुळे शरीराचे वजन कमी होणे, DAI, कोलन शॉर्टनिंग, कोलन टिश्यूचे नुकसान आणि कोलन टिश्यूमध्ये TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे प्रोइंफ्लेमेटरी सायटोकाइन पातळी लक्षणीयरीत्या कमी झाली. याव्यतिरिक्त, BLG उपचार कोलायटिस उंदरांमध्ये कोलोनिक Gcg, GPR41 आणि GRP43 अभिव्यक्ती आणि सीरम GLP-1 पातळी लक्षणीयरीत्या पुनर्संचयित करू शकतात आणि अक्करमॅन्सिया आणि प्रीव्होटेलॅसी_UCG-001 सारखे SCFA-उत्पादक जीवाणू वाढवून आणि Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas आणि Oscillibacter सारख्या जीवाणूंची विपुलता कमी करून. याव्यतिरिक्त, BLG उपचारामुळे कोलायटिस उंदरांच्या विष्ठेमध्ये SCFAs ची पातळी लक्षणीयरीत्या वाढू शकते. त्याच वेळी, इन विट्रो प्रयोगांमध्ये असेही दिसून आले की BLG-उपचारित उंदरांच्या विष्ठेचा अर्क GLP-1 स्रावित करणाऱ्या प्राथमिक लहान म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींना मोठ्या प्रमाणात उत्तेजित करू शकतो. निष्कर्ष: या निष्कर्षांवरून असे सूचित होते की BLG मध्ये कोलायटिसविरोधी प्रभाव आहे. BLG मध्ये थेरपी म्हणून विकसित करण्याची क्षमता आहे, किमान अंशतः आतड्यांतील मायक्रोबायोटा मॉड्युलेट करून आणि आतड्यांतील SCFA-व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादन पुनर्संचयित करून क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिससाठी आशादायक औषधे. कीवर्ड: कोलायटिस, बॅन-लॅन-जेन ग्रॅन्युल, आतड्यांतील मायक्रोबायोटा, शॉर्ट-चेन फॅटी अॅसिड, GLP-1
अल्सरेटिव्ह कोलायटिस (UC) हा कोलन आणि गुदाशयाचा एक दीर्घकालीन दाहक रोग आहे ज्यामध्ये वारंवार अतिसार, पोटदुखी, वजन कमी होणे आणि श्लेष्मल रक्तरंजित मल यांचा समावेश आहे.1 अलिकडे, पाश्चात्य जीवनशैलीची वाढती लोकप्रियता पाहता, पूर्वी कमी घटना असलेल्या देशांमध्ये, चीनसह, UC चा प्रसार वाढत आहे.2 ही वाढ सार्वजनिक आरोग्यासाठी मोठ्या समस्या निर्माण करते आणि रुग्णांच्या काम करण्याच्या क्षमतेवर आणि जीवनाच्या गुणवत्तेवर गंभीर परिणाम करते.विशेषतः, UC चे रोगजनन मोठ्या प्रमाणात अस्पष्ट आहे, परंतु सामान्यतः हे मान्य केले जाते की अनुवंशशास्त्र, पर्यावरणीय घटक, आतड्यातील मायक्रोबायोटा आणि रोगप्रतिकारक शक्ती हे सर्व UC च्या विकासात योगदान देतात.3 आजही, UC वर कोणताही उपचार नाही आणि उपचारांचे ध्येय क्लिनिकल लक्षणे नियंत्रित करणे, माफी प्रेरित करणे आणि राखणे, श्लेष्मल त्वचा बरे होण्यास प्रोत्साहन देणे आणि पुनरावृत्ती कमी करणे हे आहे.शास्त्रीय उपचारांमध्ये अमिनोसॅलिसिलेट्स, कॉर्टिकोस्टिरॉईड्स, इम्युनोसप्रेसंट्स आणि बायोलॉजिक्स समाविष्ट आहेत.तथापि, ही औषधे त्यांच्या विविध दुष्परिणामांमुळे इच्छित परिणाम साध्य करू शकत नाहीत.4 अलिकडे, अनेक केस स्टडीजमधून असे दिसून आले आहे की पारंपारिक चिनी औषध (TCM) ने मोठी क्षमता दर्शविली आहे. कमी विषारीपणासह UC पासून मुक्त होण्यास मदत करणे, नवीन TCM उपचारांचा विकास UC.5-7 साठी एक आशादायक उपचार धोरण आहे असे सूचित करते.
बॅनलॅंजेन ग्रॅन्युल्स (BLG) ही बॅनलॅंजेन मुळाच्या पाण्याच्या अर्कापासून बनवलेली एक पारंपारिक चिनी औषधी तयारी आहे.8 त्याच्या अँटीव्हायरल कार्यक्षमतेव्यतिरिक्त, BLG विविध दाहक परिस्थितींच्या उपचारांमध्ये संभाव्य दाहक-विरोधी क्रिया प्रदर्शित करते.9,10 याव्यतिरिक्त, ग्लुकोसिनोलेट्स (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin आणि glucoside हे रेडिक्स आयसॅटिडिसच्या जलीय अर्कांमधून वेगळे केले गेले आहेत आणि ओळखले गेले आहेत) आणि न्यूक्लियोसाइड्स (हायपोक्सॅन्थिन, एडेनोसिन, युरीडिन आणि ग्वानोसिन) आणि इंडिगो आणि इंडिरुबिन सारख्या इंडिगो अल्कलॉइड्स.11,12 मागील अभ्यासांमध्ये चांगले दस्तऐवजीकरण केले गेले आहे की एडेनोसिन, युरीडिन आणि इंडिरुबिन हे संयुगे कोलायटिसच्या वेगवेगळ्या प्राण्यांच्या मॉडेल्समध्ये शक्तिशाली अँटी-कोलायटिस प्रभाव प्रदर्शित करतात.13-17 तथापि, कोलायटिसमध्ये BLG च्या प्रभावीतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी कोणतेही पुरावे-आधारित अभ्यास केले गेले नाहीत. सध्याच्या अभ्यासात, आम्ही डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट (DSS)-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिसवर BLG च्या संरक्षणात्मक प्रभावाची तपासणी केली. C57BL/6 उंदरांमध्ये आणि असे आढळून आले की BLG च्या तोंडी प्रशासनामुळे उंदरांमध्ये DSS-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलन जळजळ लक्षणीयरीत्या कमी होते, त्याची नियामक यंत्रणा आतड्याच्या मायक्रोबायोटाच्या मॉड्युलेशन आणि आतड्यांपासून मिळवलेल्या ग्लुकागॉन-सारखी पेप्टाइड-1 (GLP-1) उत्पादनाच्या पुनर्संचयनाशी संबंधित आहे.
बीएलजी ग्रॅन्यूल (साखरमुक्त, एनएमपीए-मंजूर झेड११०२०३५७; बीजिंग टोंगरेंटांग टेक्नॉलॉजी डेव्हलपमेंट कंपनी लिमिटेड, बीजिंग, चीन; बॅच क्रमांक: २०११०९६६) फार्मसीमधून खरेदी केले गेले. डीएसएस (आण्विक वजन: ३६,०००–५०,००० डाल्टन) एमपी बायोलॉजिकल (सांता आना, यूएसए) कडून खरेदी केले गेले. सल्फासालाझिन (एसएएसपी) (≥ ९८% शुद्धता), हेमॅटोक्सिलिन आणि इओसिन सिग्मा-अल्ड्रिच (सेंट लुईस, एमओ, यूएसए) कडून खरेदी केले गेले. माऊस टीएनएफ-α, आयएल-१β आणि आयएल-६ ल्युमिनेक्स एलिसा अॅसे किट आर अँड डी सिस्टम (मिनियापोलिस, एमएन, यूएसए) कडून खरेदी केले गेले. अ‍ॅसिटिक अ‍ॅसिड, प्रोपियोनिक अ‍ॅसिड आणि ब्युटीरिक अ‍ॅसिड अलादीन इंडस्ट्रीज (शांघाय, चीन) कडून खरेदी केले गेले. २-इथिलब्युटीरिक अ‍ॅसिड मर्क केजीएए (डार्मस्टॅड, जर्मनी) कडून खरेदी केले गेले.
६-८ आठवड्यांचे नर C57BL/6 उंदीर (शरीराचे वजन १८-२२ ग्रॅम) हे बीजिंग वेटाहे लॅबोरेटरी अ‍ॅनिमल टेक्नॉलॉजी कंपनी लिमिटेड (बीजिंग, चीन) कडून खरेदी केले गेले आणि त्यांना २२ ± २ °C तापमानाच्या वातावरणात १२ तास प्रकाश/अंधार चक्रासह ठेवण्यात आले. उंदरांना नवीन वातावरणाशी जुळवून घेण्यासाठी एका आठवड्यासाठी पिण्याच्या पाण्याची मोफत उपलब्धता असलेला मानक उंदीर आहार देण्यात आला. त्यानंतर उंदरांना यादृच्छिकपणे चार गटांमध्ये विभागण्यात आले: नियंत्रण गट, DSS मॉडेल गट, SASP-उपचारित गट (२०० मिग्रॅ/किलो, तोंडी) आणि BLG-उपचारित गट (१ ग्रॅम/किलो, तोंडी). आकृती १A मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, आमच्या मागील अभ्यासानुसार, प्रायोगिक क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस उंदरांमध्ये १.८% DSS च्या तीन चक्रांद्वारे ५ दिवसांसाठी, त्यानंतर ७ दिवसांसाठी डिस्टिल्ड वॉटरद्वारे प्रेरित केले गेले, आमच्या मागील अभ्यासानुसार. १८ SASP आणि BLG उपचारित गटांमधील उंदरांवर दिवसापासून सुरू होऊन दररोज अनुक्रमे SASP आणि BLG उपचारित केले गेले. ०. प्राथमिक प्रयोगांनुसार, BLG चा डोस १ ग्रॅम/किलोग्रॅम असा निश्चित करण्यात आला होता. दरम्यान, साहित्यानुसार SASP चा डोस २०० मिलीग्राम/किलोग्रॅम असा निश्चित करण्यात आला होता. ४ प्रयोगादरम्यान नियंत्रण आणि DSS मॉडेल गटांना समान प्रमाणात पाणी मिळाले.
आकृती १ BLG उंदरांमध्ये DSS-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस सुधारते.(A) क्रॉनिक रिकरंट कोलायटिस आणि उपचारांची प्रायोगिक रचना, (B) शरीराचे वजन बदल, (C) रोग क्रियाकलाप निर्देशांक (DAI) स्कोअर, (D) कोलन लांबी, (E) कोलनची प्रतिनिधी प्रतिमा, (F) H&E स्टेनिंग कोलन (विस्तार, ×100) आणि (G) हिस्टोलॉजिकल स्कोअर. डेटा सरासरी ± SEM (n = 6) म्हणून सादर केला जातो.##p < 0.01 किंवा ###p < 0.001 विरुद्ध नियंत्रण (कॉन) गट; *p < 0.05 किंवा **p < 0.01 किंवा ***p < 0.001 विरुद्ध DSS गट.
शरीराचे वजन, मल सुसंगतता आणि गुदाशय रक्तस्त्राव दररोज नोंदवले गेले. रोग क्रियाकलाप निर्देशांक (DAI) पूर्वी वर्णन केल्याप्रमाणे शरीराचे वजन, मल सुसंगतता आणि गुदाशय रक्तस्त्राव यांचे गुण एकत्रित करून निश्चित केले गेले.19 प्रयोगाच्या शेवटी, सर्व उंदरांना इच्छामृत्यू देण्यात आले आणि पुढील प्रयोगांसाठी रक्त, मल आणि कोलन गोळा करण्यात आले.
कोलन टिश्यू फॉर्मेलिनने निश्चित केले गेले आणि पॅराफिनमध्ये एम्बेड केले गेले. ५-मायक्रॉन विभाग बनवले गेले आणि हेमॅटोक्सिलिन-इओसिन (H&E) ने रंगवले गेले, नंतर आंधळे केले गेले आणि आधी वर्णन केल्याप्रमाणे स्कोअर केले गेले.१९
ट्रायझोल अभिकर्मक (इन्व्हिट्रोजन, कार्ल्सबॅड, सीए) द्वारे कोलन टिश्यूचा एकूण आरएनए काढला गेला, त्यानंतर रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस (ताकारा, कुसात्सु, शिगा, जपान) वापरून सीडीएनए काढला गेला. एसवायबीआर ग्रीन मास्टर (रोशे, बासेल, स्वित्झर्लंड) सह रिअल-टाइम पीसीआर प्रणाली वापरून क्वांटिटेटिव्ह पीसीआर केले गेले. लक्ष्य जीन ट्रान्सक्रिप्ट्स β-अॅक्टिनमध्ये सामान्यीकृत केले गेले आणि 2-ΔΔCT पद्धती वापरून डेटाचे विश्लेषण केले गेले. जीन प्राइमर अनुक्रम तक्ता 1 मध्ये दर्शविले आहेत.
आधी वर्णन केल्याप्रमाणे प्राथमिक उंदरांच्या कोलोनिक एपिथेलियल सेल आयसोलेशन आणि कल्चर केले गेले.20 थोडक्यात, 6-8 आठवड्यांच्या उंदरांच्या कोलन प्रथम गर्भाशयाच्या विस्थापनाद्वारे बलिदान दिल्यानंतर काढून टाकण्यात आले, नंतर रेखांशाने उघडण्यात आले, हँक्स बॅलेन्स्ड सॉल्ट सोल्युशन (HBSS, कॅल्शियम आणि मॅग्नेशियमशिवाय) सह उपचार केले गेले आणि 0.5-1 मिमी लहान तुकड्यांमध्ये कापले गेले. त्यानंतर, ऊतींना 0.4 mg/mL कोलेजेनेज XI (सिग्मा, पूल, यूके) सह मुक्त DMEM माध्यमात पचवण्यात आले आणि खोलीच्या तपमानावर 5 मिनिटांसाठी 300 xg वर सेंट्रीफ्यूज केले गेले. DMEM माध्यमात (10% फेटल बोवाइन सीरम, 100 युनिट्स/mL पेनिसिलिन आणि 100 µg/mL स्ट्रेप्टोमायसिनसह पूरक) 37 °C वर गोळी पुन्हा सस्पेंशन करा आणि नायलॉन जाळीतून जा (छिद्र आकार ~250 µm). कोलोनिक एपिथेलियल पेशींचे काही भाग काचेच्या तळाच्या डिशमध्ये ठेवण्यात आले आणि एसिटिक अॅसिड, प्रोपियोनिक अॅसिड, ब्युटीरिक आम्ल आणि उंदरांच्या विष्ठेचे अर्क ३७°C, ५% CO2 वर २ तास ठेवा.
कोलन टिश्यूचे PBS सोबत एकरूपीकरण करण्यात आले आणि ल्युमिनेक्स ELISA अॅसे किट्स (R&D सिस्टम्स, मिनियापोलिस, MN, USA) वापरून कोलन टिश्यूमधील सायटोकिन्स IL-6, TNF-α आणि IL-1β चे स्तर शोधण्यात आले. त्याचप्रमाणे, उत्पादकाच्या सूचनांनुसार प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींच्या सीरम आणि कल्चर माध्यमातील GLP-1 पातळी ELISA किट (बायोस्वॅम्प, वुहान, चीन) वापरून निश्चित करण्यात आली.
विष्ठेतील एकूण डीएनए डीएनए एक्सट्रॅक्शन किट (टियांजेन, चीन) वापरून काढला गेला. डीएनएची गुणवत्ता आणि प्रमाण अनुक्रमे २६० एनएम/२८० एनएम आणि २६० एनएम/२३० एनएम या प्रमाणात मोजले गेले. त्यानंतर, प्रत्येक एक्सट्रॅक्ट केलेल्या डीएनएचा टेम्पलेट म्हणून वापर करून, वेगवेगळ्या प्रदेशांमध्ये १६ एस आरआरएनए जीनच्या V3-V4 क्षेत्रांना वाढविण्यासाठी विशिष्ट प्राइमर्स ३३८एफ (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) आणि ८०६आर (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) वापरले गेले. पीसीआर उत्पादने QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, जर्मनी) वापरून शुद्ध केली गेली, रिअल-टाइम PCR द्वारे प्रमाणित केली गेली आणि IlluminaMiseq PE300 सिक्वेन्सिंग प्लॅटफॉर्म (Illumina Inc., CA, USA) वापरून अनुक्रमित केली गेली. बायोइन्फॉरमॅटिक्स विश्लेषणासाठी, पूर्वी नोंदवलेल्या प्रोटोकॉलनुसार डेटा प्रोसेसिंग केले गेले.२१,२२ थोडक्यात, कच्च्या एक्सप्रेस फायली फिल्टर करण्यासाठी कटअ‍ॅडॅप्ट (V1.9.1) वापरा. ​​ओटीयू वापरून क्लस्टर केले गेले UPARSE (आवृत्ती 7.0.1001) मध्ये 97% समानता कटऑफ होता आणि UCHIME चा वापर काइमेरिक अनुक्रम काढून टाकण्यासाठी करण्यात आला. SILVA राइबोसोमल RNA जीन डेटाबेसवर आधारित RDP क्लासिफायर (http://rdp.cme.msu.edu/) वापरून समुदाय रचना विश्लेषण आणि वर्गीकरण करण्यात आले.
ताओ आणि इतरांनी पूर्वी वर्णन केल्याप्रमाणे शॉर्ट-चेन फॅटी अॅसिड्स (एसिटिक अॅसिड, प्रोपियोनिक अॅसिड आणि ब्युटीरिक अॅसिड) चे स्तर काही सुधारणांसह मोजले गेले.23 थोडक्यात, 100 मिलीग्राम विष्ठा प्रथम 0.4 मिली डिआयोनाइज्ड पाण्यात निलंबित करण्यात आली, त्यानंतर 0.1 मिली 50% सल्फ्यूरिक अॅसिड आणि 0.5 मिली 2-इथिलब्युटीरिक अॅसिड (अंतर्गत मानक) मध्ये टाकण्यात आली, नंतर एकसंध केले गेले आणि 4°C वर गरम केले गेले. सेंट्रीफ्यूज १२,००० आरपीएमवर १५ मिनिटे C वर. सुपरनॅटंट ०.५ मिली इथरने काढला गेला आणि विश्लेषणासाठी GC मध्ये इंजेक्ट केला गेला. गॅस क्रोमॅटोग्राफी (GC) विश्लेषणासाठी, नमुन्यांचे विश्लेषण GC-२०१० प्लस गॅस क्रोमॅटोग्राफ (शिमाडझू, इंक.) वापरून केले गेले ज्यामध्ये फ्लेम आयनीकरण डिटेक्टर (FID) आहे. ZKAT-624 कॉलम, ३० मीटर × ०.५३ मिमी × ०.३ μm (लांझोउ झोंगके अँटाई अॅनालिटिकल टेक्नॉलॉजी कंपनी लिमिटेड, चीन) वापरून केले गेले. GC सोल्यूशन सॉफ्टवेअर (शिमाडझू, इंक.) वापरून डेटा मिळवण्यात आला. स्प्लिट रेशो १०:१ होता, कॅरियर गॅस नायट्रोजन होता आणि फ्लो रेट ६ मिली/मिनिट होता. इंजेक्शन व्हॉल्यूम १ μL होता. इंजेक्टर आणि डिटेक्टर तापमान ३००°C होते. ओव्हन तापमान १४०°C वर १३.५ मिनिटांसाठी ठेवण्यात आले, नंतर वाढवले ​​गेले १२०°C/मिनिट या दराने २५०°C; तापमान ५ मिनिटे ठेवण्यात आले.
डेटा सरासरी ± सरासरीच्या मानक त्रुटी (SEM) म्हणून सादर केला जातो. डेटाचे महत्त्व एकतर्फी ANOVA द्वारे मूल्यांकन केले गेले आणि त्यानंतर डंकनच्या बहु-श्रेणी चाचणीद्वारे मूल्यांकन केले गेले. सर्व गणनांसाठी ग्राफपॅड प्रिझम 5.0 सॉफ्टवेअर (ग्राफपॅड सॉफ्टवेअर इंक., सॅन दिएगो, सीए, यूएसए) वापरले गेले आणि p < 0.05 सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण मानले गेले.
हे सर्वज्ञात आहे की UC हा तीव्र ओटीपोटात वेदना, अतिसार आणि रक्तस्त्राव असलेला एक क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस रोग आहे. म्हणून, BLG च्या अँटी-कोलायटिस परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी उंदरांमध्ये DSS-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस स्थापित करण्यात आला (आकृती 1A). नियंत्रण गटाच्या तुलनेत, DSS मॉडेल गटातील उंदरांचे शरीराचे वजन लक्षणीयरीत्या कमी झाले आणि DAI जास्त झाले आणि BLG उपचारांच्या 24 दिवसांनंतर हे बदल लक्षणीयरीत्या उलटे झाले (आकृती 1B आणि C). कोलन शॉर्टनिंग हे UC चे एक महत्त्वाचे वैशिष्ट्य आहे. आकृती 1D आणि E मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे, DSS मिळालेल्या उंदरांच्या कोलन लांबी लक्षणीयरीत्या कमी केल्या गेल्या, परंतु BLG उपचारांनी त्यांना आराम मिळाला. त्यानंतर, कोलन जळजळ मूल्यांकन करण्यासाठी हिस्टोपॅथॉलॉजिकल विश्लेषण केले गेले. H&E स्टेन्ड इमेजेस आणि पॅथॉलॉजिकल स्कोअर्सवरून असे दिसून आले की DSS प्रशासनाने कोलन आर्किटेक्चरमध्ये लक्षणीयरीत्या व्यत्यय आणला आणि परिणामी क्रिप्ट विनाश झाला, तर BLG उपचाराने क्रिप्ट विनाश आणि पॅथॉलॉजिकल स्कोअरमध्ये लक्षणीयरीत्या घट केली (आकृती 1F आणि G). उल्लेखनीय म्हणजे, 1 ग्रॅम/किग्रा च्या डोसवर BLG चा संरक्षणात्मक प्रभाव तुलनात्मक होता. २०० मिलीग्राम/किलोग्रामच्या डोसमध्ये SASP. एकत्रितपणे, हे निष्कर्ष सूचित करतात की उंदरांमध्ये DSS-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिसची तीव्रता कमी करण्यात BLG प्रभावी आहे.
TNF-α, IL-1β आणि IL-6 हे कोलोनिक जळजळीचे महत्त्वाचे दाहक मार्कर आहेत. आकृती 2A मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, नियंत्रण गटाच्या तुलनेत DSS ने कोलोनमध्ये TNF-α, IL-1β आणि IL-6 च्या जनुक अभिव्यक्तीमध्ये लक्षणीय वाढ केली. BLG चे प्रशासन हे DSS-मध्यस्थ बदल लक्षणीयरीत्या उलट करू शकते. पुढे, आम्ही कोलोन टिशूमध्ये दाहक सायटोकिन्स TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे स्तर निश्चित करण्यासाठी ELISA चा वापर केला. परिणामांवरून असेही दिसून आले की DSS ने उपचार केलेल्या उंदरांमध्ये TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे कोलोनिक स्तर लक्षणीयरीत्या वाढले होते, तर BLG उपचाराने हे वाढ कमी केली (आकृती 2B).
आकृती २ BLG डीएसएस-उपचारित उंदरांच्या कोलनमध्ये प्रोइन्फ्लेमेटरी सायटोकिन्स TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे जनुक अभिव्यक्ती आणि उत्पादन रोखते.(A) TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे कोलोनिक जनुक अभिव्यक्ती; (B) TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे कोलोनिक प्रथिने पातळी. डेटा सरासरी ± SEM (n = 4–6) म्हणून सादर केला जातो.#p < 0.05 किंवा ##p < 0.01 किंवा ###p < 0.001 विरुद्ध नियंत्रण (कॉन) गट; *p < 0.05 किंवा **p < 0.01 विरुद्ध DSS गट.
UC च्या रोगजनकतेमध्ये आतड्यांसंबंधी डिस्बायोसिस महत्त्वपूर्ण आहे.24 BLG DSS-उपचारित उंदरांच्या आतड्याच्या मायक्रोबायोटाला नियंत्रित करते की नाही हे तपासण्यासाठी, आतड्याच्या सामग्रीच्या बॅक्टेरिया समुदायाचे विश्लेषण करण्यासाठी 16S rRNA अनुक्रमण केले गेले. व्हेन आकृती दर्शविते की तीन गटांमध्ये 385 OTU आहेत. त्याच वेळी, प्रत्येक गटात अद्वितीय OTU होते (आकृती 3A). शिवाय, आकृती 3B आणि C मध्ये दर्शविलेले Chao1 निर्देशांक आणि शॅनन निर्देशांक दर्शविते की BLG-उपचारित उंदरांमध्ये आतड्याच्या मायक्रोबायोटाची समुदाय विविधता कमी झाली आहे, कारण BLG-उपचारित गटात शॅनन निर्देशांक लक्षणीयरीत्या कमी झाला आहे. तीन गटांमध्ये क्लस्टरिंग पॅटर्न निश्चित करण्यासाठी प्रिन्सिपल कंपोनंट विश्लेषण (PCA) आणि प्रिन्सिपल कोऑर्डिनेट विश्लेषण (PCoA) वापरले गेले आणि BLG उपचारानंतर DSS-उपचारित उंदरांची समुदाय रचना स्पष्टपणे वेगळी झाली असल्याचे दर्शविले (आकृती 3D आणि E). हे डेटा सूचित करतात की BLG उपचारांमुळे DSS-प्रेरित कोलायटिस असलेल्या उंदरांच्या समुदाय संरचनेवर लक्षणीय परिणाम झाला.
आकृती ३ BLG DSS-प्रेरित कोलायटिस असलेल्या उंदरांमध्ये आतड्यांतील मायक्रोबायोटाची विविधता बदलते. (A) OTU चा व्हेन आकृती, (B) चाओ1 निर्देशांक, (C) शॅननचा समृद्धी निर्देशांक, (D) प्रिन्सिपल कंपोनंट अॅनालिसिस (PCA) OTU चा स्कोअर प्लॉट, (E) OTU प्रिन्सिपल कोऑर्डिनेट अॅनालिसिस (PCoA) स्कोअर आकृती. डेटा सरासरी ± SEM (n = 6) म्हणून सादर केला आहे.**p < 0.01 विरुद्ध DSS गट.
मल मायक्रोबायोटामधील विशिष्ट बदलांचे मूल्यांकन करण्यासाठी, आम्ही सर्व वर्गीकरण स्तरांवर आतड्यांतील मायक्रोबायोटाच्या रचनेचे विश्लेषण केले. आकृती 4A मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, सर्व गटांमधील मुख्य फाइला फर्मिक्युट्स आणि बॅक्टेरॉइडेट्स होते, त्यानंतर व्हेरुकोमायक्रोबिया होते. नियंत्रण उंदरांच्या तुलनेत डीएसएस-उपचारित उंदरांच्या मल मायक्रोबायल समुदायांमध्ये फर्मिक्युट्स आणि फर्मिक्युट्स/बॅक्टेरॉइडेट्स गुणोत्तरांची सापेक्ष विपुलता लक्षणीयरीत्या वाढली आणि बीएलजी उपचारानंतर हे बदल लक्षणीयरीत्या उलटे झाले. विशेषतः, बीएलजी उपचारांमुळे डीएसएस-प्रेरित कोलायटिस असलेल्या उंदरांच्या विष्ठेत व्हेरुकोबॅक्टेरियमची सापेक्ष विपुलता लक्षणीयरीत्या वाढली. घरगुती पातळीवर, मल मायक्रोबायल समुदायांमध्ये लॅचनोस्पिरियासी, मुरिबाक्युलेसी, अक्करमॅन्सियासी, रुमिनोकोकासी आणि प्रीव्होटेलासी (आकृती 4B) यांचा समावेश होता. डीएसएस गटाच्या तुलनेत, बीएलजीच्या कमी होण्यामुळे अ‍ॅक्करमॅन्सियासीची विपुलता वाढली, परंतु लॅचनोस्पिरियासीची विपुलता कमी झाली आणि रुमिनोकोकासी.विशेषतः, वंशाच्या पातळीवर, विष्ठेतील मायक्रोबायोटा लॅचनोस्पिरा_एनके४ए१३६_ग्रुप, अक्करमॅन्सिया आणि प्रीव्होटेलॅसी_यूसीजी-००१ (आकृती ४क) ने व्यापला होता. या निष्कर्षातून असेही दिसून आले की डीएसएस आव्हानाला प्रतिसाद म्हणून बीएलजी उपचारांनी मायक्रोबायोटा असंतुलन प्रभावीपणे उलट केले, ज्याचे वैशिष्ट्य युबॅक्टेरियम_झाइलानोफिलम_ग्रुप, रुमिनोकोकासी_यूसीजी-०१४, इंटेस्टिनिमोनास आणि ऑसिलीबॅक्टरमध्ये घट आणि अक्करमॅन्सिया आणि प्रीव्होटेलॅसी_यूसीजी-००१ मध्ये वाढ होते.
आकृती ४ बीएलजी डीएसएस-प्रेरित कोलायटिस उंदरांमध्ये आतड्यांतील मायक्रोबायोटाचे प्रमाण बदलते. (अ) फायलम स्तरावर आतड्यांतील मायक्रोबायोटाचे प्रमाण; (ब) कुटुंब स्तरावर आतड्यांतील मायक्रोबायोटाचे प्रमाण; (क) वंशाच्या पातळीवर आतड्यांतील मायक्रोबायोटाचे प्रमाण. डेटा सरासरी ± SEM (n = 6) म्हणून सादर केला जातो. #p < 0.05 किंवा ###p < 0.001 विरुद्ध नियंत्रण (कॉन) गट; *p < 0.05 किंवा **p < 0.01 किंवा ***p < 0.001 विरुद्ध डीएसएस गट.
शॉर्ट-चेन फॅटी अॅसिड्स (SCFAs) हे अक्करमॅन्सिया आणि प्रीव्होटेलॅसी_UCG-001 चे प्रमुख मेटाबोलाइट्स आहेत हे लक्षात घेता, तर एसीटेट, प्रोपियोनेट आणि ब्युटायरेट हे आतड्यांसंबंधी लुमेनमध्ये सर्वात जास्त प्रमाणात आढळणारे SCFAs आहेत, 25-27 आम्ही अजूनही आमच्या अभ्यासात आहोत. आकृती 5 मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, DSS-उपचारित गटात फेकल एसीटेट, प्रोपियोनेट आणि ब्युटायरेट सांद्रता लक्षणीयरीत्या कमी झाली होती, तर BLG उपचार मोठ्या प्रमाणात ही घट दाबू शकले.
आकृती ५. डीएसएस-प्रेरित कोलायटिस असलेल्या उंदरांच्या विष्ठेमध्ये बीएलजी एससीएफएचे प्रमाण वाढवते. (अ) विष्ठेमध्ये एसिटिक आम्लाचे प्रमाण; (ब) विष्ठेमध्ये प्रोपियोनिक आम्लाचे प्रमाण; (क) विष्ठेमध्ये ब्युटीरिक आम्लाचे प्रमाण. डेटा सरासरी ± SEM (n = 6) म्हणून सादर केला आहे. #p < 0.05 किंवा ##p < 0.01 विरुद्ध नियंत्रण (कॉन) गट; *p < 0.05 किंवा **p < 0.01 विरुद्ध डीएसएस गट.
आम्ही पुढे जीनस-लेव्हल डिफरेंशियल SCFA आणि फेकल मायक्रोबायोटा यांच्यातील पिअर्सन सहसंबंध गुणांकाची गणना केली. आकृती 6 मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, अ‍ॅकरमॅन्सिया प्रोपियोनिक अॅसिड (पियर्सन = 0.4866) आणि ब्युटीरिक अॅसिड (पियर्सन = 0.6192) च्या उत्पादनाशी सकारात्मकरित्या सहसंबंधित होता. याउलट, एन्टरमोनास आणि ऑसिलोबॅक्टर दोन्ही अनुक्रमे 0.4709 आणि 0.5104 च्या पिअर्सन गुणांकांसह एसीटेट उत्पादनाशी नकारात्मकरित्या संबंधित होते. त्याचप्रमाणे, रुमिनोकोकासी_यूसीजी-014 अनुक्रमे प्रोपियोनिक अॅसिड (पियर्सन = 0.4508) आणि ब्युटीरिक अॅसिड (पियर्सन = 0.5842) च्या उत्पादनाशी नकारात्मकरित्या सहसंबंधित होता.
आकृती 6 विभेदक SCFAs आणि कोलोनिक सूक्ष्मजंतूंमधील पिअर्सन सहसंबंध विश्लेषण. (A) एसिटिक आम्लासह एन्टरोमोनास; (B) एसिटिक आम्लासह कंकशन बॅसिलस; (C) अ‍ॅकरमॅन्सिया विरुद्ध प्रोपियोनिक आम्लाचा; (D) प्रोपियोनिक आम्लासह रुमिनोकोकस_UCG-014; (E) ब्युटीरिक आम्लासह अकरमॅन्सिया; (F) ) ब्युटीरिक आम्लासह रुमिनोकोकस _UCG-014.
ग्लुकागॉनसारखे पेप्टाइड-१ (GLP-१) हे प्रोग्लुकागॉन (Gcg) चे पेशी-प्रकार-विशिष्ट पोस्ट-ट्रान्सलेशनल उत्पादन आहे ज्यामध्ये दाहक-विरोधी गुणधर्म आहेत.28 आकृती 7 मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, DSS ने Gcg mRNA अभिव्यक्तीमध्ये लक्षणीय घट घडवून आणली. नियंत्रण गटाच्या तुलनेत कोलन आणि BLG उपचार DSS-प्रेरित Gcg घट लक्षणीयरीत्या उलट करू शकतात (आकृती 7A). त्याच वेळी, DSS-उपचारित गटात सीरममधील GLP-1 ची पातळी लक्षणीयरीत्या कमी झाली होती आणि BLG उपचार मोठ्या प्रमाणात ही घट रोखू शकतात (आकृती 7B). शॉर्ट-चेन फॅटी अॅसिड G-प्रोटीन-कपल्ड रिसेप्टर 43 (GRP43) आणि G-प्रोटीन-कपल्ड रिसेप्टर 41 (GRP41) सक्रियतेद्वारे GLP-1 स्राव उत्तेजित करू शकतात, म्हणून आम्ही कोलायटिस उंदरांच्या कोलनमध्ये GPR41 आणि GRP43 देखील तपासले आणि आढळले की DSS आव्हानानंतर GRP43 आणि GPR41 ची कोलोनिक mRNA अभिव्यक्ती लक्षणीयरीत्या कमी झाली होती आणि BLG उपचार प्रभावीपणे बचाव करू शकतात. हे घटतात (आकृती 7C आणि D).
आकृती ७ BLG मुळे DSS-उपचारित उंदरांमध्ये सीरम GLP-1 पातळी आणि कोलोनिक Gcg, GPR41 आणि GRP43 mRNA अभिव्यक्ती वाढते. (A) कोलन टिशूमध्ये Gcg mRNA अभिव्यक्ती; (B) सीरममध्ये GLP-1 पातळी; (C) कोलन टिशूमध्ये GPR41 mRNA अभिव्यक्ती; (D) कोलन टिशूमध्ये GPR43 mRNA अभिव्यक्ती. डेटा सरासरी ± SEM (n = 5–6) म्हणून सादर केला जातो.#p < 0.05 किंवा ##p < 0.01 विरुद्ध नियंत्रण (कॉन) गट; *p < 0.05 विरुद्ध DSS गट.
बीएलजी उपचारामुळे डीएसएस-उपचारित उंदरांमध्ये सीरम जीएलपी-१ पातळी, कोलोनिक जीसीजी एमआरएनए अभिव्यक्ती आणि मल एससीएफए पातळी वाढू शकते, म्हणून आम्ही प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींमधून जीएलपी-१ सोडण्यावर एसीटेट, प्रोपियोनेट आणि ब्युटायरेट तसेच नियंत्रण (एफ-कॉन), डीएसएस कोलायटिस (एफ-कॉन) -डीएसएस) आणि बीएलजी-उपचारित कोलायटिस (एफ-बीएलजी) उंदरांचे पुढील परीक्षण केले. आकृती 8A मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, अनुक्रमे 2 एमएम एसिटिक अॅसिड, प्रोपियोनिक अॅसिड आणि ब्युटायरिक अॅसिडने उपचारित केलेल्या प्राथमिक माऊस कोलोनिक एपिथेलियल पेशींनी मागील अभ्यासांशी सुसंगतपणे जीएलपी-१ सोडण्यास लक्षणीयरीत्या उत्तेजित केले.29,30 त्याचप्रमाणे, सर्व एफ-कॉन, एफ-डीएसएस आणि एफ-बीएलजी (0.25 ग्रॅम विष्ठेच्या समतुल्य) ने प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींमधून जीएलपी-१ सोडण्यास मोठ्या प्रमाणात उत्तेजित केले. उल्लेखनीय म्हणजे, एफ-डीएसएस-उपचारित प्राथमिक माऊस कोलोनिक एपिथेलियल पेशींद्वारे सोडण्यात येणाऱ्या जीएलपी-१ चे प्रमाण त्यापेक्षा खूपच कमी होते. एफ-कॉन आणि एफ-बीएलजी-उपचारित प्राथमिक उंदरांच्या कोलोनिक एपिथेलियल पेशी. (आकृती 8B). या डेटावरून असे सूचित होते की बीएलजी उपचारांमुळे आतड्यांतील एससीएफए-व्युत्पन्न जीएलपी-1 उत्पादन लक्षणीयरीत्या पुनर्संचयित झाले.
आकृती ८ BLG-व्युत्पन्न SCFA प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींमधून GLP-1 सोडण्यास उत्तेजित करते. (A) एसिटिक अॅसिड, प्रोपियोनिक अॅसिड आणि ब्युटीरिक अॅसिडने प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींमधून GLP-1 सोडण्यास उत्तेजित केले; (B) मल अर्क F-Con, F-DSS आणि F-BLG उत्तेजित प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशी GLP-1 सोडण्याचे प्रमाण. कोलोनिक एपिथेलियल पेशींचे प्रमाण काचेच्या तळाशी असलेल्या पेट्री डिशमध्ये ठेवण्यात आले आणि अनुक्रमे 2 mM एसिटिक अॅसिड, प्रोपियोनिक अॅसिड, ब्युटीरिक अॅसिड आणि मल अर्क F-Con, F-DSS आणि F-BLG (0.25 ग्रॅम विष्ठेच्या समतुल्य) सह उपचार केले गेले. अनुक्रमे ३७°C वर २ तास, ५% CO2. प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल पेशींमधून सोडल्या जाणाऱ्या GLP-1 चे प्रमाण ELISA द्वारे शोधले गेले. डेटा सरासरी ± SEM (n = 3) म्हणून सादर केला जातो.#p < ०.०५ किंवा ##p < ०.०१ विरुद्ध रिक्त किंवा F-कॉन; *p < ०.०५ विरुद्ध F-DSS.
संक्षेप: एस, एसिटिक आम्ल; प्रो, प्रोपियोनिक आम्ल; तथापि, ब्युटीरिक आम्ल; एफ-कॉन, नियंत्रण उंदरांपासून मिळणारा विष्ठेचा अर्क; एफ-डीएसएस, कोलायटिस उंदरांपासून मिळणारा विष्ठेचा अर्क; एफ-बीएलजी, बीएलजी-उपचारित कोलन दाहक उंदरांच्या विष्ठेचा अर्क.
जागतिक आरोग्य संघटनेने एक अपवर्तक रोग म्हणून सूचीबद्ध केलेला, UC हा जागतिक धोका बनत आहे; तथापि, रोगाचा अंदाज लावण्यासाठी, प्रतिबंध करण्यासाठी आणि उपचार करण्यासाठी प्रभावी पद्धती अजूनही मर्यादित आहेत. म्हणून, UC साठी नवीन सुरक्षित आणि प्रभावी उपचारात्मक धोरणे शोधण्याची आणि विकसित करण्याची तातडीची आवश्यकता आहे. पारंपारिक चिनी औषध तयारी हा एक आशादायक पर्याय आहे कारण शतकानुशतके चिनी लोकसंख्येमध्ये UC च्या उपचारात अनेक पारंपारिक चिनी औषध तयारी प्रभावी असल्याचे दिसून आले आहे आणि त्या सर्व जैविक सेंद्रिय आणि नैसर्गिक पदार्थ आहेत जे बहुतेक मानव आणि प्राण्यांसाठी निरुपद्रवी आहेत.31,32 या अभ्यासाचा उद्देश UC च्या उपचारांसाठी सुरक्षित आणि प्रभावी पारंपारिक चिनी औषध तयारी शोधणे आणि त्याच्या कृतीची यंत्रणा एक्सप्लोर करणे आहे.BLG हा फ्लूच्या उपचारांसाठी वापरला जाणारा एक सुप्रसिद्ध चीनी हर्बल सूत्र आहे.8,33 आमच्या प्रयोगशाळेत आणि इतरांमध्ये केलेल्या कामातून असे दिसून आले आहे की BLG सारख्याच कच्च्या मालापासून बनवलेले प्रक्रिया केलेले पारंपारिक चीनी औषध उत्पादन इंडिगो, मानवांमध्ये आणि प्राण्यांमध्ये UC च्या उपचारात लक्षणीय कार्यक्षमता प्रदर्शित करते.4,34 तथापि, BLG चे कोलायटिस विरोधी प्रभाव आणि त्याचे परिणाम यंत्रणा अस्पष्ट आहे. सध्याच्या अभ्यासात, आमचे निकाल दर्शवितात की BLG प्रभावीपणे DSS-प्रेरित कोलोनिक जळजळ कमी करते, जे संबंधित आहे आतड्यांतील मायक्रोबायोटाचे मॉड्युलेशन आणि आतड्यांमधून मिळणारे GLP-1 उत्पादन पुनर्संचयित करणे.
हे सर्वज्ञात आहे की UC मध्ये वजन कमी होणे, अतिसार, गुदाशय रक्तस्त्राव आणि कोलन म्यूकोसल नुकसान यासारख्या विशिष्ट क्लिनिकल वैशिष्ट्यांसह पुनरावृत्ती होणाऱ्या कालावधीद्वारे वैशिष्ट्यीकृत केले जाते.35 अशाप्रकारे, पाच दिवसांसाठी 1.8% DSS चे तीन चक्र देऊन, त्यानंतर सात दिवस पिण्याचे पाणी देऊन क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिसचे व्यवस्थापन केले गेले. आकृती 1B मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे, चढ-उतार वजन कमी होणे आणि DAI स्कोअरने क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिसचे यशस्वी प्रेरण दर्शविले. BLG ने उपचार घेतलेल्या गटातील उंदरांनी 8 व्या दिवसापासून अपशिफ्ट रिकव्हरी दर्शविली, जी 24 व्या दिवसापेक्षा लक्षणीयरीत्या वेगळी होती. DAI स्कोअरमध्ये देखील समान बदल दिसून आले, जे कोलायटिसच्या क्लिनिकल सुधारणात सुधारणा दर्शवितात. कोलन दुखापत आणि दाहक स्थितीच्या बाबतीत, कोलनची लांबी, कोलन टिशूचे नुकसान आणि जीन अभिव्यक्ती आणि कोलन टिशूमधील प्रोइंफ्लेमेटरी सायटोकिन्स TNF-α, IL-1β आणि IL-6 चे उत्पादन देखील BLG उपचारानंतर मोठ्या प्रमाणात सुधारले. एकत्रितपणे, हे परिणाम स्पष्टपणे दर्शवितात की उंदरांमध्ये क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिसच्या उपचारात BLG प्रभावी आहे.
BLG त्याचे औषधीय परिणाम कसे करते? मागील असंख्य अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की आतड्यातील मायक्रोबायोटा UC च्या रोगजननात महत्त्वाची भूमिका बजावते आणि मायक्रोबायोम-आधारित आणि मायक्रोबायोम-लक्ष्यित उपचार UC च्या उपचारांसाठी एक अतिशय आकर्षक रणनीती म्हणून उदयास आले आहेत. सध्याच्या अभ्यासात, आम्ही असे दाखवून दिले की BLG उपचारांमुळे आतड्यातील मायक्रोबायोटा रचनेत लक्षणीय बदल झाले आहेत, जे सूचित करते की DSS-प्रेरित कोलायटिस विरुद्ध BLG चा संरक्षणात्मक प्रभाव आतड्यातील मायक्रोबायोटाच्या मॉड्युलेशनशी संबंधित आहे. हे निरीक्षण या कल्पनेशी सुसंगत आहे की आतड्यातील मायक्रोबायोटाच्या होमिओस्टॅसिसचे पुनर्प्रोग्रामिंग करणे हा TCM तयारीची प्रभावीता समजून घेण्यासाठी एक महत्त्वाचा दृष्टिकोन आहे.36,37 उल्लेखनीय म्हणजे, अक्करमॅन्सिया हा एक ग्राम-नकारात्मक आणि काटेकोरपणे अॅनारोबिक बॅक्टेरियम आहे जो आतड्याच्या श्लेष्मल थरात राहतो, जो म्यूकिन्स खराब करतो, प्रोपियोनिक ऍसिड तयार करतो, गॉब्लेट सेल भिन्नता उत्तेजित करतो आणि म्यूकोसाचे अडथळ्याचे अखंडतेचे कार्य राखतो.26 अनेक क्लिनिकल आणि प्राण्यांच्या डेटावरून असे सूचित होते की अक्करमॅन्सिया निरोगी म्यूकोसा,38 आणि अक्करमॅन्सिया spp च्या तोंडी प्रशासनाशी अत्यंत संबंधित आहे. श्लेष्मल त्वचेच्या जळजळीत लक्षणीय सुधारणा होऊ शकते.39 आमच्या सध्याच्या डेटावरून असे दिसून येते की BLG उपचारानंतर अक्करमॅन्सियाची सापेक्ष विपुलता लक्षणीयरीत्या वाढली आहे. याव्यतिरिक्त, Prevotellaceae_UCG-001 हा SCFA-उत्पादक जीवाणू आहे.27 अनेक अभ्यासातून असे दिसून आले की कोलायटिस असलेल्या प्राण्यांच्या विष्ठेत Prevotellaceae_UCG-001 कमी सापेक्ष विपुलतेत आढळले.40,41 आमच्या सध्याच्या डेटावरून असेही दिसून येते की BLG उपचार DSS-उपचारित उंदरांच्या कोलनमध्ये Prevotellaceae_UCG-001 ची सापेक्ष विपुलता लक्षणीयरीत्या वाढवू शकतात. याउलट, Oscillibacter हा एक मेसोफिलिक, काटेकोरपणे अॅनारोबिक बॅक्टेरियम आहे.42 असे नोंदवले गेले आहे की UC उंदरांमध्ये Oscillibacter ची सापेक्ष विपुलता लक्षणीयरीत्या वाढली होती आणि IL-6 आणि IL-1β पातळी आणि पॅथॉलॉजिकल स्कोअरशी लक्षणीयरीत्या सकारात्मकरित्या संबंधित होती.43,44 उल्लेखनीय म्हणजे, BLG उपचारांमुळे DSS-उपचारित उंदरांच्या विष्ठेत Oscillibacter ची सापेक्ष विपुलता लक्षणीयरीत्या कमी झाली.विशेषतः, हे BLG-बदललेले बॅक्टेरिया सर्वात जास्त SCFA-उत्पादक जीवाणू होते.मागील अनेक अभ्यासांनी हे सिद्ध केले आहे की SCFAs चे कोलोनिक जळजळ आणि आतड्यांसंबंधी उपकला अखंडतेच्या संरक्षणावर संभाव्य फायदेशीर परिणाम.45,46 आमच्या सध्याच्या डेटामध्ये असेही आढळून आले आहे की BLG-उपचारित उंदरांमध्ये DSS-उपचारित विष्ठेमध्ये SCFA एसीटेट, प्रोपियोनेट आणि ब्युटायरेटचे प्रमाण मोठ्या प्रमाणात वाढले आहे. एकत्रितपणे, हे निष्कर्ष स्पष्टपणे दर्शवितात की BLG उपचार क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस असलेल्या उंदरांमध्ये DSS-प्रेरित SCFA-उत्पादक बॅक्टेरिया प्रभावीपणे वाढवू शकतात.
GLP-1 हे प्रामुख्याने इलियम आणि कोलनमध्ये तयार होणारे इन्क्रिटिन आहे आणि पोट रिकामे होण्यास विलंब करण्यात आणि जेवणानंतर रक्तातील ग्लुकोज कमी करण्यात महत्त्वाची भूमिका बजावते.47 पुराव्यांवरून असे दिसून येते की डायपेप्टिडिल पेप्टिडेस (DPP)-4, एक GLP-1 रिसेप्टर अ‍ॅगोनिस्ट आणि एक GLP-1 नॅनोमेडिसिन उंदरांमध्ये आतड्यांसंबंधी जळजळ प्रभावीपणे कमी करू शकते.48-51 मागील अभ्यासात नोंदवल्याप्रमाणे, उच्च SCFA सांद्रता मानवांमध्ये आणि उंदरांमध्ये प्लाझ्मा GLP-1 पातळीशी संबंधित होती. 52 आमच्या सध्याच्या डेटावरून असे दिसून येते की BLG उपचारानंतर, सीरम GLP-1 पातळी आणि Gcg mRNA अभिव्यक्ती लक्षणीयरीत्या वाढली. त्याचप्रमाणे, DSS-उपचारित कोलायटिस उंदरांच्या विष्ठेच्या अर्कांसह उत्तेजनाच्या तुलनेत BLG-उपचारित कोलायटिस उंदरांच्या विष्ठेच्या अर्कांसह उत्तेजनानंतर कोलोनिक कल्चरमध्ये GLP-1 स्राव लक्षणीयरीत्या वाढला. SCFAs GLP-1 च्या प्रकाशनावर कसा परिणाम करतात? ग्वेन टोलहर्स्ट आणि इतर. SCFA GRP43 आणि GPR41 द्वारे GLP-1 स्राव उत्तेजित करू शकते असे नोंदवले.29 आमचा सध्याचा डेटा असेही दर्शवितो की BLG उपचार DSS-उपचारित उंदरांच्या कोलनमध्ये GRP43 आणि GPR41 च्या mRNA अभिव्यक्तीमध्ये लक्षणीय वाढ करतो. हे डेटा सूचित करतात की BLG उपचार GRP43 आणि GPR41 सक्रिय करून SCFA-प्रोत्साहित GLP-1 उत्पादन पुनर्संचयित करू शकतात.
बीएलजी हे चीनमध्ये दीर्घकालीन ओव्हर-द-काउंटर (ओटीसी) औषध आहे. कुनमिंग उंदरांमध्ये BLG चा जास्तीत जास्त सहन केला जाणारा डोस 80 ग्रॅम/किलो आहे आणि कोणतीही तीव्र विषारीता आढळलेली नाही.53 सध्या, मानवांमध्ये BLG (साखर न वापरता) चा शिफारस केलेला डोस 9-15 ग्रॅम/दिवस (दिवसातून 3 वेळा) आहे. आमच्या अभ्यासात असे दिसून आले आहे की 1 ग्रॅम/किलोग्रॅमवर ​​BLG उंदरांमध्ये DSS-प्रेरित क्रॉनिक रिलेप्सिंग कोलायटिस कमी करते. हा डोस क्लिनिकली वापरल्या जाणाऱ्या BLG डोसच्या जवळ आहे. आमच्या अभ्यासात असेही आढळून आले की त्याची कृतीची यंत्रणा, किमान अंशतः, आतड्यांतील मायक्रोबायोटामधील बदलांद्वारे, विशेषतः SCFA-उत्पादक बॅक्टेरिया, जसे की अक्करमॅन्सिया आणि प्रीव्होटेलॅसी_UCG-001, आतड्यांमधून व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादन पुनर्संचयित करण्यासाठी मध्यस्थी केली जाते. हे निष्कर्ष सूचित करतात की क्लिनिकल कोलायटिस उपचारांसाठी संभाव्य उपचारात्मक एजंट म्हणून BLG चा अधिक विचार करण्यास पात्र आहे. तथापि, ते आतड्यांतील मायक्रोबायोटा कोणत्या अचूक यंत्रणेद्वारे नियंत्रित करते हे मायक्रोबायोटा-कमी असलेल्या उंदरांनी आणि मल बॅक्टेरिया प्रत्यारोपणाद्वारे पुष्टी करणे बाकी आहे.
एस, एसिटिक आम्ल; पण, ब्युटीरिक आम्ल; बीएलजी, पांडन; डीएसएस, डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट; डीएआय, रोग क्रियाकलाप निर्देशांक; डीपीपी, डिपेप्टिडिल पेप्टिडेस; एफआयडी, फ्लेम आयनीकरण डिटेक्टर; एफ-कॉन, उंदरांचे विष्ठेचे अर्क नियंत्रित करते; एफ-डीएसएस, डीएसएस कोलायटिस उंदरांचे विष्ठेचे अर्क; एफ-बीएलजी, बीएलजी-उपचारित कोलायटिस उंदरांचे विष्ठेचे अर्क; जीएलपी-१, ग्लुकागॉनसारखे पेप्टाइड-१; जीसीजी, ग्लुकागॉन; गॅस क्रोमॅटोग्राफी, गॅस क्रोमॅटोग्राफी; जीआरपी४३, जी प्रोटीन-कपल्ड रिसेप्टर ४३; जीआरपी४१, जी प्रोटीन-कपल्ड रिसेप्टर ४१; एच अँड ई, हेमॅटॉक्सिलिन-इओसिन; एचबीएसएस, हँक्स बॅलेन्स्ड सॉल्ट सोल्यूशन; ओटीसी, ओटीसी; पीसीए, प्रिन्सिपल कंपोनंट विश्लेषण; पीसीओए, प्रिन्सिपल कोऑर्डिनेट विश्लेषण; प्रो, प्रोपियोनिक आम्ल; एसएएसपी, सल्फासॅलाझिन; एससीएफए, शॉर्ट-चेन फॅटी अॅसिड्स; चिनी औषध, पारंपारिक चिनी औषध; यूसी, अल्सरेटिव्ह कोलायटिस.
सर्व प्रायोगिक प्रोटोकॉलना पेकिंग युनिव्हर्सिटी शेन्झेन-हाँगकाँग युनिव्हर्सिटी ऑफ सायन्स अँड टेक्नॉलॉजी मेडिकल सेंटर (शेन्झेन, चीन) च्या अ‍ॅनिमल एथिक्स कमिटीने संस्थात्मक मार्गदर्शक तत्त्वे आणि अ‍ॅनिमल रेग्युलेशन्स (एथिक्स नंबर A2020157) नुसार मान्यता दिली.
सर्व लेखकांनी संकल्पना आणि डिझाइन, डेटा संपादन किंवा डेटा विश्लेषण आणि अर्थ लावण्यात महत्त्वपूर्ण योगदान दिले; लेखाचा मसुदा तयार करण्यात किंवा महत्त्वाच्या बौद्धिक सामग्रीचे गंभीरपणे पुनरावलोकन करण्यात भाग घेतला; हस्तलिखित वर्तमान जर्नलमध्ये सादर करण्यास सहमती दर्शविली; शेवटी प्रकाशनासाठी आवृत्ती मंजूर केली; कामाच्या सर्व पैलूंसाठी जबाबदार.
या कामाला नॅशनल नॅचरल सायन्स फाउंडेशन ऑफ चायना (81560676 आणि 81660479), शेन्झेन विद्यापीठाचा प्रथम श्रेणीचा प्रकल्प (86000000210), शेन्झेन विज्ञान आणि तंत्रज्ञान नवोन्मेष समिती निधी (JCYJ20210324093810026), आणि ग्वांगडोंग प्रांतीय वैद्यकीय विज्ञान आणि तंत्रज्ञान संशोधन निधी (A2020157 आणि A2020272), गुइझोउ मेडिकल युनिव्हर्सिटी फार्मसी गुइझोउ प्रांत यांनी पाठिंबा दिला. की लॅबोरेटरी (YWZJ2020-01) आणि पेकिंग युनिव्हर्सिटी शेन्झेन हॉस्पिटल (JCYJ2018009) द्वारे निधी देण्यात आला.
१. तांग बी, झू जे, झांग बी, इत्यादी. उंदरांमध्ये डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट-प्रेरित प्रायोगिक कोलायटिसमध्ये दाहक-विरोधी एजंट म्हणून ट्रिप्टोलाइडची उपचारात्मक क्षमता.pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
२. कपलान जीजी. आयबीडीचा जागतिक भार: २०१५ ते २०२५ पर्यंत. नॅट रेव्ह गॅस्ट्रोएन्टेरॉल हेपॅटोल.२०१५;१२:७२०–७२७.डोई: १०.१०३८/एनआरगॅस्ट्रो.२०१५.१५०
३. पेंग जे, झेंग टीटी, ली झ्यू, आणि इतर. वनस्पती-व्युत्पन्न अल्कलॉइड्स: दाहक आतड्यांसंबंधी रोगात आशादायक रोग सुधारक.प्रीफार्माकोलॉजी.२०१९;१०:३५१.doi:१०.३३८९/fphar.२०१९.००३५१
४. जिओ हैतेंग, पेंग जी, वेन बी, इत्यादी. इंडिगो नॅचरलिस उंदरांमध्ये डीएसएस-प्रेरित कोलायटिसमध्ये कोलोनिक ऑक्सिडेटिव्ह ताण आणि Th1/Th17 प्रतिसादांना प्रतिबंधित करते.ऑक्सिड मेड सेल लॉन्गेव्ह.२०१९;२०१९:९४८०९४५.doi: १०.११५५/२०१९/९४८०९४५
५. चेन एम, डिंग वाय, टोंग झेड. अल्सरेटिव्ह कोलायटिसच्या उपचारात सोफोरा फ्लेव्हसेन्स (सोफोरा फ्लेव्हसेन्स) ची प्रभावीता आणि सुरक्षितता: क्लिनिकल पुरावे आणि संभाव्य यंत्रणा.प्रीफार्माकोलॉजी.२०२०;११:६०३४७६.doi:१०.३३८९/fphar.२०२०.६०३४७६
६. काओ फॅंग, लिऊ जी, शा बेंक्सिंग, पॅन एचएफ. नैसर्गिक उत्पादने: दाहक आतड्यांसंबंधी रोगाच्या उपचारांसाठी प्रायोगिकदृष्ट्या प्रभावी औषधे. कर फार्मास्युटिकल्स.२०१९;२५:४८९३–४९१३.डोई: १०.२१७४/१३८१६१२८२५६६६१९१२१६१५४२२४
७. झांग सी, जियांग एम, लू ए. पारंपारिक चिनी औषधांसह अल्सरेटिव्ह कोलायटिसच्या सहायक उपचारांवर विचार. क्लिनिकल रेव्ह ऍलर्जी लसीकरण.२०१३;४४:२७४–२८३.doi: १०.१००७/s१२०१६-०१२-८३२८-९
८. ली झोंगटेंग, ली ली, चेन टीटी, इत्यादी. हंगामी इन्फ्लूएंझाच्या उपचारात बॅनलॅंजेन ग्रॅन्यूलची प्रभावीता आणि सुरक्षितता: यादृच्छिक नियंत्रित चाचणीसाठी एक अभ्यास प्रोटोकॉल.ट्रायल.२०१५;१६:१२६.डोई: १०.११८६/s१३०६३-०१५-०६४५-x