nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद. तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझर आवृत्तीला मर्यादित CSS सपोर्ट आहे. सर्वोत्तम अनुभवासाठी, आम्ही नवीनतम ब्राउझर आवृत्ती वापरण्याची शिफारस करतो (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये सुसंगतता मोड बंद करा). याव्यतिरिक्त, सतत सपोर्ट सुनिश्चित करण्यासाठी, या साइटमध्ये शैली किंवा JavaScript समाविष्ट नसेल.
हायड्रोजन सल्फाइड (H2S) चे मानवी शरीरावर अनेक शारीरिक आणि पॅथॉलॉजिकल परिणाम होतात. जैविक प्रयोगांमध्ये H2S च्या परिणामांचे मूल्यांकन करण्यासाठी सोडियम हायड्रोसल्फाइड (NaHS) हे औषधीय साधन म्हणून मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाते. NaHS द्रावणातून H2S नष्ट होण्यास काही मिनिटे लागतात, तरीही काही प्राण्यांच्या अभ्यासात पिण्याच्या पाण्यात H2S साठी NaHS द्रावणाचा वापर दाता संयुगे म्हणून केला गेला आहे. काही लेखकांनी सुचवल्याप्रमाणे, उंदीर/उंदराच्या बाटल्यांमध्ये तयार केलेले 30 μM च्या NaHS सांद्रतेसह पिण्याचे पाणी किमान 12-24 तास स्थिर राहू शकते का याचा या अभ्यासात अभ्यास करण्यात आला. पिण्याच्या पाण्यात NaHS (30 μM) चे द्रावण तयार करा आणि ते ताबडतोब उंदीर/उंदराच्या पाण्याच्या बाटल्यांमध्ये ओता. मिथिलीन ब्लू पद्धतीने सल्फाइडचे प्रमाण मोजण्यासाठी पाण्याच्या बाटलीच्या टोकापासून आणि आतील बाजूस 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 आणि 24 तासांवर नमुने गोळा करण्यात आले. याव्यतिरिक्त, नर आणि मादी उंदरांना दोन आठवडे NaHS (30 μM) इंजेक्शन देण्यात आले आणि पहिल्या आठवड्यात आणि दुसऱ्या आठवड्याच्या शेवटी दर दुसऱ्या दिवशी सीरम सल्फाइड सांद्रता मोजण्यात आली. पाण्याच्या बाटलीच्या टोकावरून मिळवलेल्या नमुन्यातील NaHS द्रावण अस्थिर होते; १२ आणि २४ तासांनंतर ते अनुक्रमे ७२% आणि ७५% ने कमी झाले. पाण्याच्या बाटल्यांच्या आतील भागातून मिळवलेल्या नमुन्यांमध्ये, २ तासांत NaHS मध्ये घट लक्षणीय नव्हती; तथापि, १२ आणि २४ तासांनंतर ते अनुक्रमे ४७% आणि ७२% ने कमी झाले. NaHS इंजेक्शनचा नर आणि मादी उंदरांच्या सीरम सल्फाइड पातळीवर परिणाम झाला नाही. शेवटी, पिण्याच्या पाण्यापासून तयार केलेले NaHS द्रावण H2S देणगीसाठी वापरू नये कारण ते द्रावण अस्थिर आहे. प्रशासनाच्या या मार्गामुळे प्राण्यांना NaHS च्या अनियमित आणि अपेक्षेपेक्षा कमी प्रमाणात आढळेल.
१७०० पासून हायड्रोजन सल्फाइड (H2S) विष म्हणून वापरला जात आहे; तथापि, अंतर्जात बायोसिग्नलिंग रेणू म्हणून त्याची संभाव्य भूमिका १९९६ मध्ये आबे आणि किमुरा यांनी वर्णन केली होती. गेल्या तीन दशकांमध्ये, विविध मानवी प्रणालींमध्ये H2S ची असंख्य कार्ये स्पष्ट केली गेली आहेत, ज्यामुळे हे लक्षात आले आहे की H2S दाता रेणूंचा काही रोगांच्या उपचारांमध्ये किंवा व्यवस्थापनात क्लिनिकल उपयोग असू शकतो; अलीकडील पुनरावलोकनासाठी चिरिनो आणि इतर पहा.
अनेक पेशी संवर्धन आणि प्राण्यांच्या अभ्यासांमध्ये H2S च्या परिणामांचे मूल्यांकन करण्यासाठी सोडियम हायड्रोसल्फाइड (NaHS) हे औषधीय साधन म्हणून मोठ्या प्रमाणावर वापरले गेले आहे5,6,7,8. तथापि, NaHS हा एक आदर्श H2S दाता नाही कारण तो द्रावणात H2S/HS- मध्ये वेगाने रूपांतरित होतो, पॉलिसल्फाइड्सने सहजपणे दूषित होतो आणि सहजपणे ऑक्सिडाइझ आणि अस्थिर होतो4,9. अनेक जैविक प्रयोगांमध्ये, NaHS पाण्यात विरघळते, परिणामी निष्क्रिय अस्थिरता आणि H2S10,11,12 चे नुकसान, H2S11,12,13 चे उत्स्फूर्त ऑक्सिडेशन आणि फोटोलिसिस14 होते. H2S11 च्या अस्थिरतेमुळे मूळ द्रावणातील सल्फाइड खूप वेगाने नष्ट होते. खुल्या कंटेनरमध्ये, H2S चे अर्ध-आयुष्य (t1/2) सुमारे 5 मिनिटे असते आणि त्याची एकाग्रता प्रति मिनिट सुमारे 13% कमी होते10. जरी NaHS द्रावणातून हायड्रोजन सल्फाइड नष्ट होण्यास फक्त काही मिनिटे लागतात, तरी काही प्राण्यांच्या अभ्यासात 1-21 आठवड्यांसाठी पिण्याच्या पाण्यात हायड्रोजन सल्फाइडचा स्रोत म्हणून NaHS द्रावण वापरले गेले आहे, दर 12-24 तासांनी NaHS असलेले द्रावण बदलले जात आहे. 15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 ही पद्धत वैज्ञानिक संशोधनाच्या तत्त्वांशी सुसंगत नाही, कारण औषधांचे डोस इतर प्रजातींमध्ये, विशेषतः मानवांमध्ये त्यांच्या वापरावर आधारित असले पाहिजेत.27
बायोमेडिसिनमधील प्रीक्लिनिकल संशोधनाचा उद्देश रुग्णांच्या काळजीची गुणवत्ता किंवा उपचारांच्या निकालांमध्ये सुधारणा करणे आहे. तथापि, बहुतेक प्राण्यांच्या अभ्यासांचे निकाल अद्याप मानवांमध्ये अनुवादित केलेले नाहीत28,29,30. या अनुवादात्मक अपयशाचे एक कारण म्हणजे प्राण्यांच्या अभ्यासाच्या पद्धतशीर गुणवत्तेकडे लक्ष न देणे30. म्हणूनच, या अभ्यासाचे उद्दिष्ट उंदीर/उंदराच्या पाण्याच्या बाटल्यांमध्ये तयार केलेले 30 μM NaHS द्रावण पिण्याच्या पाण्यात 12-24 तास स्थिर राहू शकते का याचा तपास करणे होते, जसे काही अभ्यासांमध्ये दावा केला गेला आहे किंवा सुचवले आहे.
या अभ्यासातील सर्व प्रयोग इराणमधील प्रयोगशाळेतील प्राण्यांची काळजी आणि वापरासाठी प्रकाशित मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार करण्यात आले होते31. या अभ्यासातील सर्व प्रायोगिक अहवालांनी ARRIVE मार्गदर्शक तत्त्वांचे देखील पालन केले होते32. शाहिद बेहेश्ती युनिव्हर्सिटी ऑफ मेडिकल सायन्सेसच्या इन्स्टिट्यूट ऑफ एंडोक्राइन सायन्सेसच्या नीतिमत्ता समितीने या अभ्यासातील सर्व प्रायोगिक प्रक्रियांना मान्यता दिली.
झिंक अ‍ॅसीटेट डायहायड्रेट (CAS: 5970-45-6) आणि निर्जल फेरिक क्लोराइड (CAS: 7705-08-0) हे बायोकेम, केमोपहरमा (कोस्ने-सुर-लॉयर, फ्रान्स) येथून खरेदी केले गेले. सोडियम हायड्रोसल्फाइड हायड्रेट (CAS: 207683-19-0) आणि N,N-डायमिथाइल-पी-फेनिलेनेडायमिन (DMPD) (CAS: 535-47-0) हे सिग्मा-अल्ड्रिच (सेंट लुईस, MO, USA) येथून खरेदी केले गेले. आयसोफ्लुरेन हे पिरामल (बेथलेहेम, PA, USA) येथून खरेदी केले गेले. हायड्रोक्लोरिक अ‍ॅसिड (HCl) हे मर्क (डार्मस्टॅड, जर्मनी) येथून खरेदी केले गेले.
पिण्याच्या पाण्यात NaHS (३० μM) चे द्रावण तयार करा आणि ते लगेच उंदीर/उंदराच्या पाण्याच्या बाटल्यांमध्ये ओता. H2S चा स्रोत म्हणून NaHS चा वापर करणाऱ्या असंख्य प्रकाशनांवर आधारित ही सांद्रता निवडण्यात आली आहे; चर्चा विभाग पहा. NaHS हा एक हायड्रेटेड रेणू आहे ज्यामध्ये वेगवेगळ्या प्रमाणात हायड्रेशनचे पाणी असू शकते (म्हणजे, NaHS•xH2O); उत्पादकाच्या मते, आमच्या अभ्यासात वापरल्या जाणाऱ्या NaHS ची टक्केवारी ७०.७% (म्हणजे, NaHS•१.३ H2O) होती, आणि आम्ही आमच्या गणनेत हे मूल्य विचारात घेतले, जिथे आम्ही ५६.०६ ग्रॅम/मोलचे आण्विक वजन वापरले, जे निर्जल NaHS चे आण्विक वजन आहे. हायड्रेशनचे पाणी (ज्याला स्फटिकीकरणाचे पाणी देखील म्हणतात) हे पाण्याचे रेणू आहेत जे स्फटिकाची रचना बनवतात ३३. हायड्रेट्समध्ये निर्जलीकरणाच्या तुलनेत भिन्न भौतिक आणि थर्मोडायनामिक गुणधर्म असतात ३४.
पिण्याच्या पाण्यात NaHS घालण्यापूर्वी, द्रावणाचे pH आणि तापमान मोजा. प्राण्यांच्या पिंजऱ्यातील उंदीर/उंदराच्या पाण्याच्या बाटलीत ताबडतोब NaHS द्रावण ओता. सल्फाइडचे प्रमाण मोजण्यासाठी बाटलीच्या टोकापासून आणि आतील भागातून 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 आणि 24 तासांवर नमुने गोळा केले गेले. प्रत्येक नमुन्यानंतर लगेच सल्फाइडचे मोजमाप घेण्यात आले. काही अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की पाण्याच्या नळीचा लहान छिद्र आकार H2S बाष्पीभवन कमी करू शकतो15,19. ही समस्या बाटलीतील द्रावणावर देखील लागू होते असे दिसते. तथापि, पाण्याच्या बाटलीच्या मानेतील द्रावणासाठी हे प्रकरण नव्हते, ज्याचा बाष्पीभवन दर जास्त होता आणि तो ऑटोऑक्सिडायझिंग करत होता; खरं तर, प्राण्यांनी हे पाणी प्रथम प्यायले.
अभ्यासात नर आणि मादी विस्टार उंदरांचा वापर करण्यात आला. उंदरांना पॉलीप्रोपायलीन पिंजऱ्यांमध्ये (प्रति पिंजरा २-३ उंदीर) मानक परिस्थितीत (तापमान २१-२६ °C, आर्द्रता ३२-४०%) ठेवण्यात आले होते ज्यामध्ये १२ तास प्रकाश (सकाळी ७ ते संध्याकाळी ७) आणि १२ तास अंधार (सकाळी ७ ते सकाळी ७) होता. उंदरांना नळाच्या पाण्याची मोफत उपलब्धता होती आणि त्यांना मानक चाऊ (खोरक डॅम पार्स कंपनी, तेहरान, इराण) दिले जात असे. वयानुसार जुळणारे (६ महिने) मादी (n=१०, शरीराचे वजन: १९०-२३० ग्रॅम) आणि नर (n=१०, शरीराचे वजन: ३२०-३७० ग्रॅम) विस्टार उंदरांना यादृच्छिकपणे नियंत्रण आणि NaHS (३० μM) उपचारित गटांमध्ये (प्रति गट n=५) विभागण्यात आले. नमुना आकार निश्चित करण्यासाठी, आम्ही KISS (कीप इट सिंपल, स्टुपिड) दृष्टिकोन वापरला, जो मागील अनुभव आणि पॉवर विश्लेषण एकत्र करतो35. आम्ही प्रथम ३ उंदरांवर एक पायलट अभ्यास केला आणि सरासरी सीरम एकूण सल्फाइड पातळी आणि मानक विचलन (८.१ ± ०.८१ μM) निश्चित केले. त्यानंतर, ८०% पॉवर लक्षात घेऊन आणि दोन-बाजूंनी ५% महत्त्व पातळी गृहीत धरून, आम्ही एक प्राथमिक नमुना आकार (मागील साहित्यावर आधारित n = ५) निश्चित केला जो प्रायोगिक प्राण्यांच्या नमुना आकाराची गणना करण्यासाठी फेस्टिंगने सुचवलेल्या पूर्वनिर्धारित मूल्यासह २.०२ च्या प्रमाणित प्रभाव आकाराशी संबंधित होता. हे मूल्य SD (२.०२ × ०.८१) ने गुणाकार केल्यानंतर, अंदाजित शोधण्यायोग्य प्रभाव आकार (१.६ μM) २०% होता, जो स्वीकार्य आहे. याचा अर्थ असा की n = ५/गट गटांमधील २०% सरासरी बदल शोधण्यासाठी पुरेसे आहे. एक्सेल सॉफ्टवेअर ३६ (पूरक आकृती १) च्या यादृच्छिक कार्याचा वापर करून उंदरांना यादृच्छिकपणे नियंत्रण आणि NaSH-उपचारित गटांमध्ये विभागले गेले. परिणाम पातळीवर आंधळेपणा केला गेला आणि जैवरासायनिक मोजमाप करणाऱ्या तपासकांना गट असाइनमेंटची माहिती नव्हती.
दोन्ही लिंगांच्या NaHS गटांना पिण्याच्या पाण्यात तयार केलेल्या 30 μM NaHS द्रावणाने 2 आठवडे उपचार केले गेले; दर 24 तासांनी ताजे द्रावण दिले गेले, त्या दरम्यान शरीराचे वजन मोजले गेले. पहिल्या आणि दुसऱ्या आठवड्याच्या शेवटी दर दुसऱ्या दिवशी आयसोफ्लुरेन भूल अंतर्गत सर्व उंदरांच्या शेपटीच्या टोकांपासून रक्ताचे नमुने गोळा केले गेले. रक्ताचे नमुने 10 मिनिटांसाठी 3000 ग्रॅमवर ​​सेंट्रीफ्यूज केले गेले, सीरम वेगळे केले गेले आणि सीरम युरिया, क्रिएटिनिन (Cr) आणि एकूण सल्फाइडचे त्यानंतरचे मोजमाप करण्यासाठी -80°C वर साठवले गेले. सीरम युरिया एंजाइमॅटिक युरेस पद्धतीने निश्चित केले गेले आणि सीरम क्रिएटिनिन व्यावसायिकरित्या उपलब्ध किट (मॅन कंपनी, तेहरान, इराण) आणि स्वयंचलित विश्लेषक (सिलेक्ट्रा E, अनुक्रमांक 0-2124, नेदरलँड्स) वापरून फोटोमेट्रिक जाफे पद्धतीने निश्चित केले गेले. युरिया आणि Cr साठी भिन्नतेचे इंट्रा- आणि इंटरसे गुणांक 2.5% पेक्षा कमी होते.
पिण्याच्या पाण्यात आणि NaHS असलेल्या सीरममध्ये एकूण सल्फाइड मोजण्यासाठी मिथिलीन ब्लू (MB) पद्धत वापरली जाते; मोठ्या प्रमाणात द्रावण आणि जैविक नमुन्यांमध्ये सल्फाइड मोजण्यासाठी MB ही सर्वात सामान्यपणे वापरली जाणारी पद्धत आहे11,37. एकूण सल्फाइड पूलचा अंदाज घेण्यासाठी आणि जलीय टप्प्यात H2S, HS- आणि S2 स्वरूपात अजैविक सल्फाइड मोजण्यासाठी MB पद्धत वापरली जाऊ शकते38. या पद्धतीमध्ये, झिंक एसीटेट11,38 च्या उपस्थितीत सल्फर झिंक सल्फाइड (ZnS) म्हणून अवक्षेपित केला जातो. इतर क्रोमोफोर्स11 पासून सल्फाइड वेगळे करण्यासाठी झिंक एसीटेट अवक्षेपण ही सर्वात जास्त वापरली जाणारी पद्धत आहे. जोरदार अम्लीय परिस्थितीत HCl11 वापरून ZnS पुन्हा विरघळवण्यात आले. फेरिक क्लोराइड (Fe3+ ऑक्सिडायझिंग एजंट म्हणून कार्य करते) द्वारे उत्प्रेरित केलेल्या अभिक्रियेत सल्फाइड 1:2 च्या स्टोइचियोमेट्रिक प्रमाणात DMPD सोबत प्रतिक्रिया देते आणि डाई MB तयार करते, जे 670 nm40,41 वर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिकली आढळते. MB पद्धतीची शोध मर्यादा अंदाजे 1 μM11 आहे.
या अभ्यासात, प्रत्येक नमुन्याचे १०० μL (द्रावण किंवा सीरम) एका ट्यूबमध्ये जोडले गेले; नंतर २०० μL झिंक अ‍ॅसीटेट (डिस्टिल्ड वॉटरमध्ये १% w/v), १०० μL DMPD (७.२ M HCl मध्ये २० mM), आणि १३३ μL FeCl3 (१.२ M HCl मध्ये ३० mM) जोडले गेले. मिश्रण ३० मिनिटांसाठी ३७°C वर अंधारात उबवले गेले. १० मिनिटांसाठी १०,००० ग्रॅमवर ​​द्रावणाचे केंद्रीकरण केले गेले आणि मायक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, MQX२०००R२, विनोस्की, VT, USA) वापरून सुपरनॅटंटचे शोषण ६७० nm वर वाचले गेले. ddH2O मध्ये NaHS (०-१०० μM) च्या कॅलिब्रेशन वक्र वापरून सल्फाइड सांद्रता निश्चित केली गेली (पूरक आकृती २). मोजमापांसाठी वापरलेले सर्व द्रावण ताजे तयार केले गेले. सल्फाइड मोजमापांसाठी अंतर्ग्रहण आणि आंतरपरीक्षण गुणांक अनुक्रमे २.८% आणि ३.४% होते. आम्ही फोर्टिफाइड नमुना पद्धत वापरून सोडियम थायोसल्फेटयुक्त पिण्याचे पाणी आणि सीरम नमुन्यांमधून मिळवलेले एकूण सल्फाइड देखील निर्धारित केले. सोडियम थायोसल्फेटयुक्त पिण्याचे पाणी आणि सीरम नमुन्यांसाठी मिळवलेले प्रमाण अनुक्रमे ९१ ± १.१% (n = ६) आणि ९३ ± २.४% (n = ६) होते.
विंडोजसाठी ग्राफपॅड प्रिझम सॉफ्टवेअर आवृत्ती 8.0.2 (ग्राफपॅड सॉफ्टवेअर, सॅन दिएगो, सीए, यूएसए, www.graphpad.com) वापरून सांख्यिकीय विश्लेषण केले गेले. NaHS जोडण्यापूर्वी आणि नंतर पिण्याच्या पाण्याचे तापमान आणि pH तुलना करण्यासाठी एक जोडीदार टी-चाचणी वापरली गेली. NaHS-युक्त द्रावणातील H2S चे नुकसान बेसलाइन अपटेकपासून टक्केवारी कमी म्हणून मोजले गेले आणि नुकसान सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण आहे की नाही हे मूल्यांकन करण्यासाठी, आम्ही एक-मार्गी पुनरावृत्ती-माप ANOVA केले आणि त्यानंतर डनेटची बहु-तुलना चाचणी केली. शरीराचे वजन, सीरम युरिया, सीरम क्रिएटिनिन आणि कालांतराने एकूण सीरम सल्फाइडची तुलना वेगवेगळ्या लिंगांच्या नियंत्रण आणि NaHS-उपचारित उंदरांमध्ये द्वि-मार्गी मिश्रित (मध्य-आत) ANOVA वापरून केली गेली आणि त्यानंतर बोनफेरोनी पोस्ट हॉक चाचणी केली गेली. दोन-पुच्छ P मूल्ये < 0.05 सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण मानली गेली.
पिण्याच्या पाण्याचा pH NaHS जोडण्यापूर्वी 7.60 ± 0.01 आणि NaHS जोडल्यानंतर 7.71 ± 0.03 होता (n = 13, p = 0.0029). पिण्याच्या पाण्याचे तापमान 26.5 ± 0.2 होते आणि NaHS जोडल्यानंतर 26.2 ± 0.2 पर्यंत कमी झाले (n = 13, p = 0.0128). पिण्याच्या पाण्यात 30 μM NaHS द्रावण तयार करा आणि ते पाण्याच्या बाटलीत साठवा. NaHS द्रावण अस्थिर असते आणि कालांतराने त्याची एकाग्रता कमी होते. पाण्याच्या बाटलीच्या मानेतून नमुना घेताना, पहिल्या तासात लक्षणीय घट (68.0%) दिसून आली आणि द्रावणातील NaHS चे प्रमाण 12 आणि 24 तासांनंतर अनुक्रमे 72% आणि 75% ने कमी झाले. पाण्याच्या बाटल्यांमधून मिळवलेल्या नमुन्यांमध्ये, २ तासांपर्यंत NaHS मध्ये घट लक्षणीय नव्हती, परंतु १२ आणि २४ तासांनंतर ती अनुक्रमे ४७% आणि ७२% ने कमी झाली. या डेटावरून असे दिसून येते की पिण्याच्या पाण्यात तयार केलेल्या ३० μM द्रावणात NaHS ची टक्केवारी २४ तासांनंतर सुरुवातीच्या मूल्याच्या अंदाजे एक चतुर्थांश इतकी कमी झाली होती, नमुना घेण्याचे स्थान काहीही असो (आकृती १).
उंदीर/उंदीर बाटल्यांमधील पिण्याच्या पाण्यात NaHS द्रावणाची स्थिरता (30 μM). द्रावण तयार केल्यानंतर, पाण्याच्या बाटलीच्या टोकापासून आणि आतील भागातून नमुने घेतले गेले. डेटा सरासरी ± SD (n = 6/गट) म्हणून सादर केला आहे. * आणि #, वेळ 0 च्या तुलनेत P < 0.05. पाण्याच्या बाटलीच्या छायाचित्रात बाटलीचा टोक (उघडण्यासह) आणि शरीर दाखवले आहे. टोकाचे प्रमाण अंदाजे 740 μL आहे.
नव्याने तयार केलेल्या ३० μM द्रावणात NaHS ची एकाग्रता ३०.३ ± ०.४ μM होती (श्रेणी: २८.७–३१.९ μM, n = १२). तथापि, २४ तासांनंतर, NaHS ची एकाग्रता कमी मूल्यापर्यंत कमी झाली (सरासरी: ३.० ± ०.६ μM). आकृती २ मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, अभ्यास कालावधीत उंदरांना ज्या NaHS च्या संपर्कात आणण्यात आले होते ते स्थिर नव्हते.
मादी उंदरांचे शरीराचे वजन कालांतराने लक्षणीयरीत्या वाढले (नियंत्रण गटात २०५.२ ± ५.२ ग्रॅमवरून २१३.८ ± ७.० ग्रॅम आणि NaHS-उपचारित गटात २०४.० ± ८.६ ग्रॅमवरून २११.८ ± ७.५ ग्रॅम); तथापि, NaHS उपचारांचा शरीराच्या वजनावर कोणताही परिणाम झाला नाही (आकृती ३). नर उंदरांचे शरीराचे वजन कालांतराने लक्षणीयरीत्या वाढले (नियंत्रण गटात ३३८.६ ± ८.३ ग्रॅमवरून ३५२.४ ± ६.० ग्रॅम आणि NaHS-उपचारित गटात ३५२.४ ± ५.९ ग्रॅमवरून ३६३.२ ± ४.३ ग्रॅम); तथापि, NaHS उपचारांचा शरीराच्या वजनावर कोणताही परिणाम झाला नाही (आकृती ३).
NaHS (30 μM) घेतल्यानंतर मादी आणि नर उंदरांमध्ये शरीराच्या वजनात बदल. डेटा सरासरी ± SEM म्हणून सादर केला जातो आणि बोनफेरोनी पोस्ट हॉक चाचणीसह भिन्नतेचे द्वि-मार्गी मिश्रित (मधल्या) विश्लेषण वापरून तुलना केली जाते. प्रत्येक गटातील प्रत्येक लिंगाचे n = 5.
संपूर्ण अभ्यासात नियंत्रण आणि NaSH-उपचारित उंदरांमध्ये सीरम युरिया आणि क्रिएटिन फॉस्फेटचे प्रमाण तुलनात्मक होते. शिवाय, NaSH उपचारांचा सीरम युरिया आणि क्रिएटिनक्रोम सांद्रतेवर परिणाम झाला नाही (तक्ता १).
नियंत्रण आणि NaHS-उपचारित नर (8.1 ± 0.5 μM विरुद्ध 9.3 ± 0.2 μM) आणि मादी (9.1 ± 1.0 μM विरुद्ध 6.1 ± 1.1 μM) उंदरांमध्ये बेसलाइन सीरम एकूण सल्फाइड सांद्रता तुलनात्मक होती. नर किंवा मादी उंदरांमध्ये 14 दिवसांसाठी NaHS प्रशासनाचा सीरम एकूण सल्फाइड पातळीवर कोणताही परिणाम झाला नाही (आकृती 4).
NaHS (30 μM) घेतल्यानंतर नर आणि मादी उंदरांमध्ये सीरम एकूण सल्फाइड सांद्रतेत बदल. डेटा सरासरी ± SEM म्हणून सादर केला जातो आणि बोनफेरोनी पोस्ट हॉक चाचणीसह भिन्नतेचे द्वि-मार्गी मिश्रित (आतील) विश्लेषण वापरून तुलना केली जाते. प्रत्येक लिंग, n = 5/गट.
या अभ्यासाचा मुख्य निष्कर्ष असा आहे की NaHS असलेले पिण्याचे पाणी अस्थिर आहे: उंदीर/उंदराच्या पाण्याच्या बाटल्यांच्या टोकापासून आणि आतील सॅम्पलिंगनंतर २४ तासांनंतर सुरुवातीच्या एकूण सल्फाइड सामग्रीपैकी फक्त एक चतुर्थांश शोधता येतो. शिवाय, NaHS द्रावणात H2S कमी झाल्यामुळे उंदरांना अस्थिर NaHS सांद्रतेच्या संपर्कात आले आणि पिण्याच्या पाण्यात NaHS जोडल्याने शरीराचे वजन, सीरम युरिया आणि क्रिएटिन क्रोमियम किंवा एकूण सीरम सल्फाइडवर कोणताही परिणाम झाला नाही.
या अभ्यासात, पिण्याच्या पाण्यात तयार केलेल्या ३० μM NaHS द्रावणातून H2S नुकसान होण्याचा दर ताशी अंदाजे ३% होता. बफर केलेल्या द्रावणात (१० mM PBS मध्ये १०० μM सोडियम सल्फाइड, pH ७.४), ८ h11 पेक्षा जास्त काळानंतर सल्फाइडची एकाग्रता ७% ने कमी झाल्याचे नोंदवले गेले. आम्ही यापूर्वी NaHS च्या इंट्रापेरिटोनियल प्रशासनाचा बचाव करून असे नोंदवले आहे की पिण्याच्या पाण्यात ५४ μM NaHS द्रावणातून सल्फाइड नुकसान होण्याचा दर ताशी अंदाजे २.३% होता (पहिल्या १२ तासात ४%/तास आणि तयारीनंतर शेवटच्या १२ तासात १.४%/तास). ८. पूर्वीच्या अभ्यासात ४३ मध्ये NaHS द्रावणातून H2S चे सतत नुकसान आढळून आले, प्रामुख्याने अस्थिरीकरण आणि ऑक्सिडेशनमुळे. बुडबुडे न जोडताही, H2S अस्थिरीकरणामुळे स्टॉक द्रावणातील सल्फाइड वेगाने नष्ट होते११. अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की सुमारे ३०-६० सेकंदांच्या विरघळण्याच्या प्रक्रियेदरम्यान, बाष्पीभवनामुळे सुमारे ५-१०% H2S नष्ट होते. द्रावणातून H2S चे बाष्पीभवन रोखण्यासाठी, संशोधकांनी अनेक उपाययोजना केल्या आहेत, ज्यामध्ये द्रावण हलके हलवणे12, स्टॉक द्रावण प्लास्टिक फिल्मने झाकणे6 आणि हवेत द्रावणाचा संपर्क कमी करणे समाविष्ट आहे, कारण H2S बाष्पीभवनाचा दर हवा-द्रव इंटरफेसवर अवलंबून असतो.13 H2S चे उत्स्फूर्त ऑक्सिडेशन प्रामुख्याने संक्रमण धातू आयनांमुळे होते, विशेषतः फेरिक लोह, जे पाण्यात अशुद्धता असतात.13 H2S चे ऑक्सिडेशन केल्याने पॉलिसल्फाइड्स (सहसंयोजक बंधांनी जोडलेले सल्फर अणू) तयार होतात11. त्याचे ऑक्सिडेशन टाळण्यासाठी, H2S असलेले द्रावण डीऑक्सिजनयुक्त सॉल्व्हेंट्समध्ये तयार केले जातात44,45 आणि नंतर डीऑक्सिजनेशन सुनिश्चित करण्यासाठी 20-30 मिनिटांसाठी आर्गॉन किंवा नायट्रोजनने शुद्ध केले जातात.11,12,37,44,45,46 डायथिलेनेट्रायमाइनपेंटाएसेटिक अॅसिड (DTPA) हे एक धातूचे चेलेटर (10-4 M) आहे जे एरोबिक द्रावणांमध्ये HS- ऑटोऑक्सिडेशनला प्रतिबंधित करते. DTPA च्या अनुपस्थितीत, HS- चा ऑटोऑक्सिडेशन दर 25°C37,47 वर अंदाजे 3 तासांपेक्षा अंदाजे 50% असतो. शिवाय, 1e-सल्फाइडचे ऑक्सिडेशन अल्ट्राव्हायोलेट प्रकाशाद्वारे उत्प्रेरक होत असल्याने, द्रावण बर्फावर साठवले पाहिजे आणि प्रकाशापासून संरक्षित केले पाहिजे11.
आकृती ५ मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, पाण्यात विरघळल्यावर NaHS Na+ आणि HS-6 मध्ये विरघळते; हे विरघळणे अभिक्रियेच्या pK1 द्वारे निश्चित केले जाते, जे तापमानावर अवलंबून असते: pK1 = 3.122 + 1132/T, जिथे T 5 ते 30°C पर्यंत असते आणि केल्विन (K), K = °C + 273.1548 अंशांमध्ये मोजले जाते. HS- मध्ये उच्च pK2 (pK2 = 19) आहे, म्हणून pH < 96.49 वर, S2- तयार होत नाही किंवा खूप कमी प्रमाणात तयार होतो. याउलट, HS- बेस म्हणून काम करते आणि H2O रेणूपासून H+ स्वीकारते आणि H2O आम्ल म्हणून काम करते आणि H2S आणि OH- मध्ये रूपांतरित होते.
NaHS द्रावणात (३० µM) विरघळलेल्या H2S वायूची निर्मिती. aq, जलीय द्रावण; g, वायू; l, द्रव. सर्व गणना गृहीत धरतात की पाण्याचा pH = ७.० आणि पाण्याचे तापमान = २० °C. BioRender.com सह तयार केलेले.
NaHS द्रावण अस्थिर असल्याचे पुरावे असूनही, अनेक प्राण्यांच्या अभ्यासात पिण्याच्या पाण्यात NaHS द्रावणांचा वापर H2S दाता संयुग म्हणून केला गेला आहे15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 ज्याचा हस्तक्षेप कालावधी 1 ते 21 आठवड्यांपर्यंत होता (तक्ता 2). या अभ्यासादरम्यान, NaHS द्रावण दर 12 तासांनी, 15, 17, 18, 24, 25 तासांनी किंवा 24 तासांनी, 19, 20, 21, 22, 23 तासांनी नूतनीकरण केले गेले. आमच्या निकालांवरून असे दिसून आले की NaHS द्रावणातून H2S कमी झाल्यामुळे उंदरांना अस्थिर औषधांच्या सांद्रतेचा सामना करावा लागला आणि उंदरांच्या पिण्याच्या पाण्यात NaHS चे प्रमाण 12 किंवा 24 तासांपेक्षा जास्त चढ-उतार झाले (आकृती 2 पहा). यापैकी दोन अभ्यासांमध्ये असे आढळून आले आहे की २४ तासांदरम्यान पाण्यात H2S ची पातळी स्थिर राहिली किंवा १२ तासांदरम्यान फक्त २-३% H2S नुकसान दिसून आले, परंतु त्यांनी आधारभूत डेटा किंवा मापन तपशील प्रदान केला नाही. दोन अभ्यासांमधून असे दिसून आले आहे की पाण्याच्या बाटल्यांचा लहान व्यास H2S बाष्पीभवन कमी करू शकतो15,19. तथापि, आमच्या निकालांवरून असे दिसून आले आहे की यामुळे पाण्याच्या बाटलीतून H2S नुकसान १२-२४ तासांऐवजी फक्त २ तासांनी विलंब होऊ शकतो. दोन्ही अभ्यासांमध्ये असे नमूद केले आहे की आम्ही असे गृहीत धरतो की पिण्याच्या पाण्यातील NaHS पातळी बदलली नाही कारण आम्हाला पाण्यात रंग बदल दिसून आला नाही; म्हणून, हवेद्वारे H2S चे ऑक्सिडेशन लक्षणीय नव्हते19,20. आश्चर्याची गोष्ट म्हणजे, ही व्यक्तिनिष्ठ पद्धत कालांतराने त्याच्या एकाग्रतेतील बदल मोजण्याऐवजी पाण्यातील NaHS ची स्थिरता मूल्यांकन करते.
NaHS द्रावणात H2S चे नुकसान pH आणि तापमानाशी संबंधित आहे. आमच्या अभ्यासात नमूद केल्याप्रमाणे, पाण्यात NaHS विरघळल्याने अल्कधर्मी द्रावण तयार होते50. जेव्हा NaHS पाण्यात विरघळते तेव्हा विरघळलेल्या H2S वायूची निर्मिती pH मूल्यावर अवलंबून असते6. द्रावणाचा pH जितका कमी असेल तितका H2S वायू रेणू म्हणून उपस्थित असलेल्या NaHS चे प्रमाण जास्त असेल आणि जलीय द्रावणातून जास्त सल्फाइड नष्ट होईल11. यापैकी कोणत्याही अभ्यासात NaHS साठी द्रावक म्हणून वापरल्या जाणाऱ्या पिण्याच्या पाण्याचा pH नोंदवला गेला नाही. बहुतेक देशांनी स्वीकारलेल्या WHO च्या शिफारशींनुसार, पिण्याच्या पाण्याचा pH 6.5-8.551 च्या श्रेणीत असावा. या pH श्रेणीत, H2S च्या उत्स्फूर्त ऑक्सिडेशनचा दर अंदाजे दहापट वाढतो13. या pH श्रेणीत पाण्यात NaHS विरघळल्याने विरघळलेल्या H2S वायूचे प्रमाण 1 ते 22.5 μM होईल, जे NaHS विरघळण्यापूर्वी पाण्याच्या pH चे निरीक्षण करण्याचे महत्त्व अधोरेखित करते. याव्यतिरिक्त, वरील अभ्यासात नोंदवलेल्या तापमान श्रेणीमुळे (१८-२६ °C) द्रावणात विरघळलेल्या H2S वायूच्या एकाग्रतेत अंदाजे १०% बदल होईल, कारण तापमानातील बदल pK1 मध्ये बदल करतात आणि pK1 मधील लहान बदलांमुळे विरघळलेल्या H2S वायूच्या एकाग्रतेवर लक्षणीय परिणाम होऊ शकतो48. याव्यतिरिक्त, काही अभ्यासांचा दीर्घ कालावधी (५ महिने)22, ज्या दरम्यान मोठ्या प्रमाणात तापमानात बदल अपेक्षित आहे, देखील ही समस्या वाढवते.
एक वगळता सर्व अभ्यासांमध्ये पिण्याच्या पाण्यात ३० μM NaHS द्रावण वापरले गेले. वापरलेल्या डोसचे (म्हणजे ३० μM) स्पष्टीकरण देण्यासाठी, काही लेखकांनी असे निदर्शनास आणून दिले की जलीय अवस्थेत NaHS H2S वायूची समान सांद्रता निर्माण करतो आणि H2S ची शारीरिक श्रेणी १० ते १०० μM आहे, म्हणून ही डोस शारीरिक श्रेणी १५,१६ मध्ये आहे. इतरांनी स्पष्ट केले की ३० μM NaHS प्लाझ्मा H2S पातळी शारीरिक श्रेणीत, म्हणजेच ५-३०० μM १९,२० मध्ये राखू शकते. आम्ही ३० μM (pH = ७.०, T = २० °C) च्या पाण्यात NaHS च्या एकाग्रतेचा विचार करतो, जो काही अभ्यासांमध्ये H2S च्या परिणामांचा अभ्यास करण्यासाठी वापरला गेला होता. आम्ही गणना करू शकतो की विरघळलेल्या H2S वायूची एकाग्रता १४.७ μM आहे, जी सुरुवातीच्या NaHS एकाग्रतेच्या सुमारे ५०% आहे. हे मूल्य इतर लेखकांनी त्याच परिस्थितीत गणना केलेल्या मूल्यासारखे आहे १३,४८.
आमच्या अभ्यासात, NaHS प्रशासनाने शरीराचे वजन बदलले नाही; हा निकाल नर उंदरांवरील इतर अभ्यासांच्या निकालांशी सुसंगत आहे22,23 आणि नर उंदरांवरील18; तथापि, दोन अभ्यासांनी असे नोंदवले आहे की NaSH ने नेफ्रेक्टॉमाइज्ड उंदरांमध्ये कमी झालेले शरीराचे वजन पुनर्संचयित केले24,26, तर इतर अभ्यासांनी NaSH प्रशासनाचा शरीराच्या वजनावर परिणाम नोंदवला नाही15,16,17,19,20,21,25. शिवाय, आमच्या अभ्यासात, NaSH प्रशासनाने सीरम युरिया आणि क्रिएटिन क्रोमियम पातळीवर परिणाम केला नाही, जो दुसऱ्या अहवालाच्या निकालांशी सुसंगत आहे25.
अभ्यासात असे आढळून आले की २ आठवडे पिण्याच्या पाण्यात NaHS जोडल्याने नर आणि मादी उंदरांमध्ये एकूण सीरम सल्फाइड सांद्रतेवर परिणाम झाला नाही. हा निष्कर्ष सेन एट अल. (१६) च्या निकालांशी सुसंगत आहे: पिण्याच्या पाण्यात ३० μM NaHS सह ८ आठवड्यांच्या उपचारांमुळे नियंत्रण उंदरांमध्ये प्लाझ्मा सल्फाइड पातळीवर परिणाम झाला नाही; तथापि, त्यांनी नोंदवले की या हस्तक्षेपाने नेफ्रेक्टॉमाइज्ड उंदरांच्या प्लाझ्मामध्ये कमी झालेले H2S पातळी पुनर्संचयित केली. ली एट अल. (२२) यांनी असेही नोंदवले की ५ महिने पिण्याच्या पाण्यात ३० μM NaHS सह उपचार केल्याने वृद्ध उंदरांमध्ये प्लाझ्मा मुक्त सल्फाइड पातळी सुमारे २६% वाढली. इतर अभ्यासांमध्ये पिण्याच्या पाण्यात NaHS जोडल्यानंतर सल्फाइडच्या रक्ताभिसरणात बदल झाल्याचे नोंदवले गेले नाही.
सात अभ्यासांमध्ये सिग्मा NaHS15,16,19,20,21,22,23 वापरल्याचे नोंदवले गेले परंतु हायड्रेशनच्या पाण्याबद्दल अधिक तपशील दिले गेले नाहीत आणि पाच अभ्यासांमध्ये त्यांच्या तयारी पद्धतींमध्ये वापरल्या जाणाऱ्या NaHS च्या स्त्रोताचा उल्लेख नव्हता17,18,24,25,26. NaHS हा एक हायड्रेटेड रेणू आहे आणि त्याचे हायड्रेशनचे पाणी वेगवेगळे असू शकते, जे दिलेल्या मोलॅरिटीचे द्रावण तयार करण्यासाठी आवश्यक असलेल्या NaHS च्या प्रमाणात प्रभावित करते. उदाहरणार्थ, आमच्या अभ्यासात NaHS चे प्रमाण NaHS•1.3 H2O होते. अशा प्रकारे, या अभ्यासांमध्ये वास्तविक NaHS सांद्रता नोंदवलेल्यापेक्षा कमी असू शकते.
"अशा अल्पकालीन संयुगाचा इतका दीर्घकाळ टिकणारा परिणाम कसा होऊ शकतो?" पॉझगे आणि इतरांनी उंदरांमध्ये कोलायटिसवर NaHS च्या परिणामांचे मूल्यांकन करताना हा प्रश्न विचारला. त्यांना आशा आहे की भविष्यातील अभ्यास या प्रश्नाचे उत्तर देऊ शकतील आणि असा अंदाज लावतील की NaHS द्रावणात H2S आणि Disulfides व्यतिरिक्त अधिक स्थिर पॉलिसल्फाइड्स असू शकतात जे NaHS21 च्या परिणामाचे मध्यस्थी करतात. आणखी एक शक्यता अशी आहे की द्रावणात राहणाऱ्या NaHS च्या खूप कमी सांद्रतेचा देखील फायदेशीर परिणाम होऊ शकतो. खरं तर, ओल्सन आणि इतरांनी पुरावे दिले की रक्तातील H2S चे मायक्रोमोलर स्तर शारीरिक नसतात आणि ते नॅनोमोलर श्रेणीत असावेत किंवा पूर्णपणे अनुपस्थित असावेत13. H2S प्रथिने सल्फेशनद्वारे कार्य करू शकते, एक उलट करता येणारा पोस्ट-ट्रान्सलेशनल बदल जो अनेक प्रथिनांचे कार्य, स्थिरता आणि स्थानिकीकरण प्रभावित करतो52,53,54. खरं तर, शारीरिक परिस्थितीत, अनेक यकृत प्रथिनांपैकी अंदाजे 10% ते 25% सल्फिलेटेड असतात53. दोन्ही अभ्यासांमध्ये NaHS चा जलद नाश झाल्याचे मान्य केले आहे19,23 परंतु आश्चर्यकारकपणे असे म्हटले आहे की "आम्ही दररोज पिण्याच्या पाण्यात NaHS चे प्रमाण बदलून नियंत्रित केले."23 एका अभ्यासात चुकून असे म्हटले आहे की "NaHS हा एक मानक H2S दाता आहे आणि सामान्यतः क्लिनिकल प्रॅक्टिसमध्ये H2S स्वतः बदलण्यासाठी वापरला जातो."18
वरील चर्चेवरून असे दिसून येते की NaHS हे द्रावणातून वाष्पीकरण, ऑक्सिडेशन आणि फोटोलिसिसद्वारे नष्ट होते आणि म्हणूनच द्रावणातून H2S चे नुकसान कमी करण्यासाठी काही सूचना केल्या आहेत. प्रथम, H2S चे बाष्पीभवन वायू-द्रव इंटरफेस13 आणि द्रावणाच्या pH11 वर अवलंबून असते; म्हणून, बाष्पीभवन नुकसान कमी करण्यासाठी, पाण्याच्या बाटलीचा मान आधी वर्णन केल्याप्रमाणे शक्य तितका लहान केला जाऊ शकतो15,19, आणि बाष्पीभवन नुकसान कमी करण्यासाठी पाण्याचा pH स्वीकार्य वरच्या मर्यादेपर्यंत (म्हणजे, 6.5–8.551) समायोजित केला जाऊ शकतो11. दुसरे, H2S चे उत्स्फूर्त ऑक्सिडेशन ऑक्सिजनच्या प्रभावामुळे आणि पिण्याच्या पाण्यात संक्रमण धातू आयनांच्या उपस्थितीमुळे होते13, म्हणून आर्गॉन किंवा नायट्रोजनसह पिण्याच्या पाण्याचे डीऑक्सिजनेशन44,45 आणि मेटल चेलेटर्स37,47 चा वापर सल्फाइडचे ऑक्सिडेशन कमी करू शकतो. तिसरे, H2S चे फोटोविघटन रोखण्यासाठी, पाण्याच्या बाटल्या अॅल्युमिनियम फॉइलने गुंडाळल्या जाऊ शकतात; ही पद्धत स्ट्रेप्टोझोटोसिनसारख्या प्रकाश-संवेदनशील पदार्थांना देखील लागू होते55. शेवटी, पूर्वी नोंदवल्याप्रमाणे56,57,58 मध्ये अजैविक सल्फाइड क्षार पिण्याच्या पाण्यात विरघळण्याऐवजी गॅव्हेजद्वारे दिले जाऊ शकतात; अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की गॅव्हेजद्वारे उंदरांना दिले जाणारे रेडिओएक्टिव्ह सोडियम सल्फाइड चांगले शोषले जाते आणि जवळजवळ सर्व ऊतींमध्ये वितरित केले जाते59. आजपर्यंत, बहुतेक अभ्यासांमध्ये अजैविक सल्फाइड क्षार इंट्रापेरिटोनली दिले गेले आहेत; तथापि, क्लिनिकल सेटिंग्जमध्ये हा मार्ग क्वचितच वापरला जातो60. दुसरीकडे, तोंडी मार्ग हा मानवांमध्ये प्रशासनाचा सर्वात सामान्य आणि पसंतीचा मार्ग आहे61. म्हणून, आम्ही तोंडी गॅव्हेजद्वारे उंदीरांमध्ये H2S दात्यांच्या परिणामांचे मूल्यांकन करण्याची शिफारस करतो.
एक मर्यादा अशी आहे की आम्ही MB पद्धतीचा वापर करून जलीय द्रावण आणि सीरममध्ये सल्फाइड मोजले. सल्फाइड मोजण्याच्या पद्धतींमध्ये आयोडीन टायट्रेशन, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री, इलेक्ट्रोकेमिकल पद्धत (पोटेंशियोमेट्री, अँपेरोमेट्री, क्युलोमेट्रिक पद्धत आणि अँपेरोमेट्रिक पद्धत) आणि क्रोमॅटोग्राफी (गॅस क्रोमॅटोग्राफी आणि उच्च-कार्यक्षमता द्रव क्रोमॅटोग्राफी) यांचा समावेश आहे, ज्यामध्ये सर्वात सामान्यपणे वापरली जाणारी पद्धत MB स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक पद्धत आहे62. जैविक नमुन्यांमध्ये H2S मोजण्यासाठी MB पद्धतीची एक मर्यादा अशी आहे की ती सर्व सल्फर-युक्त संयुगे मोजते आणि मुक्त H2S63 नाही कारण ते अम्लीय परिस्थितीत केले जाते, ज्यामुळे जैविक स्रोतातून सल्फर काढला जातो64. तथापि, अमेरिकन पब्लिक हेल्थ असोसिएशनच्या मते, MB ही पाण्यात सल्फाइड मोजण्यासाठी मानक पद्धत आहे65. म्हणून, ही मर्यादा NaHS असलेल्या द्रावणांच्या अस्थिरतेवरील आमच्या मुख्य निकालांवर परिणाम करत नाही. शिवाय, आमच्या अभ्यासात, NaHS असलेल्या पाण्यात आणि सीरम नमुन्यांमध्ये सल्फाइड मापनांची पुनर्प्राप्ती अनुक्रमे 91% आणि 93% होती. ही मूल्ये पूर्वी नोंदवलेल्या श्रेणी (७७-९२)६६ शी सुसंगत आहेत, जी स्वीकार्य विश्लेषणात्मक अचूकता दर्शवितात४२. हे लक्षात घेण्यासारखे आहे की आम्ही प्रीक्लिनिकल अभ्यासांमध्ये फक्त नर प्राण्यांच्या अभ्यासावर जास्त अवलंबून राहणे टाळण्यासाठी आणि शक्य असेल तेव्हा नर आणि मादी उंदरांचा समावेश करण्यासाठी राष्ट्रीय आरोग्य संस्था (NIH) मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार नर आणि मादी दोन्ही उंदरांचा वापर केला आहे६७. इतरांनीही या मुद्द्यावर भर दिला आहे६९,७०,७१.
शेवटी, या अभ्यासाचे निकाल असे दर्शवतात की पिण्याच्या पाण्यापासून तयार केलेले NaHS द्रावण त्यांच्या अस्थिरतेमुळे H2S निर्माण करण्यासाठी वापरले जाऊ शकत नाही. प्रशासनाच्या या मार्गामुळे प्राण्यांना NaHS च्या अस्थिर आणि अपेक्षेपेक्षा कमी पातळीचा सामना करावा लागू शकतो; म्हणून, हे निष्कर्ष मानवांना लागू होऊ शकत नाहीत.
सध्याच्या अभ्यासादरम्यान वापरलेले आणि/किंवा विश्लेषण केलेले डेटासेट संबंधित लेखकाकडून वाजवी विनंतीनुसार उपलब्ध आहेत.
स्झाबो, के. हायड्रोजन सल्फाइड (H2S) संशोधनाची कालमर्यादा: पर्यावरणीय विषापासून ते जैविक मध्यस्थापर्यंत. बायोकेमिस्ट्री आणि औषधनिर्माणशास्त्र 149, 5–19. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2017.09.010 (2018).
आबे, के. आणि किमुरा, एच. अंतर्जात न्यूरोमोड्युलेटर म्हणून हायड्रोजन सल्फाइडची संभाव्य भूमिका. जर्नल ऑफ न्यूरोसायन्स, १६, १०६६–१०७१. https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.16-03-01066.1996 (१९९६).
चिरिनो, जी., स्झाबो, सी. आणि पापेपेट्रोपौलोस, ए. सस्तन प्राण्यांच्या पेशी, ऊती आणि अवयवांमध्ये हायड्रोजन सल्फाइडची शारीरिक भूमिका. शरीरक्रियाविज्ञान आणि आण्विक जीवशास्त्रातील पुनरावलोकने १०३, ३१–२७६. https://doi.org/10.1152/physrev.00028.2021 (२०२३).
डिलन, केएम, कॅराझोन, आरजे, मॅटसन, जेबी, आणि काश्फी, के. नायट्रिक ऑक्साईड आणि हायड्रोजन सल्फाइडसाठी सेल्युलर डिलिव्हरी सिस्टमचे विकसित होत असलेले वचन: वैयक्तिकृत औषधांचा एक नवीन युग. बायोकेमिस्ट्री आणि फार्माकोलॉजी १७६, ११३९३१. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113931 (२०२०).
सन, एक्स., आणि इतर. स्लो-रिलीज हायड्रोजन सल्फाइड दात्याचा दीर्घकालीन वापर मायोकार्डियल इस्केमिया/रिपरफ्यूजन दुखापत टाळू शकतो. वैज्ञानिक अहवाल 7, 3541. https://doi.org/10.1038/s41598-017-03941-0 (2017).
सिटिडिकोवा, जीएफ, फ्यूच्स, आर., कैंझ, डब्ल्यू., वेगर, टीएम आणि हरमन, ए. बीके चॅनेल फॉस्फोरायलेशन हायड्रोजन सल्फाइड (एच२एस) संवेदनशीलतेचे नियमन करते. फिजियोलॉजीमधील फ्रंटियर्स ५, ४३१. https://doi.org/10.3389/fphys.2014.00431 (२०१४).
सिटिडिकोवा, जीएफ, वेइगर, टीएम आणि हरमन, ए. हायड्रोजन सल्फाइड उंदराच्या पिट्यूटरी ट्यूमर पेशींमध्ये कॅल्शियम-सक्रिय पोटॅशियम (बीके) चॅनेल क्रियाकलाप वाढवते. आर्किट. फ्लूएजर्स. 459, 389–397. https://doi.org/10.1007/s00424-009-0737-0 (2010).
जेडी, एस., आणि इतर. हायड्रोजन सल्फाइड टाइप २ मधुमेही उंदरांमध्ये मायोकार्डियल इस्केमिया-रिपरफ्यूजन दुखापतीविरुद्ध नायट्रेटचा संरक्षणात्मक प्रभाव वाढवते. नायट्रिक ऑक्साइड १२४, १५–२३. https://doi.org/10.1016/j.niox.2022.04.004 (२०२२).
कॉर्व्हिनो, ए., आणि इतर. H2S दाता रसायनशास्त्रातील ट्रेंड आणि हृदय व रक्तवाहिन्यासंबंधी रोगांवर त्याचा प्रभाव. अँटिऑक्सिडंट्स 10, 429. https://doi.org/10.3390/antiox10030429 (2021).
डीलिओन, ईआर, स्टॉय, जीएफ, आणि ओल्सन, केआर (२०१२). जैविक प्रयोगांमध्ये हायड्रोजन सल्फाइडचे निष्क्रिय नुकसान. विश्लेषणात्मक बायोकेमिस्ट्री ४२१, २०३–२०७. https://doi.org/10.1016/j.ab.2011.10.016 (२०१२).
नागी, पी., आणि इतर. शारीरिक नमुन्यांमध्ये हायड्रोजन सल्फाइड मापनाचे रासायनिक पैलू. बायोचिमिका एट बायोफिजिकल अॅक्टा १८४०, ८७६–८९१. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.05.037 (२०१४).
क्लाइन, एलएल.डी. नैसर्गिक पाण्यात हायड्रोजन सल्फाइडचे स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक निर्धारण. लिमनॉल. ओशनोग्र. १४, ४५४–४५८. https://doi.org/10.4319/lo.1969.14.3.0454 (१९६९).
ओल्सन, केआर (२०१२). हायड्रोजन सल्फाइडच्या रसायनशास्त्र आणि जीवशास्त्रातील व्यावहारिक प्रशिक्षण. "अँटीऑक्सिडंट्स." रेडॉक्स सिग्नलिंग. १७, ३२–४४. https://doi.org/10.1089/ars.2011.4401 (२०१२).